建立适用于BALB/c Nude小鼠的急性肝衰竭模型

背景:在干细胞和组织工程领域的动物实验中,免疫缺陷裸小鼠(BALB/c Nude小鼠)对于提升研究准确性具有重要意义。但CCl致BALB/c Nude小鼠发生急性肝衰竭的浓度及检测时间尚不明确,严重影响该动物模型在具有免疫原性的干细胞治疗研究中的应用。目的:通过与C57小鼠急性肝衰竭模型比较,探索腹腔注射CCl建立BALB/c Nude小鼠急性肝衰竭模型的合适浓度和检测时间。方法:将50%浓度的CCl按照4 m L/kg腹腔注射到C57小鼠(n=6)和BALB/c Nude小鼠(n=6)体内,注射后72 h内观察小鼠存活情况。分别将50%,20%,10%浓度的CCl按照4 m L/kg腹腔注射到BALB/c Nude小鼠体内,注射后72 h观察小鼠存活情况,并进行肝脏病理切片形态学观察。根据建立两种小鼠急性肝衰竭模型的最佳CCl浓度,将50%浓度的CCl腹腔注射到C57小鼠体内,将20%浓度的CCl腹腔注射到BALB/c Nude小鼠体内,注射前后检测小鼠血清中谷丙转氨酶和谷草转氨酶水平。结果与结论:(1)CCl注射24 h后,C57小鼠的存活率为50%,BALB/c Nude小鼠全部死亡,提示现有针对C57小鼠的最适CCl浓度不适合BALB/c Nude小鼠造模;(2)注射50%浓度CCl的BALB/c Nude小鼠在24 h之内陆续死亡;注射体积分数20%CCl的小鼠24 h后存活率是66.7%,至注射后72 h存活率仍为66.7%;注射10%浓度CCl的小鼠至注射后72 h全部存活;注射后24 h肝病病理结果显示,CCl注射浓度越小肝脏损伤程度越轻,其中20%浓度的CCl最适合建立BALB/c Nude小鼠急性肝衰竭模型;(3)C57小鼠腹腔注射CCl4h后谷丙转氨酶和谷草转氨酶水平达到最高,1 d时开始下降;BALB/c Nude小鼠在腹腔注射CCl1 d后谷丙转氨酶和谷草转氨酶水平达到最高,3 d时开始下降;(4)结果表明,为提高动物实验可靠性,使用C57小鼠建立急性肝衰竭模型时应选择50%浓度的CCl,在注射后4 h施行干预措施;使用BALB/c Nude小鼠建立急性肝衰竭模型时应选择20%浓度的CCl,在注射后1 d施行干预措施。

Study of primary leiomyosarcoma induced by MNNG in BALB/C nude mice

INTRODUCTIONIt has been well known that MNNG is one of thestrong and multipotential carcinogens that havebeen frequently reported inducing malignant peptictumors.We have successfully induced rat and doggastric adenocarcinomas,squamous cell carcinomasof rat forestomach and gastric leiomyosarcoma

青天葵总黄酮对人鼻咽癌CNE-2荷瘤裸鼠皮下肿瘤的抑制作用

目的:研究青天葵总黄酮(TFNF)对BALB/c裸鼠人鼻咽癌细胞皮下种植模型中TGF-β1/Erk/MAPK通路的调控作用。方法:BALB/c裸鼠皮下接种CNE-2细胞(1.0×107细胞/ml)建立鼻咽癌荷瘤模型,苏木精-伊红染色(HE)行病理判断,免疫组化法(IHC)观察细胞周期调节蛋白-67(Ki67)、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达水平。免疫印迹法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、细胞外调节蛋白激酶(Erk)、p-Erk、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、p-MAPK的蛋白表达水平。试剂盒法评估肾脏、肝脏、脾脏中超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)水平。结果:与模型组比较,高剂量TFNF显著抑制荷瘤小鼠肿瘤体积与质量,显著降低Ki67(55.19%)、PCNA(46.65%)表达水平,提高肾脏、肝脏、脾脏中SOD水平至3.88、2.98、3.71U/mgprot,降低肾脏、肝脏、脾脏的MDA水平至2.19、1.05、2.85nmol/mgprot。TFNF可降低肿瘤组织中TGF-β1(47.36%)、p-Erk/Erk(81.13%)、p-MAPK/MAPK(19.80%)的蛋白表达水平。结论:TFNF可调控TGF-β1/Erk/MAPK通路抑制肿瘤生长,并减轻荷瘤裸鼠主要脏器的氧化损伤发生。

不同类型饲料对BALB/c nude仔鼠存活率和体重的影响

目的:BALB/c Nude小鼠是进行肿瘤学新疗法研究的最常用品种。由于免疫系统的不完善,饲养条件要求很高,不同周龄的鼠,其饲养方式存在差别,湿饲料、粉饲料和颗粒饲料等不同类型饲料对其纯合子(nu/nu)乳鼠体重增长和存活率会有影响。方法:本研究将240只SPF/ELITE级BALB/c Nude妊娠20日的杂合子孕鼠进行饲养1 d,选取21日分娩的乳鼠,及相配母鼠120只,分为4组,分别为颗粒料组、湿饲料组、粉饲料组、固湿饲料搭配组,观察其体重和存活率。结果:BALB/c Nude雄性、雌性鼠用固湿饲料搭配饲养与颗粒饲料饲养方式间存在统计学差异(P<0.05),存活率虽无统计学上的差异,但有上升趋势。

秦皮乙素对BALB/c裸鼠体内胶质瘤生长的影响

【目的】探讨秦皮乙素(Esc)的体内抗胶质瘤活性,为秦皮乙素进一步研究开发为抗胶质瘤药物提供实验依据。【方法】采用C6细胞前肢腋下皮下注射BALB/c裸鼠种瘤构建荷瘤鼠模型;分为4组:模型组、50 mg/kg秦皮乙素组、100mg/kg秦皮乙素组和阳性对照组;采用瘤体积、相对肿瘤增殖率、瘤质量、肿瘤生长抑制率和体质量5个指标评价秦皮乙素的体内抑瘤效果;采用HE染色鉴定瘤体。【结果】与模型组相比,秦皮乙素可显著抑制雄性荷瘤鼠的瘤体积约10倍,瘤质量约8倍,对其体质量无显著影响,与阳性对照药尼莫司汀(ACNU)相似;对雌性荷瘤鼠瘤体的生长无显著抑制作用。【结论】秦皮乙素在雄性荷瘤鼠体内具有显著抗胶质瘤活性,为秦皮乙素进一步开发为抗胶质瘤药物提供了实验依据。

可移植性人髓系白血病BALB/c小鼠模型建立(英文)

造血干/祖细胞移植已成为迄今为止治疗恶性血液病等最有效措施,而建立骨髓型可移植性白血病小鼠模型将为造血干细胞移植治疗白血病提供实验用动物模型。本实验用K562细胞接种BALB/c裸鼠产生红白血病的小鼠模型。将4-5周龄雌性BALB/c裸鼠,腹腔连续两天注射环磷酰胺(CTX)2mg,第3天腹腔或尾静脉直接接种K562白血病细胞2×105-2×106/只。定时取小鼠尾静脉外周血、骨髓细胞用流式细胞术和RT-PCR分别检测CD45,CD13,CD33抗原及bcr/abl融合基因。结果显示,4-5周龄BALB/c裸鼠无论通过腹部或尾静脉接种,无论有无CTX预处理,当接种K562细胞数大于2×105/只时,均可在BALB/c裸鼠身上产生可移植性人髓系白血病,荷瘤小鼠可存活30-60天。结论:腹腔或尾静脉接种大于2×105细胞/只均可产生人髓系白血病荷瘤小鼠模型,有无CTX2毫克/只的预处理不影响4-5周龄BALB/c裸鼠产生人白血病模型。

猪圆环病毒2型感染裸鼠及BALB/c小鼠的研究

用猪圆环病毒2型(PCV2)经腹腔注射BALB/c小鼠及裸鼠各15只,每隔2周1次,共感染3次。BALB/c小鼠初次、再次感染后均未出现明显的临床症状,仅有2只小鼠出现病理变化;从血清中可检测到PCV2核酸及其ORF2抗体;同时淋巴细胞增殖反应显著增强,NK和CTL细胞杀伤率显著升高;CD4+、CD8+、CD3+T淋巴细胞及CD19+B淋巴细胞数量显著减少。裸鼠也未出现明显的临床症状,从血清中可检测到PCV2核酸,但未检测到PCV2 ORF2抗体;除NK细胞杀伤率显著升高外,其余免疫学指标无显著改变。结果表明,BALB/c小鼠比裸鼠对PCV2易感,各项免疫学指标变化与PCV2感染猪一致,但不表现临床症状,仅个别BALB/c小鼠出现病理变化,说明BALB/c小鼠对PCV2不如猪易感。

不同光照时间对BALB/c裸小鼠生长发育及繁殖影响的比较研究

目的比较不同光照时间对BALB/c裸小鼠的影响。方法观察裸小鼠出生后在不同光照时间里的生长情况;记录雌鼠的交配分娩间隔、生产胎数、产仔数及育成率;测定血液生化指标。结果各组裸小鼠的生长差异不显著(P>0.05);中光照组的平均育成率和离乳裸鼠育成率与长光照组比较差异显著(P<0.05);中光照组的ALT、TB、SUA与长光照组比较差异显著(P<0.05)。结论中光照和短光照适宜BALB/c裸小鼠的生长发育和繁殖。

3种方法构建BALB/c裸鼠BEL-7402人肝癌模型

【目的】以3种不同方法构建BALB/c裸鼠BEL-7402人肝癌模型,并观察BALB/c裸鼠肿瘤生长情况。【方法】将51只BALB/c裸鼠分为A、B、C 3组,每组17只。A组动物皮下注射0.2 m L BEL-7402人肝癌细胞,B组动物于肝脏原位注射0.05 mL BEL-7402人肝癌细胞与Matrigel Matrix的混合物,C组动物于肝脏原位接种BEL-7402人肝癌细胞瘤块组织。从接种后第2周至第5周,每周测定裸鼠体质量,且每组随机取3只动物解剖取肿瘤测量其大小和质量。第5周后,观察记录各组剩余动物(每组5只)的一般状态和存活天数。采用苏木素—伊红(HE)染色观察肿瘤组织病理学变化。【结果】A、B、C 3组实验动物成瘤率均为100%。5周后,A、B、C 3组剩余动物存活天数分别为(90.8±10.2)、(75.6±14.0)、(67.4±11.1) d。解剖所取肿瘤呈结节状,组织病理学检查可见肿瘤细胞呈一定方向排列,细胞呈梭形、多边形,异型明显,可见核分裂。【结论】本实验所采用的3种不同方法均能成功建立BALB/c裸鼠BEL-7402人肝癌模型。

脐血体外同时扩增T、NK及干祖细胞移植治疗BALB/c小鼠白血病

目的:观察体外同时扩增T、NK及干祖细胞脐血用于移植治疗BALB/c小鼠白血病效果。方法:在不同的细胞因子组合作用下定向扩增脐血干祖细胞及T、NK免疫细胞。扩增7天后,5×106个/只脐血细胞经尾静脉接种X射线照射的白血病小鼠,观察各组小鼠存活时间及检查存活证据及微小残留白血病细胞。结果:1.细胞因子SCF,IL-3,IL-6,IL-7,IL-2组合能显著扩增脐血中的CD34+、CD3+T、NK细胞。2.尾静脉接种2×106个/只K562产生可移植性白血病BALB/c裸鼠。3.BALB/c白血病小鼠移植6周后,实验组共存活鼠12只。而未移植者在60天内死于肿瘤。4.流式细胞分析移植30天后小鼠外周血中人CD3+细胞从最低新鲜脐血移植组(0.48±0.40)%,最高SCF+IL-3,6,7组中为(3.01±1.25)%。RT-PCR检测发现,在12只扩增后移植存活6周小鼠中,检测不到bcr/abl基因。在3只新鲜脐血移植存活6周的小鼠中,1只呈现阳性,说明移植取得了造血与免疫重建。所有脐血移植小鼠均未出现明显临床GVHD症状。结论:这种扩增后含一定水平T、NK免疫细胞的脐血能重建可移植性BALB/c白血病小鼠的造血和免疫。

淫羊藿苷对BALB/c-nu裸小鼠雄激素依赖性前列腺癌雄激素受体信号转导通路的影响

目的研究淫羊藿苷对BALB/c-nu裸小鼠雄激素依赖性前列腺癌雄激素受体信号转导通路(P13K/Akt)的影响。方法将40只雄性BALB/c-nu裸小鼠随机均分为对照组、模型组、抑制剂组和实验组(n=10),除对照组外均采用前列腺内注射人前列腺癌细胞株(LNCaP)悬液(2×107个/mL)的方法建立LNCa P模型,2周后,4组均采用尾静脉注射相应药物的方法治疗28 d。采用Western blotting法检测前列腺癌变组织雄激素受体剪接变异体7(AR-V7)、磷酸化蛋白激酶(p-Akt)和磷酸化雄激素受体(p-AR)蛋白表达;FITC-CY3法检测钙黏蛋白E(E-cadherin)和降钙素(Calcitonin)阳性率。结果与模型组比较,实验组p-Akt及p-AR蛋白均低表达(P<0.05),而Calctionin及AR-V7的阳性率均明显降低(P<0.05),E-cadherin的阳性率明显升高(P<0.05)。结论淫羊藿苷通过调控P13K/Akt信号转导通路相关因子表达而抑制LNCa P侵袭和转移。

不同光照制对BALB/c裸小鼠血细胞的影响

目的考察不同光照制对BALB/c裸小鼠血细胞的影响。方法将BALB/c裸小鼠分成三组:长光照组(16 h光照8、h黑暗)、正常光照组(12 h光照1、2 h黑暗)、短光照组(8 h光照1、6 h黑暗),置于不同光照环境中饲养繁殖,产生下一代,饲养至70日龄测定血细胞常规,共15项指标。结果长光照组、短光照组与正常光照时间组比较,血红蛋白(HGB)及红细胞压积(HCT)两项都明显偏低;长光照组与正常光照组比较,中间细胞总数(MTD)、中性粒细胞(GRA)数量偏高;短光照组与正常组比较,GRA%偏低,淋巴细胞百分比(LYM%)偏高,PLT偏高。讨论不同光照制对BALB/c裸小鼠血细胞会造成一定的干扰,正常光照造成的干扰较小,适合BALB/c裸小鼠饲养。

SPF级BALB/c裸小鼠的生产管理与质量控制

SPF级裸小鼠的饲养及质量控制涉及多方面的环节和工作。生产管理及质量控制效果,直接影响动物的数量和质量。我中心2007年开始,逐步建立了规范的SPF级BALB/c裸小鼠生产繁育体系。裸小鼠生产繁育至今,数量和质量得到较好的保证。本文通过介绍我中心SPF级BALB/c裸小鼠的设施、种群、饲养管理及质量控制的具体做法和经验体会,为SPF级BALB/c裸小鼠相关繁育和研究提供参考和借鉴。

替硝唑经BALB/c裸小鼠和SD大鼠透皮吸收及贮库效应的比较研究

目的以替硝唑为模型药物,比较其经BALB/c裸小鼠和SD大鼠透皮吸收及贮库效应的差异。方法在离体透皮吸收实验装置上,测定不同时间替硝唑经两种皮肤的透过量,并测定各自的贮库效应。结果透皮吸收和贮库效应的研究表明,BALB/c裸小鼠对替硝唑的透皮速率比SD大鼠显著增加(P<0.01)。结论BALB/c裸小鼠比SD大鼠更适合用于体外透皮吸收试验。

BALB/c裸鼠血管瘤模型的建立及普萘洛尔对其瘤体的抑制作用

目的建立BALB/c裸鼠血管瘤模型,探讨普萘洛尔对血管瘤裸鼠移植瘤瘤体生长的影响。方法手术切除血管瘤患儿血管瘤组织,经皮肤切口移植于40只BALB/c裸鼠建立血管瘤模型。移植后第45天将40只荷瘤小鼠随机分为5组:治疗组1,腹腔注射0.01%普萘洛尔溶液0.4 mL;治疗组2,腹腔注射0.05%普萘洛尔溶液0.4 mL;治疗组3,腹腔注射0.1%普萘洛尔溶液0.4 mL;治疗组4,经口灌胃0.01%普萘洛尔溶液0.4 mL;对照组,腹腔注射无菌生理盐水0.4 mL;各组给药均为1次/d,持续1周。于干预前及干预后第7、14、21天测量各组瘤体体积和小鼠体质量并进行比较;干预第22天切取瘤体行HE染色观察对比病理变化。结果干预后第7、14、21天,治疗组1、2、3、4瘤体体积均较干预前小,且治疗组1、2、3较对照组瘤体体积小(P均<0.05)。干预后第14、21天,治疗组3较治疗组1、2瘤体体积小(P均<0.05),治疗组1较治疗组4瘤体体积小(P均<0.05)。HE染色后光镜下可见各治疗组血管瘤内皮细胞分散凌乱、界限不清,且普萘洛尔浓度越高,对内皮细胞增殖抑制作用越明显。干预后第7、14、21天,治疗组1、2、3及对照组两两相比,治疗组1与治疗组4相比,裸鼠体质量比较差异无统计学意义。结论成功建立BALB/c裸鼠血管瘤模型;普萘洛尔可抑制模型裸鼠瘤体生长,对裸鼠机体无明显损害,且腹腔注射较灌胃效果显著。

BALB/c裸小鼠心、肝、肺脏8种矿物质元素含量的研究

目的对SPF级BALB/c裸小鼠心、肝、肺脏矿物质元素含量的研究。方法采用电感偶合等离子体发射光谱法(ICP-AES)测定BALB/c裸小鼠纯合子(nu/nu)的心、肝、肺等脏器矿物质元素Zn、Cu、Fe、Ca、Mg、Mn、P、S的含量。结果BALB/c裸小鼠心、肝、肺脏器矿物质元素Zn、Mg、Mn、P、S含量雌、雄之间比较差异具有显著性,心、肝、肺等脏器矿物质元素Zn、Cu、Ca、Mg、Mn、P、S含量比较差异具有显著性,BALB/c雌、雄裸小鼠心、肝、肺等脏器矿物质元素含量排列顺序一致。结论矿物质元素在BALB/c裸小鼠心、肝、肺脏的分布呈现出一定的规律,性别对裸小鼠心、肝、肺脏的某些元素含量存在一定的影响。

非小细胞肺癌病人源性NOD/SCID小鼠和BALB/c裸鼠移植瘤模型的建立及比较

目的:构建人非小细胞肺癌的NOD/SCID小鼠和BALB/c裸鼠移植瘤模型,并探讨移植瘤成瘤性与小鼠品系间的关系,为后续建立优良的动物模型奠定基础。方法:取手术切除获得的23例非小细胞肺癌组织,1 h内移植于NOD/SCID小鼠或BALB/c裸鼠皮下,观察移植瘤成瘤情况,测量移植瘤体积,绘制生长曲线图,计算成瘤率、成瘤潜伏时间和成瘤时间,分析并比较移植成瘤组和未成瘤组所对应患者的相关临床病理指标,并取移植成瘤组和所对应患者的组织标本进行病理学分析。结果:NOD/SCID小鼠皮下移植瘤模型成瘤率(55.6%),BALB/c裸鼠皮下移植瘤模型(20%),两者间差异无统计学意义(P>0.05),但前者的成瘤潜伏时间和成瘤时间均短于后者(P<0.05)。患者相关临床病理指标中鳞癌、TNM分期和淋巴结转移情况与移植瘤成瘤建模无明显相关(P=0.109、0.153、0.077),NOD/SCID小鼠和BALB/c裸鼠皮下移植瘤模型均能保持病人肺癌肿瘤组织的形态学特征。结论:成功构建了NOD/SCID小鼠和BALB/c裸鼠皮下移植瘤模型,NOD/SCID小鼠更适宜用于肺癌病人源性皮下移植瘤模型的建立,非小细胞肺癌移植瘤模型的建立为进行体外抗肿瘤药物的筛选提供了良好的研究工具。

应用MEC-1与HG3细胞株建立慢性淋巴细胞白血病BALB/c裸鼠皮下移植瘤的模型

目的：通过对免疫缺陷鼠（BALB/c）不同部位、不同密度接种人慢性淋巴细胞白血病（CLL）细胞,探索裸鼠皮下移植瘤模型建立的条件。方法：通过慢病毒系统建立稳定表达绿色荧光蛋白（GFP）的人CLL细胞（MEC-1-GFP与HG3-GFP细胞）。首先将MEC-1-GFP细胞（5×10^7/ml）分别接种于裸鼠的前肢腋下、腹部及后肢腋下,观察不同接种部位对CLL细胞成瘤率的影响;其次将同等密度的MEC-1-GFP、HG3-GFP细胞（5×10^7/ml）分别接种于裸鼠的前肢腋下部位,观察两种细胞的成瘤时间及成瘤率。再次以同样接种方法,将不同密度的MEC-1-GFP与HG3-GFP细胞（1×10^7/ml与5×10^7/ml）分别接种于裸鼠的前肢腋下,观察不同接种密度的细胞成瘤时间及成瘤率。观察5周后,通过眼球取血获得外周静脉血,经EDTA抗凝及溶血素处理后,用流式细胞术检测GFP阳性的CLL细胞;同时,将荷瘤鼠处死,剥离肿瘤组织并制备冰冻切片,进行组织病理学检查。结果：成功获得稳定表达标记蛋白GFP的MEC-1与HG3细胞株;接种后裸鼠的前肢腋下、腹部及后肢腋下都形成了皮下移植瘤,且前肢腋下更有利于移植瘤的形成;接种密度为5×10^7/ml的MEC-1-GFP和HG3-GFP细胞均可形成皮下移植瘤,且5周后的成瘤率均为80%;接种密度分别为1×10^7/ml与5×10^7/ml MEC-1-GFP与HG3-GFP细胞均可有效地形成皮下移植瘤。流式细胞术检测显示,2组荷瘤鼠外周血中均未见GFP阳性的MEC和HG3细胞,组织病理检查表明CLL细胞向腹腔转移。结论：利用CLL细胞株MEC-1-GFP和HG3-GFP建立了CLL裸鼠皮下移植瘤模型,为进一步研究CLL的发病机制提供了实验工具。

A549肺腺癌细胞株BALB/C-nu/nu裸鼠骨转移模型的建立

目的探讨A549肺腺癌细胞株裸鼠骨转移模型建立的可行性.方法选择健康6~8周龄Balb/c-nu/nu裸鼠20只,将20只Balb/c-nu/nu裸鼠采用经皮左心室内注射法,将A549肺腺癌细胞株接种于裸鼠体内,接种后饲养观察Balb/c-nu/nu裸鼠的成瘤情况.结果全部裸鼠均完成经皮心脏肺腺癌细胞的种植,共造模成功12只,占到全部裸鼠的60%.造模成功的裸鼠成瘤天数经SPSS分析,结果符合正态分布,得出裸鼠成瘤天数的均值、标准差、及可信区间.结论通过经皮左心室内注射A549肺腺癌细胞株,建立Balb/c-nu/nu裸鼠肺腺癌骨转移模型,方法可行性强,科学可靠,成膜率高,可用于肺腺癌骨转移发病机制的研究.

雷公藤甲素对系统性红斑狼疮BALB/c-un裸小鼠外周血Tc与Th细胞漂移的影响

目的:观察雷公藤甲素对Pristane(姥鲛烷)诱发的系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)BALB/c-un裸小鼠外周血Tc与Th细胞漂移的影响。方法:用随机表法将雌BALB/c-un裸小鼠18只机编号后随机均分为空白、SLE和雷公藤甲素3组,每组动物数6只。SLE组和雷公藤甲素组用Pristane单次腹腔注射的方法建立SLE模型,空白组作空白对照。雷公藤甲素组按5 mg/(kg·d)灌服雷公藤甲,空白组和SLE组正常饲喂。分别于治疗前、治疗后1、3和6个月从尾静脉采血,采用荧光标记的流式细胞术检查治疗不同阶段Tc与Th淋巴细胞亚群。结果:在治疗3和6个月时与SLE组同期比较,雷公藤甲素组Tcl、Thl细胞和CD8+百分比、Tcl/Tc2,Thl/Th2和CD4+/CD8+比值均降低,而CD4+、Tc2和Th2细胞百分比均明显升高(P<0.05)。结论:雷公藤甲素治疗SLE的机制可能与其调节Tc与Th细胞向Tcl和Tc2漂移,维持治疗不同阶段Tc与Th细胞相对稳态而影响免疫应答及炎症反应过程有关。