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BAT2基因缺失葡萄酒酵母的构建及其对葡萄酒高级醇的影响
1
作者
闫统帅
周世水
+2 位作者
秦泽鑫
朱泳冲
郭波
《中国酿造》
CAS
北大核心
2022年第9期37-42,共6页
该研究以葡萄酒酵母BV-0为出发菌,利用融合聚合酶链式反应(PCR)构建BAT2基因敲除组件,通过电转化导入菌株BV-0进行同源重组,获得BAT2单等位基因敲除菌株BV-bk;再由菌株BV-bk产孢分离出两种不同配型的单倍体BAT2基因敲除菌进行杂交融合,...
该研究以葡萄酒酵母BV-0为出发菌,利用融合聚合酶链式反应(PCR)构建BAT2基因敲除组件,通过电转化导入菌株BV-0进行同源重组,获得BAT2单等位基因敲除菌株BV-bk;再由菌株BV-bk产孢分离出两种不同配型的单倍体BAT2基因敲除菌进行杂交融合,获得BAT2双等位基因敲除菌株BV-BK;最后利用Cre/loxP重组系统去除菌株BV-bk、BV-BK的KanMX抗性基因得到菌株BV-b、BV-B。采用菌株BV-0、BV-b及BV-B分别发酵葡萄酒,并测定葡萄酒的基本理化指标及高级醇含量。结果表明,与出发菌株BV-0相比,菌株BV-b和BV-B发酵的葡萄酒的基本理化指标基本一致,异丁醇含量分别下降14.9%、67.0%,异戊醇含量分别下降17.87%、31.10%,且菌株BV-B发酵葡萄酒中正丙醇含量上升36.55%,说明两株BAT2基因敲除菌株可应用于葡萄酒发酵中以降低异丁醇和异戊醇含量,从而降低葡萄酒的苦味和醉度,具有潜在的工业应用价值。
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关键词
葡萄酒
葡萄酒酵母
bat2基因
高级醇
苦味
醉度
下载PDF
职称材料
一次敲除BAT2同时过表达Lg-ATF1对啤酒酵母产醇酯的影响
被引量:
8
2
作者
葛峻伶
郭莹
+2 位作者
刘小二
张翠英
肖冬光
《现代食品科技》
EI
CAS
北大核心
2019年第6期171-176,272,共7页
乙酸乙酯和高级醇是啤酒中的重要风味物质,为了探究BAT2基因和Lg-ATF1基因对啤酒酵母产醇酯能力的影响,进而解决啤酒中存在的醇高酯低的问题。本研究通过酶切连接法构建重组质粒pUC-PLABBK,采用醋酸锂转化法和胞内同源重组技术,以多倍...
乙酸乙酯和高级醇是啤酒中的重要风味物质,为了探究BAT2基因和Lg-ATF1基因对啤酒酵母产醇酯能力的影响,进而解决啤酒中存在的醇高酯低的问题。本研究通过酶切连接法构建重组质粒pUC-PLABBK,采用醋酸锂转化法和胞内同源重组技术,以多倍体啤酒酵母菌株S5为出发菌株,KanMX基因作为筛选标记,最终获得过量表达Lg-ATF1基因同时敲除BAT2基因的重组菌株S5-Lg。通过啤酒发酵实验和数字PCR探究重组酵母菌株S5-Lg与出发菌株S5醇酯含量与相关基因表达量的变化。结果显示,与出发菌株相比,S5-Lg的总高级醇生成量降低9.12%,其中异丁醇和异戊醇的生成量分别降低了10.63%和9.55%,乙酸乙酯生成量提升了26.81%,BAT2基因表达量降低45.72%,Lg-ATF1基因表达量大幅提升。BAT2基因和Lg-ATF1基因可以影响啤酒酵母产生高级醇和乙酸乙酯的含量,对改善啤酒风味有重要参考意义。
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关键词
酿酒酵母
乙酸乙酯
高级醇
Lg-ATF1
基因
bat2基因
下载PDF
职称材料
BAT基因改造对酿酒酵母高级醇生成量的影响
被引量:
14
3
作者
刘芳志
张翠英
+2 位作者
李维
刘学强
肖冬光
《现代食品科技》
EI
CAS
北大核心
2016年第6期142-147,共6页
酿酒酵母BAT基因编码支链氨基酸转氨酶,其中BAT1和BAT2基因分别编码线粒体和细胞质氨基酸转氨酶,位于细胞不同的位置导致二者的生理功能有所差异,BAT1基因在线粒体中倾向催化α-酮酸合成氨基酸,细胞质中的BAT2基因将氨基酸转化为α-酮酸...
酿酒酵母BAT基因编码支链氨基酸转氨酶,其中BAT1和BAT2基因分别编码线粒体和细胞质氨基酸转氨酶,位于细胞不同的位置导致二者的生理功能有所差异,BAT1基因在线粒体中倾向催化α-酮酸合成氨基酸,细胞质中的BAT2基因将氨基酸转化为α-酮酸,通过敲除BAT2以减少α-酮酸合成,过表达BAT1以增加α-酮酸消耗达到降低酿酒酵母高级醇的合成的目的。本研究以酿酒酵母AY15单倍体α5为出发菌株,结合融合PCR技术构建重组质粒p UC-BABPB1K,获得BA-PGK-BAT1-BB重组盒,并利用醋酸锂转化法和同源重组技术筛选出缺失BAT2基因同时过表达BAT1基因的突变株B-8,将其和亲本菌株α5、BAT2基因缺失菌株α5ΔBAT2进行酒精发酵实验,发酵结束后进行发酵性能和高级醇的测定。实验结果表明,与亲本菌株相比,异丁醇降低了25%,异戊醇降低了15%,活性戊醇降低了30%;与α5ΔBAT2菌株相比,异丁醇提高了0.5倍,异戊醇增加了0.1倍,活性戊醇增加了0.3倍。
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关键词
酿酒酵母
高级醇
融合PCR
bat
1
基因
bat2基因
原文传递
题名
BAT2基因缺失葡萄酒酵母的构建及其对葡萄酒高级醇的影响
1
作者
闫统帅
周世水
秦泽鑫
朱泳冲
郭波
机构
华南理工大学生物科学与工程学院
广东石湾酒厂集团股份有限公司
出处
《中国酿造》
CAS
北大核心
2022年第9期37-42,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(51878291)。
文摘
该研究以葡萄酒酵母BV-0为出发菌,利用融合聚合酶链式反应(PCR)构建BAT2基因敲除组件,通过电转化导入菌株BV-0进行同源重组,获得BAT2单等位基因敲除菌株BV-bk;再由菌株BV-bk产孢分离出两种不同配型的单倍体BAT2基因敲除菌进行杂交融合,获得BAT2双等位基因敲除菌株BV-BK;最后利用Cre/loxP重组系统去除菌株BV-bk、BV-BK的KanMX抗性基因得到菌株BV-b、BV-B。采用菌株BV-0、BV-b及BV-B分别发酵葡萄酒,并测定葡萄酒的基本理化指标及高级醇含量。结果表明,与出发菌株BV-0相比,菌株BV-b和BV-B发酵的葡萄酒的基本理化指标基本一致,异丁醇含量分别下降14.9%、67.0%,异戊醇含量分别下降17.87%、31.10%,且菌株BV-B发酵葡萄酒中正丙醇含量上升36.55%,说明两株BAT2基因敲除菌株可应用于葡萄酒发酵中以降低异丁醇和异戊醇含量,从而降低葡萄酒的苦味和醉度,具有潜在的工业应用价值。
关键词
葡萄酒
葡萄酒酵母
bat2基因
高级醇
苦味
醉度
Keywords
wine
wine yeast
bat
2
gene
higher alcohol
bitterness
intoxicating degree
分类号
TS261.11 [轻工技术与工程—发酵工程]
下载PDF
职称材料
题名
一次敲除BAT2同时过表达Lg-ATF1对啤酒酵母产醇酯的影响
被引量:
8
2
作者
葛峻伶
郭莹
刘小二
张翠英
肖冬光
机构
天津科技大学生物工程学院工业发酵微生物教育部重点实验室
出处
《现代食品科技》
EI
CAS
北大核心
2019年第6期171-176,272,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(31471724)
文摘
乙酸乙酯和高级醇是啤酒中的重要风味物质,为了探究BAT2基因和Lg-ATF1基因对啤酒酵母产醇酯能力的影响,进而解决啤酒中存在的醇高酯低的问题。本研究通过酶切连接法构建重组质粒pUC-PLABBK,采用醋酸锂转化法和胞内同源重组技术,以多倍体啤酒酵母菌株S5为出发菌株,KanMX基因作为筛选标记,最终获得过量表达Lg-ATF1基因同时敲除BAT2基因的重组菌株S5-Lg。通过啤酒发酵实验和数字PCR探究重组酵母菌株S5-Lg与出发菌株S5醇酯含量与相关基因表达量的变化。结果显示,与出发菌株相比,S5-Lg的总高级醇生成量降低9.12%,其中异丁醇和异戊醇的生成量分别降低了10.63%和9.55%,乙酸乙酯生成量提升了26.81%,BAT2基因表达量降低45.72%,Lg-ATF1基因表达量大幅提升。BAT2基因和Lg-ATF1基因可以影响啤酒酵母产生高级醇和乙酸乙酯的含量,对改善啤酒风味有重要参考意义。
关键词
酿酒酵母
乙酸乙酯
高级醇
Lg-ATF1
基因
bat2基因
Keywords
Saccharomyces pastorianus
ethyl acetate
higher alcohols
Lg-ATF1 gene
bat
2
gene
分类号
TS262.5 [轻工技术与工程—发酵工程]
下载PDF
职称材料
题名
BAT基因改造对酿酒酵母高级醇生成量的影响
被引量:
14
3
作者
刘芳志
张翠英
李维
刘学强
肖冬光
机构
天津科技大学生物工程学院工业发酵微生物教育部重点实验室
出处
《现代食品科技》
EI
CAS
北大核心
2016年第6期142-147,共6页
基金
天津市科委自然基金重点项目(14JCZDJC32900)
国家自然科学基金项目(31471724)
文摘
酿酒酵母BAT基因编码支链氨基酸转氨酶,其中BAT1和BAT2基因分别编码线粒体和细胞质氨基酸转氨酶,位于细胞不同的位置导致二者的生理功能有所差异,BAT1基因在线粒体中倾向催化α-酮酸合成氨基酸,细胞质中的BAT2基因将氨基酸转化为α-酮酸,通过敲除BAT2以减少α-酮酸合成,过表达BAT1以增加α-酮酸消耗达到降低酿酒酵母高级醇的合成的目的。本研究以酿酒酵母AY15单倍体α5为出发菌株,结合融合PCR技术构建重组质粒p UC-BABPB1K,获得BA-PGK-BAT1-BB重组盒,并利用醋酸锂转化法和同源重组技术筛选出缺失BAT2基因同时过表达BAT1基因的突变株B-8,将其和亲本菌株α5、BAT2基因缺失菌株α5ΔBAT2进行酒精发酵实验,发酵结束后进行发酵性能和高级醇的测定。实验结果表明,与亲本菌株相比,异丁醇降低了25%,异戊醇降低了15%,活性戊醇降低了30%;与α5ΔBAT2菌株相比,异丁醇提高了0.5倍,异戊醇增加了0.1倍,活性戊醇增加了0.3倍。
关键词
酿酒酵母
高级醇
融合PCR
bat
1
基因
bat2基因
Keywords
Saccharomyces cerevisiae
higher alcohols
fusion polymerase chain reaction(PCR)
bat
1 gene
bat
2
gene
分类号
TS261.11 [轻工技术与工程—发酵工程]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
BAT2基因缺失葡萄酒酵母的构建及其对葡萄酒高级醇的影响
闫统帅
周世水
秦泽鑫
朱泳冲
郭波
《中国酿造》
CAS
北大核心
2022
0
下载PDF
职称材料
2
一次敲除BAT2同时过表达Lg-ATF1对啤酒酵母产醇酯的影响
葛峻伶
郭莹
刘小二
张翠英
肖冬光
《现代食品科技》
EI
CAS
北大核心
2019
8
下载PDF
职称材料
3
BAT基因改造对酿酒酵母高级醇生成量的影响
刘芳志
张翠英
李维
刘学强
肖冬光
《现代食品科技》
EI
CAS
北大核心
2016
14
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