BALF结核杆菌检测联合T-SPOT.TB检测在菌阴肺结核诊断中的效能

目的:观察支气管肺泡灌洗液(BALF)结核杆菌检测联合结核感染T细胞斑点(T-SPOT.TB检测)在菌阴肺结核诊断中的效能。方法:选取2019年2月至2021年5月该院收治的82例疑似肺结核患者进行前瞻性研究。所有患者均接受BALF结核杆菌检测、T-SPOT.TB检测,以肺泡灌洗液罗氏培养和临床诊断结果为金标准,统计肺泡灌洗液罗氏培养和临床诊断结果、BALF结核杆菌检测和T-SPOT.TB检测单项及联合检测结果,比较BALF结核杆菌检测和T-SPOT.TB检测单项及联合检测诊断菌阴肺结核的效能。结果:82例疑似肺结核患者肺泡灌洗液罗氏培养和临床诊断结果诊断为肺结核病59例,检出率为71.95%;非肺结核病23例,检出率为28.05%。BALF结核杆菌检测联合T-SPOT.TB检测诊断菌阴肺结核的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值和阴性预测值均高于两者单项检测,差异有统计学意义(P<0.05);BALF结核杆菌检测与T-SPOT.TB检测的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值和阴性预测值比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:BALF结核杆菌检测联合T-SPOT.TB检测诊断菌阴肺结核的效能高于两者单项检测。

BALF结核杆菌检测诊断菌阴肺结核的价值分析

目的探讨支气管肺泡灌洗液(BALF)结核杆菌检测菌阴肺结核的诊断价值。方法选取2018年1月至2019年8月本院收治的120例肺部感染患者,均为疑似菌阴肺结核,所有患者均予以纤维支气管镜检查并采集BALF进行结核杆菌涂片、聚合酶链式反应(PCR)检查,并以痰培养结果作为诊断金标准,比较BALF结核杆菌涂片、BALF结核杆菌PCR检查的诊断结果。结果120例疑似菌阴肺结核患者经痰培养诊断确诊52例;BALF结核杆菌涂片诊断准确度、灵敏度、特异度、阳性预测值及阴性预测值分别为26.67%(32/120)、55.77%(29/52)、4.41%(3/68)、30.85%(29/94)、11.54%(3/26);BALF结核杆菌PCR检查诊断准确度、灵敏度、特异度、阳性预测值及阴性预测值分别为41.67%(50/120)、92.31%(48/52)、2.94%(2/68)、42.11%(48/114)、33.33%(2/6)。BALF结核杆菌PCR检查准确度、灵敏度均高于BALF结核杆菌涂片,差异有统计学意义(P<0.05)。结论BALF结核杆菌检测对菌阴肺结核具有较高诊断价值,BALF荧光PCR检查诊断准确度与灵敏度均较高,值得临床推广。

结核杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术联合干扰素-γ释放试验对肺结核的诊断效能

目的探讨结核杆菌利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测(Gene Xpert-MTB/RIF)技术联合干扰素-γ释放试验(IGRA)对肺结核的诊断效能,为临床治疗提供参考。方法选取2022年3月至2024年3月睢宁县中医院收治的78例疑似肺结核患者的临床资料,进行回顾性分析。所有患者均接受结核分枝杆菌(MTB)培养、Gene Xpert-MTB/RIF、IGRA检查,以MTB培养结果为金标准,分析Gene X-pert MTB/RIF联合IGRA对肺结核的诊断效能。结果MTB培养结果显示:78例疑似肺结核患者中,阳性58例,阴性20例;联合检测结果显示:阳性72例,阴性6例。联合检测准确度为85.90%,灵敏度为94.83%,特异度为60.00%,阳性预测值为91.67%,阴性预测值为66.67%,均高于各项单一检测(均P<0.05)。结论Gene Xpert-MTB/RIF联合IGRA诊断肺结核的价值较高,值得临床应用。

白细胞介素-27、腺苷脱氢酶、基因检测、结核杆菌培养对结核性胸腔积液的诊断意义研究

目的研究白细胞介素-27(IL-27)、腺苷脱氢酶(ADA)、基因检测以及结核杆菌(MTB)培养用于结核性胸腔积液(TPE)诊断中的意义。方法选取本院收治的TPE患者总共90例为TPE组,另选取同时间段内本院收治的非TPE患者总共98例为非TPE组,两组均开展IL-27、ADA、基因检测和MTB培养,比较两组胸水IL-27、ADA水平和Genexpert MTB/MIF、MTB培养阳性率差异,并观察IL-27、ADA、Genexpert MTB/MIF、MTB培养单项或者联合检测对TPE的检出率。结果TPE组胸水内的IL-27、ADA水平和Genexpert MTB/MIF、MTB培养阳性率均高于非TPE组(P<0.05)。联合IL-27、ADA、Genexpert MTB/MIF、MTB培养对TPE的检出率高于单项检测(P<0.05)。结论IL-27、ADA、基因检测以及MTB培养能协助临床鉴别诊断TPE,且联合几项检测方法能提升对TPE的检出率,值得推广应用到临床。

基于YOLOv7网络的高分辨率结核杆菌识别方法研究

结核病已经被列为全球十大主要死亡原因之一,针对痰涂片图像背景复杂,结核杆菌目标尺寸小等难题,提出基于痰涂片图像的单阶段YOLOv7结核杆菌检测网络。骨干网络中,分别在不同尺度的高效聚合网络后嵌入CBAM注意力模块,以提取不同尺度的特征,在颈部网络中引入分离合并操作以改进MPConv结构,减少深层网络因卷积下采样引起的图像特征损失,并在头部网络中引进高斯分布距离来避免因边界框重叠而引起的小目标漏检,得到一种精度高、检测速度快的结核杆菌方法。实验表明,改进模型的均值平均精度达到了87.8%,相比基线网络模型提升5.1%,且优于同类算法,对推进结核杆菌的智能化检测具有重要意义。

FQ-PCR检测BALF中结核杆菌-DNA对肺结核诊断的应用研究

目的:对FQ-PCR检测BALF中结核杆菌-DNA对肺结核诊断的应用进行研究。方法:随机选取2013年12月-2014年11月期间本院收治的肺结核患者110例作为本次研究的对象,所有患者实施纤支镜检查、活检、刷检,BALF中结核杆菌-DNA行FQ-PCR检测,对检查结果进行分析研究。结果:在本次研究中,确诊为肺结核的患者有40.00%(44/110);FQ-PC检测的敏感性明显高于常规涂片镜检,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在肺结核的诊断中,FQ-PCR检测的敏感度高,操作简单方便,检测速度较快,是BALF中结核杆菌-DNA检查的重要方法,在肺结核的诊断中有重要的应用价值。

肺结核患者肺泡灌洗液中结核杆菌检测的方法学评价

目的探讨不同检测方法对肺结核患者肺泡灌洗液(BALF)中结核杆菌的诊断价值。方法收集100例患者的BALF,其中临床确诊为肺结核患者65例设为结核组,余下的35例非肺结核患者作为对照组,分别应用BALF涂片法、聚合酶链反应法(PCR)、膜-反向斑点杂交技术(RDB)进行同步检测肺结核杆菌。结果BALF涂片检查法对结核杆菌的诊断阳性率为43.08%,PCR为73.84%,RDB为92.31%,3种检测方法阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)。BALF涂片法敏感度、特异度、符合率、阴性预测值分别为43.08%、77.14%、36.00%、17.78%,PCR分别为73.85%、100.00%、83.00%、67.31%,RDB分别为92.31%、100.0%、95.00%、87.50%。结论 RDB不仅能准确诊断结核杆菌,且能快速、简单地分辨肺结核杆菌耐链霉素、利福平、异烟肼基因型,具有较高的临床应用价值。

牛结核杆菌病PCR检测方法的建立及初步应用

根据PCR技术原理,建立了牛结核病PCR诊断方法,并测定出该方法的敏感性为1.025pg,菌细胞的灵敏度为200个菌左右。特异性试验表明,除牛结核分枝杆菌的特异扩增带(317bp)外,其他的细菌均未出现特异性扩增带。采用PCR检测方法,通过对94份奶牛奶样的检测,得到牛结核分枝杆菌的阳性率为11.7%(11/94),PCR和胶体金方法检出率有明显的差异。PCR方法敏感性强,特异性高,是一种提高牛结核病临床诊断的好方法。

硬红斑皮损中结核杆菌DNA的检测

为了探讨皮肤血管炎和结核杆菌的关系,应用PCR技术对硬红斑病理组织进行了结核杆菌DNA的检测。结果显示4例作为阳性对照的淋巴结结核中3例呈阳性,正常皮肤组织及5例硬红斑均呈阴性。表明完整的结核杆菌在硬红斑并不多见,可能部分由其产生的蛋白或细菌碎片引起的变态反应所致。

结核杆菌的细菌学、分子生物学和免疫学检测方法评价

目的比较涂片法、荧光定量PCR方法和结核抗体检测法对结核病的诊断价值。方法选取2006年7月~2010年8月期间临床确诊或怀疑结核的检样326例,进行涂片抗酸染色、荧光定量PCR检测和采集血样进行结核抗体检查。结果 326例检样中,检出TB-DNA阳性107例,阳性率32.82%。其中脓液、支气管灌洗液和痰液最高,分别为48.84%（86例）、31.71%（82例）、30.39%（102例）。抗酸染色标本痰液阳性率为9.80%,脓液25.58%,支气管灌洗液15.85%。结核抗体阳性率52.45%。抗酸染色法与荧光PCR法的符合率81.60%,而结核抗体检测法与抗酸染色法的符合率61.97%,与荧光PCR检测法的符合率为80.37%。结论三种方法中,以结核抗体法阳性率最高,荧光PCR法次之,抗酸染色法阳性率最低。三种方法联合运用,可弥补单独采用1种方法阳性率低的缺点,几种方法之间可相互佐证,从而使准确性得以提高。

PCR快速检测支气管灌洗液结核杆菌的研究

应用PCR(聚合酶链反应)体外DNA扩增技术检测结核杆菌DNA,灵敏度为1pg,约10～100个菌。所用引物只扩增结核杆菌复合体DNA产生245bp片段,其余受试分支杆菌及链霉菌、大肠杆菌未见该片段扩增,可见具有较高特异性。PCR直接检测83例结核病人支气管灌洗液结核杆菌DNA阳性率56.6％,显著高于涂片(20.5％)和培养(25.3％)。

压电体声波生物传感器检测食品中的结核杆菌

本实验使用一个压电体声波生物传感器对模拟样品中的结核杆菌减毒菌株H37Ra进行快速检测,在池系数为0.513cm和培养基稀释倍数为10倍时,传感器具有较高的灵敏度,并得到了细胞浓度与频率之间的线性方程;使用2%NaOH处理样品,能去除杂菌的干扰,但会使检测时间延长。

多位点酶切联合SSCP方法检测结核杆菌inhA基因突变

目的 建立一种简便而有效的方法检测结核分枝杆菌异烟肼耐药基因inhA突变。方法 收集结核杆菌临床菌株48株,其中异烟肼敏感株25株,耐药株23株。抽提临床菌株DNA和H37Rv标准株DNA,聚合酶链反应(PCR)方法扩增inhA基因,产物纯化后用限制性内切酶Hae Ⅱ酶切,酶切片段用单链多态构象分析(SS-CP)方法检测其单链构象。发现单链构象改变的PCR产物进行DNA测序。结果 48株菌株中,25株敏感株中未见inhA基因单链构象差异,23株耐药株中inhA基因突变率为21.8％。新发现的错义突变有:A26E、R27K、V28A、Q32A、L54V和S72T。结论 应用限制性内切酶Hae Ⅱ改良的聚合酶链反应—单链多态构象分析(PCR—SSCP)技术适用于结核临床菌株inhA基因突变的筛选。inhA基因突变位点呈多样性。

变色液体培养技术和基因芯片技术检测结核杆菌耐药的方法比较及其临床应用

目的利用变色液体培养法、基因芯片法检测痰标本结核杆菌耐药性,并与传统的比例法比较,评价这两种方法快速检测结核分枝杆菌耐药性的临床应用价值。方法应用变色液体培养法和基因芯片法同时检测62例涂阳肺结核痰标本MTB对R、H、S、E的耐药性,并与改良罗氏比例法结果进行比较。结果以比例法药敏结果为判断标准,则变色液体培养法测定异烟肼耐药性的敏感性、特异性、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)及准确性分别为93%以上;同样,利福平为:94.4%以上;链霉素:85.7%(12/14)以上;乙胺丁醇:66.7%(4/6)以上。以比例法药敏结果为判断标准,基因芯片法测定H耐药性的敏感性、特异性、PPV、NPV及准确性分别为75%(12/16)、78.3%(36/46)、54.5%(12/22)、90%(36/40)、77.4%(48/62);同样利福平:83.3%(15/18)、86.4%(38/44)、71.4%(15/21)、92.7(38/41)、85.5%(53/62);链霉素:85.7%(12/14)、87.5%(42/48)、66.7%(12/18)、95.5%(42/44)、87.1%(54/62);乙胺丁醇:66.7%(4/6)、94.6%(53/56)、57.1%(4/7)、96.4%(53/55)、91.9%(57/62)。结论变色液体培养法测定痰标本结核菌H、R、S、E耐药性与比例法结果有较高的相符率,且简便、快捷、价廉、安全,可作为MTB耐药性的快速筛选方法,适合基层医院使用。基因芯片法检测MTB耐药性简便、快捷,但敏感性、特异性比比例法和变色液体培养法低,同时实验室设备和人员的要求都不是普通医院所能满足,目前可作为传统药敏试验的补充,要广泛应用于临床尚需更深入的研究。

聚合酶链反应-增强化学发光法快速检测结核杆菌的研究

目的 建立聚合酶链反应 -增强化学发光法 (polymerasechainreaction enhancedchemilumine cence ,PCR ECL)快速高灵敏度和高特异性检测结核杆菌的方法。方法 以结核分支杆菌、牛分支杆菌特异性抗原Pab基因的 4 19bp片段为靶序列 ,PCR体系经优化 ,直接酶标法标记探针 ,增强化学发光检测 (ECL)进行分子杂交。结果 PCR体系对结核分支杆菌、牛分支杆菌、卡介苗的扩增为阳性 ,PCR体系灵敏度为 5fgDNA分子。ECL体系灵敏度为 0 .5pgDNA分子。采用模拟痰样 ,可检至 10个以下结核杆菌。结论 建立了结核杆菌的PCR ECL快速检测方法 。

BACTEC-MGIT 960快速分离培养结核杆菌实验室检测效果分析

BACT-MGIT 960全自动分枝杆菌快速培养仪是集分枝杆菌快速培养、检测及药敏技术为一体的全自动分枝杆菌培养系统，广泛用于结核诊断和临床鉴别诊断。结核菌培养是诊断结核病的“金标准”，传统的检查方法所需时间长，通常需要1～2个月，给临床诊断和治疗带来了困难，也增加了患者的痛苦。结核菌快速培养是目前世界上最先进的结核菌培养系统。该系统能进行多种标本（痰、胸腹积液、脑脊液、尿、粪便、组织等）的结核菌培养，培养阳性后即时加做药敏，大大缩短了报告时间。快速培养方法的准确性和快速性已使其成为目前结核菌培养的必然趋势。

铜绿假单胞菌可导致聚合酶链反应检测结核杆菌假阳性

铜绿假单胞菌可导致聚合酶链反应检测结核杆菌假阳性吕火祥，刘建栋，陈霞，许立，王爱萍（浙江省人民医院，杭州３１００１４）用ＰＣＲ技术对结核杆菌ＤＮＡ片段的扩增，可提高阳性检出率，已颇受临床和实验室关注，但此方法亦不同程度地存在假阳性问题。我们也发现铜绿...

应用实时PCR检测红鹿感染牛型结核杆菌后IFN-γ和IL-4mRNA的表达

目的 揭示红鹿抗结核杆菌感染的免疫反应途径。方法 共采用 2 0只红鹿 ,其中一组 10只对牛型结核杆菌(Mycobacteriumbovis,M bovis)有自然抵抗力 ,另一组 10只对M bovis敏感。两组各取 5只接种活的卡介苗 (BCG) ,余下 5只不接种。接种卡介苗 8周后所有的红鹿都注射有毒力的M bovis,在注射M bovis4周前以及 6周后分别收集外周血单核细胞 (Peripheralbloodmononuclearcells ,PBMC) ,PBMC在与美洲商陆原 (PokeweedMitogen ,PWM)共育后测定细胞因子Inter feron -γ(IFN -γ)和Interleukin - 4 (IL - 4 )mRNA的表达水平。mRNA的定量测定是在ABIPRISM 770 0序列检测系统上应用TaqManReal-time11PCR技术进行的。结果 在红鹿接受M bovis刺激前后PBMC中IFN -γ和IL - 4mRNA的表达水平有显著性差异。结论 红鹿抵抗结核杆菌感染的免疫反应是复杂的混合细胞反应型 ,Th1,Th2细胞反应均加强。

PCR-ELISA微孔板杂交技术检测结核杆菌DNA

目的 采用PCR ELISA微孔板杂交技术检测结核杆菌DNA。方法 采用PCR技术扩增结核杆菌DNA ,并将扩增产物加入预先包被结核杆菌探针的微孔板 ,再加入结核杆菌显色探针 ,同时进行微孔板核酸夹心杂交ELISA显色。共检测肺部疾病患者痰标本 5 10例。结果 该法的灵敏度为 5 9.3% ,特异性为 95 .0 % ;阳性预测值为 96 .3% ,阴性预测值为 5 1.4 %。结论 PCR ELISA微孔板杂交技术可快速、准确地检测结核杆菌DNA ,是结核病早期诊断和鉴别诊断的可靠实验室方法。