血吸虫虫卵在BALB/c鼠各组织中的分布

目的研究血吸虫感染BALB/c鼠后,虫卵在其部分组织中特别是在肠壁中的分布状况。方法 10只BALB/c鼠腹部贴片感染血吸虫尾蚴(40±1条/只),感染42d后剖杀,分别取鼠的肝脏、脾脏、肠道(小肠上段、中段、下段、盲结肠、直肠)进行成虫计数、虫卵计数、毛蚴孵化、组织切片观察,并将得到的结果进行统计学分析。结果血吸虫虫卵在BALB/c鼠各组织的分布为:肝脏(59.64%)、脾脏(0.81%)、小肠上段(6.27%)、小肠中段(5.24%)、小肠下段(5.14%)、盲结肠(17.48%)、直肠(5.41%),肝脏的沉积虫卵数和孵化数与其他组织相比差异显著,肠组织中大肠段比小肠段的沉积虫卵数和孵化数多且差异显著。在孵化率的比较中肝脏的孵化率最高(1.09%)。病理切片观察,肝脏产生大量肉芽肿结节,肠壁出现不同程度的炎症坏死。结论 BALB/c鼠定量人工感染血吸虫后,肝脏中的沉积虫卵最多,其次是盲结肠,最少的是脾脏;且不同组织的沉积虫卵数目与病理损伤程度有关。

羊种布鲁氏菌16M感染BALB/c鼠模型的建立

为建立羊种布鲁氏菌16M强毒株的小鼠模型,选取体质量18 g左右的雌性BALB/c小鼠为实验动物,随机分为7组,5只/组,分别腹腔注射1×102、1×103、1×104、1×105、1×106、1×107CFU/只羊种布鲁氏菌16M强毒株,对照组注射同等剂量PBS。注射后分别于第1周和第2周剖杀小鼠,采集血液并无菌取小鼠内脏组织做病理组织学检测,脾脏称质量、细菌分离。结果表明,接毒后脾脏为其主要靶器官且第2周小鼠脾脏中含有较高菌量,肝脏其次。抗体检测结果和脾脏分菌计数结果最终确定1×104CFU/只为羊种布鲁氏菌16M强毒株腹腔感染最佳剂量。

甲型流感病毒感染BALB/c鼠动物模型的建立

目的:建立甲型流感病毒感染BALB/c鼠动物模型,为研究病毒变异、致病机制及抗病毒药物筛选提供模型动物。方法:通过滴鼻的方法将甲型流感病毒感染到BALB/c鼠,观察小鼠的症状和组织病理改变。结果:BALB/c鼠的临床症状明显,病理变化典型。结论:甲型流感病毒感染BALB/c鼠的疾病模型建成。

新生Balb/c鼠脑神经元和星形胶质细胞纯培养的实验研究

目的 探讨纯培养神经元和星形胶质细胞的合适方法。方法 采用Balb/c鼠尾胶原、大鼠尾胶原、阿糖胞苷、贴壁处理及传代培养等方法纯培养Balb/c鼠神经元和星形胶质细胞。结果 纯培养Balb/c鼠神经元的纯度为 90 % ,纯培养星形胶质细胞的纯度为 97%。结论 纯培养神经元宜选择Balb/c鼠尾胶原为生长基质并经 3mg·L-1阿糖胞苷处理。纯培养星形胶质细胞宜用大鼠尾胶原为生长基质和培养

BALB/c鼠枯否细胞的分离培养与鉴定

目的 :肝脏是肿瘤转移的好发部位 ,而肝脏含有丰富的免疫细胞 -枯否细胞 (Kupffer Cell,KC)。为研究枯否细胞的抗癌活性 ,旨在探讨 BAL B/ c鼠枯否细胞的分离培养方法。方法 :选用健康雄性 8～ 10周龄 BAL B/ c鼠 ,麻醉无菌取肝 ,注射冲洗去血并剪去部分结缔组织 ,小玻璃瓶中剪碎肝组织 ,加入 0 .0 4 %的 EDTA和 0 .0 5 %链霉蛋白酶 E溶液 ,交替轻轻吹打消化。不锈钢筛网滤过 ,用 0 .0 0 4 % Dnase 的 16 4 0液清洗细胞液 ,加 Tris-氯化胺溶解红细胞。 30 %～ 70 % Percoll梯度离心 ,10 % FBS贴壁培养 4～ 6 h洗去非贴壁细胞。通过对比体内、体外枯否细胞吞噬墨水和体外吞噬聚苯乙烯乳珠 (latexbeads,D1.1μm )鉴定枯否细胞。结果 :Kupffer细胞的得率为 (7.5 7± 1.92 )× 10 6 个 /鼠肝 ,即 6 .15× 10 6 个 / g,贴壁率为4 0 .18%。用 0 .4 %台盼蓝染色鉴定 ,细胞存活率在 95 %以上 ,吞噬鉴定发现 Kupffer细胞的纯度可达 90 %。贴壁 Kupffer细胞的形态多样 ,可见不规则 ,多边形 ,多角伪足 ,典型的星形及多角形。体外培养枯否细胞存活 2周后未见再有吞噬功能。结论 :酶消化法结合梯度离心和贴壁培养是分离 BAL B/ c鼠枯否细胞的可靠方法 。

BALB/c鼠脾脏T淋巴细胞体外转化试验条件的优化研究

为了探索BALB/c鼠脾脏T淋巴细胞转化试验的最佳培养条件,采用四甲基偶氮唑(MTT)比色法,对脾细胞浓度和刀豆蛋白A(ConA)的浓度两个参数进行研究。结果表明,在本次实验条件下,采用5×105个/ml细胞、2.5μg/ml的ConA可获得最大的吸光度(A)值,两个因素间存在明显的交互效应。

转基因番茄可食用防龋疫苗免疫BALB/c鼠的实验初探

目的:观察转基因番茄可食用疫苗的免疫原性和免疫反应性。方法:将60只60 d龄的雌性BALB/c小鼠随机分为4组,分别口服或腹膜下注射转基因番茄或对照番茄。35 d后取小鼠血清样本,用ELISA的方法检测其血清样本中的抗变形链球菌PAc的IgG抗体效价。结果:口服和腹膜下注射转基因番茄组小鼠的血清中均出现了抗PAc的IgG抗体,分别与对照组相比具有统计学差异(P<0.05),且口服转基因番茄组与注射转基因番茄组的小鼠血清抗体水平无统计学差异(P>0.05)。结论:转基因番茄所表达的外源蛋白具有抗原性,能够诱导实验动物产生免疫应答。

呼吸道合胞病毒感染BALB/c鼠活化Toll样受体7介导的抗病毒作用研究

目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染BALB/c鼠后,肺内Toll样受体7(TLR7)的水平变化及其介导所产生的I型干扰素(IFN)抗病毒作用。方法 48只BALB/c鼠,随机分为正常对照组、RSV感染组、咪喹莫特干预组。以RSV活病毒滴鼻感染BALB/c鼠,诱导急性肺炎模型,并预先给予TLR7特异性激动剂咪喹莫特处理,分别于感染后4、8、12和24 h不同时间点,用半定量RT-PCR法检测鼠肺TLR7、IFN-α/β、RSV融合蛋白(RSV F蛋白)的mRNA表达,HE染色观察肺的病理学改变。结果①RSV感染早期,TLR7、IFN-α/β、RSV F蛋白的mRNA表达均升高,并与RSV感染之间存在时间依赖性关系;肺的炎性细胞浸润及肺泡结构破坏程度与RSV感染时间相关;②咪喹莫特干预组预先给予TLR7激动剂咪喹莫特处理后,再行相同RSV感染,TLR7、IFN-α/β的mRNA表达量进一步升高,但RSV F蛋白的mR-NA表达下降;肺的炎性细胞浸润程度及肺泡结构破坏较RSV感染组明显减轻。结论 RSV感染可活化上调BALB/c鼠肺组织中TLR7表达,其表达量与感染之间存在时间依赖关系;其介导产生的Ⅰ型IFN起着抗病毒作用,在一定程度上可抑制病毒的增殖水平,使肺部炎症减轻。

17β-雌二醇抗BALB/c与C57BL/6小鼠视网膜光照损伤的比较

目的:通过建立BALB/c与C57BL/6小鼠视网膜光损伤模型,研究17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)的视网膜神经保护作用,为成功构建E2抗视网膜光损伤模型提供实验数据。方法:成年雌性BALB/c、C57BL/6小鼠各40~45只,实验分组如下:正常对照组,去势手术对照组,去势光照组(小鼠去势手术14d后进行持续10000lx白光光照刺激4、8、12、16、24h组),玻璃体腔注射假手术组,生理盐水组和E2预处理组(去势手术14d后暗适应24h后分别行玻璃体腔注射2μL生理盐水或10-5 mol/L E2),每组各6只。通过石蜡切片HE染色、TUNEL染色、视网膜电图检测视网膜形态及功能变化。结果:去势光损组视网膜内核层/外核层厚度从白光10000lx光照4h组开始显著减小;玻璃体腔注射E2预处理可显著抑制两种品系小鼠视网膜各层细胞的凋亡(P<0.01)以及C57BL/6小鼠视网膜电图检测中最大混合反应a波和b波波幅的下降(P<0.05)。结论:相同光照条件对两种品系小鼠光损敏感性存在差异;E2对BALB/c小鼠无论是视网膜形态学及功能学上都产生了保护作用,而对C57BL/6小鼠功能学保护作用显著。

基于BALB/c小鼠模型的松茸低温水提物的免疫调节作用

以环磷酰胺(CTX)诱导免疫抑制BALB/c小鼠为模型,研究长白山野生松茸低温水提物(TMWE)及其粗蛋白组分(TMWE-CP)的体内免疫调节活性。结果表明,TMWE和TMWE-CP组分均可有效拮抗CTX的免疫抑制作用,使免疫抑制小鼠的体质量和免疫器官指数得到不同程度的恢复,改善小鼠脾脏损伤,恢复和增强BALB/c小鼠的碳颗粒清除能力、迟发型变态反应(DTH)、脾淋巴细胞增殖活性、血清半溶血值(HC50)以及血清IgG、IgM表达水平。TMWE和TMWE-CP组分可从非特异性免疫、细胞免疫及体液免疫3个方面起到增强免疫抑制小鼠免疫调节功能的作用。此外,在细胞免疫(DTH,脾淋巴细胞增殖活性)和体液免疫(HC50,血清IgG、IgM水平)方面,TMWE-CP组免疫调节效果显著优于TMWE组(P<0.05),而TMWE组能够更好地增强非特异性免疫(免疫器官指数和碳颗粒清除能力)。结论:TMWE和TMWE-CP组分可作为潜在的松茸源天然免疫调节剂,在针对性健康产品研发方面具有广阔的应用前景。

建立适用于BALB/c Nude小鼠的急性肝衰竭模型

背景:在干细胞和组织工程领域的动物实验中,免疫缺陷裸小鼠(BALB/c Nude小鼠)对于提升研究准确性具有重要意义。但CCl致BALB/c Nude小鼠发生急性肝衰竭的浓度及检测时间尚不明确,严重影响该动物模型在具有免疫原性的干细胞治疗研究中的应用。目的:通过与C57小鼠急性肝衰竭模型比较,探索腹腔注射CCl建立BALB/c Nude小鼠急性肝衰竭模型的合适浓度和检测时间。方法:将50%浓度的CCl按照4 m L/kg腹腔注射到C57小鼠(n=6)和BALB/c Nude小鼠(n=6)体内,注射后72 h内观察小鼠存活情况。分别将50%,20%,10%浓度的CCl按照4 m L/kg腹腔注射到BALB/c Nude小鼠体内,注射后72 h观察小鼠存活情况,并进行肝脏病理切片形态学观察。根据建立两种小鼠急性肝衰竭模型的最佳CCl浓度,将50%浓度的CCl腹腔注射到C57小鼠体内,将20%浓度的CCl腹腔注射到BALB/c Nude小鼠体内,注射前后检测小鼠血清中谷丙转氨酶和谷草转氨酶水平。结果与结论:(1)CCl注射24 h后,C57小鼠的存活率为50%,BALB/c Nude小鼠全部死亡,提示现有针对C57小鼠的最适CCl浓度不适合BALB/c Nude小鼠造模;(2)注射50%浓度CCl的BALB/c Nude小鼠在24 h之内陆续死亡;注射体积分数20%CCl的小鼠24 h后存活率是66.7%,至注射后72 h存活率仍为66.7%;注射10%浓度CCl的小鼠至注射后72 h全部存活;注射后24 h肝病病理结果显示,CCl注射浓度越小肝脏损伤程度越轻,其中20%浓度的CCl最适合建立BALB/c Nude小鼠急性肝衰竭模型;(3)C57小鼠腹腔注射CCl4h后谷丙转氨酶和谷草转氨酶水平达到最高,1 d时开始下降;BALB/c Nude小鼠在腹腔注射CCl1 d后谷丙转氨酶和谷草转氨酶水平达到最高,3 d时开始下降;(4)结果表明,为提高动物实验可靠性,使用C57小鼠建立急性肝衰竭模型时应选择50%浓度的CCl,在注射后4 h施行干预措施;使用BALB/c Nude小鼠建立急性肝衰竭模型时应选择20%浓度的CCl,在注射后1 d施行干预措施。

CpG协同calpain DNA疫苗诱导BALB/c鼠T_H1免疫应答和抗日本血吸虫感染

目的 探讨含非甲基化CpG单核苷酸 (CpG ODN)协同calpainDNA疫苗抗日本血吸虫感染的保护性作用、诱导的免疫应答类型及其免疫机理。方法 calpain基因从原核表达载体pGEX 2TK亚克隆到含小鼠IL 2基因启动序列的真核表达载体pVAC ,构建含日本血吸虫疫苗候选分子cal pain基因的真核表达体系pVAC calpain的DNA疫苗 ,构建的DNA疫苗与CpGODN免疫BALB c小鼠 ,在不同阶段采血测定免疫鼠抗体的动态变化、RT PCR分析免疫鼠细胞因子IFN γ、IL 4、IL 12的表达 ,加强免疫 1周后用日本血吸虫尾蚴攻击感染免疫鼠 ,用减虫率、减卵率及其病理组织学指标考核保护性免疫的效果。结果 pVAC calpain的DNA疫苗体系诱导了IgG抗体的产生 ,免疫 3周后细胞因子IFN γ、IL 4、IL 12的表达表现出差异。特别是在CpG ODN和pVAC calpain免疫组IFN γ、IL 12有高度表达 ,而IL 4的表达受到相对抑制 ,对攻击感染的日本血吸虫表现出了 4 5 %的减虫效果 ,虫卵肉芽肿的面积显著性的减少。结论 CpGODN协同日本血吸虫calpainDNA疫苗诱导了TH1为主的免疫应答 ,并能部分抵抗日本血吸虫感染和减轻感染鼠由于TH2免疫应答所导致的虫卵肉芽肿反应 ,提示CpGODN能够协同calpainDNA疫苗抗日本血吸虫感染和缓解日本血吸虫免疫病理反应。

鸭源H5N5和H5N1亚型禽流感病毒BALB/c鼠感染试验

比较鸭源H5N5亚型禽流感病毒(A/Duck/Changchun/01/2010)和鸭源H5N1亚型禽流感病毒(A/Duck/Liaoning/N/2011)对BALB/c鼠的致病性。以106EID50/50μL剂量鼻腔感染6周龄BALB/c鼠,攻毒后3,5,7,10,14 d取小鼠的肺、脑和肝脏,处理后接种10日龄SPF鸡胚做病毒回收试验,取死亡鸡胚的尿囊液进行RT-PCR检测;分别取接种病毒后5 d小鼠的脑、肝脏、肺脏、脾脏、肾脏进行病理组织学检测。结果显示,小鼠接种H5N5和H5N1亚型禽流感病毒后,均无明显的临床症状,肝脏中分别于接种后3,5 d分离到病毒,肺脏中于接种后5 d分离到病毒,脾脏、肾脏和粪便中均未分离到病毒。病理组织学检测发现,病毒对小鼠的脏器组织产生了不同程度的病理损伤,以肺脏、脑和肝脏较为明显,且H5N1亚型禽流感病毒引起小鼠脑和肝脏的病理损伤比H5N5亚型更严重。这表明2株鸭源禽流感病毒对小鼠均有一定的致病性,且H5N1亚型强于H5N5亚型。

转基因番茄可食用防龋疫苗免疫BALB/c小鼠的实验研究

目的：观察含PAcA/CTB的转基因番茄可食用防龋疫苗的免疫原性及免疫反应性。方法：将18只6-8周龄的雄性BALB/c小鼠,随机分为3组,每周分别灌胃含有PAcA/CTB嵌合蛋白的转基因番茄果汁（实验组）、非转基因番茄果汁（阴性对照组）、灭活全菌疫苗（阳性对照组）。于首次免疫前和免疫后第1、2、3、4周采集血液、唾液样品。ELISA检测其血清和唾液样本中的抗变异链球菌PAcA的IgG、IgA抗体效价。结果：阳性对照组和实验组小鼠血液和唾液中特异性抗体从免疫后1周开始升高,初始免疫后第4周达高峰,分别与阴性对照组比较存在统计学差异（P〈0.05或P〈0.01）。免疫后第2、3、4周阳性对照组与实验组差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：转基因番茄所表达的外源目的蛋白具有抗原性,能够诱导BALB/c小鼠产生免疫应答。

应用联合酶建立BALB／c鼠枯否氏细胞体外分离培养方法

目的用作用功效不同的酶联合消化分离BALB／c鼠枯否氏细胞（KC），建立简便易行，产量、活性、纯度较稳定的KC分离培养方法。方法将0．1％Ⅳ型胶原酶、0．2％链霉蛋白酶、0．01％Dnase Ⅰ酶按1：1：1比例混合原位灌注和离体消化肝组织，经Percoll梯度离心，贴壁培养纯化细胞，应用荧光显微镜观察、免疫组织化学染色、吞噬功能实验进行鉴定。结果KC获得率为（2～3）×10^6／鼠肝，细胞存活率达96％，免疫组化和吞噬实验鉴定细胞纯度达92％。KC贴壁后形态大小不规则，呈多角形或星形，免疫组织化学染色显示溶菌酶阳性，胞浆内见吞噬的碳素墨汁颗粒。结论用作用功效不同的酶联合消化KC，经梯度离心和贴壁培养，可获得高产量、高活性、高纯度的BALB／c鼠KC，为进一步研究KC在肝脏疾病中的作用提供可靠的细胞来源。

猪囊尾蚴抗原抗体复合物对BALB／C小鼠血管作用的初步研究

鼠抗猪囊尾蚴单克隆抗体与猪囊尾蚴抗原按不同比例混合，３７℃孵化２小时，分别经鼠尾静脉注射ＢＡＬＢ／Ｃ鼠，三天后处死，病理检查鼠脑组织，肾组织小血管病变情况。结果蛋白含量抗体：抗原以１：５和１：２组的脑实质内小血管和肾髓质内小血管扩张充血，部分内皮细胞破坏；单纯抗原、抗体及抗体多于抗原的组分，其血管病变不明显。

轮状病毒感染BALB/c乳鼠乳糖不耐受模型的建立

通过轮状病毒(RV)灌胃感染SPF级7日龄BALB/c乳鼠,同时设立PBS阴性对照组和正常对照组,所有鼠均饲养在SPF级动物房,每日观察乳鼠腹泻情况。分别于接种后1、2、3、4、5、6、7、8、9、10d每组各处死5只乳鼠,在无菌环境中取乳鼠的小肠组织,通过qPCR方法检测病毒含量,HE染色观察并检测乳鼠小肠组织中RV载量及其组织病理变化,试剂盒检测乳糖酶活力。RV在感染第1天乳鼠的小肠组织中检测出病毒且相对含量表达较高;感染后前3d出现严重腹泻;HE染色可见乳鼠的小肠组织有损坏,小肠绒毛脱落,长度变短,PBS阴性对照组和正常对照组对照组对应结果均为阴性;乳糖酶活力检测较PBS阴性对照组和正常对照组降低。因此,建立RV感染BALB/c乳鼠继发性乳鼠乳糖不耐受动物模型,为研究乳糖不耐受症的发病机制及药物干预提供有力保障。

卵巢癌抗独特型微抗体疫苗诱导BALB/c小鼠体内抗肿瘤免疫应答的实验研究

背景与目的6B11抗独特型微抗体由模拟人卵巢癌抗原的抗独特型单链抗体(6B11ScFv)融合人IgG1铰链区和CH3区所构成,它具有6B11ScFv和人IgGFc的双重免疫学活性。本研究观察6B11抗独特型微抗体在BALB/c小鼠体内诱导抗肿瘤免疫反应情况,探讨其作为卵巢癌疫苗的可能性。方法用卵巢癌6B11抗独特型微抗体免疫BALB/c小鼠。采用间接ELISA、竞争抑制实验和流式细胞术检测免疫鼠血清。结果6B11抗独特型微抗体免疫小鼠后,在不用佐剂的情况下可诱导小鼠产生较高的Ab3,末次免疫后30天仍持续在较高的水平。分别在末次免疫后4天、14天、24天和30天可刺激小鼠脾脏淋巴细胞CD4+T细胞和CD8+T细胞明显升高。结论6B11抗独特型微抗体可诱导机体产生特异体液免疫和细胞免疫反应,这为抗独特型微抗体疫苗的临床应用提供了一定的实验依据。

黑蒜粉膳食补充对环磷酰胺诱导BALB/c小鼠免疫功能的影响（英文）

目的:研究黑蒜粉对BALB/c小鼠的免疫调节作用。方法:采用环磷酰胺建立免疫抑制BALB/c小鼠动物模型,检测不同剂量(100、300、900 mg/kg)黑蒜粉对免疫抑制BALB/c小鼠脾脏、胸腺指数、脾淋巴细胞转化活性、迟发型变态反应能力、抗体生成细胞水平、半数溶血值、碳粒廓清速率、脾细胞中白细胞介素(interleukin,IL)-8和IL-12 mRNA表达水平等指标的影响。结果:与模型组相比,黑蒜粉低、中、高剂量组显著提高了小鼠的胸腺指数、抗体生成能力、脾淋巴细胞增殖能力以及脾细胞因子IL-8和IL-12 mRNA的表达量(P<0.05);中、高剂量组显著提升了小鼠的脾脏指数和迟发型变态反应能力(P<0.05);高剂量组则显著增强了小鼠的血清溶血素水平和单核-巨噬细胞吞噬活性(P<0.05)。结论:黑蒜粉具有提高BALB/c小鼠免疫功能的作用。

猪链球菌BALB/c小鼠感染模型的初步建立

目的观察猪链球菌(Streptococcus suis)感染小鼠后的临床、病理变化,为将小鼠作为实验室研究猪链球菌的实验动物提供依据。方法用猪链球菌活菌经腹腔注射感染小白鼠,并做阴性对照,观察其临床症状,剖解病死小鼠,制作病理切片观察病理变化。并对病死小鼠做病原分离,通过培养特性鉴定、生化试验以及PCR鉴定确定其为猪链球菌。结果小鼠确由感染猪链球菌而致死,体内各组织、器官均产生典型的败血症病变。结论小鼠对猪链球菌易感,能够作为实验室研究猪链球菌良好的实验动物。