美沙拉嗪联合康复新液治疗对炎症性肠病患者BATF2表达的影响分析

目的探究美沙拉嗪联合康复新液治疗对炎症性肠病(Inflammatory bowel disease,IBD)患者肠粘膜碱性亮氨酸拉链ATF样转录因子2(Basic leucine zipper transcription factor ATF-like 2,BATF2)表达的影响。方法选取2019年5月至2022年8月我院收治的IBD患者76例作为观察组,其中溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)和克罗恩病(Crohn's disease,CD)患者各38例。选取30例结肠镜检查未见结肠病变的健康体检人群作为正常对照组。收集观察组和对照组患者的新鲜肠粘膜组织,并收集美沙拉嗪联合康复新液治疗后的肠粘膜组织,荧光定量PCR测定BATF2 mRNA、白介素17(Interleukin,IL-17)mRNA和白介素10(Interleukin,IL-10)mRNA的表达水平。结果UC和CD患者肠粘膜组织中BATF2 mRNA均显著低于对照组,IL-17 mRNA显著高于对照组,而IL-10 mRNA显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。UC患者中,BATF2 mRNA与C反应蛋白、血沉、疾病活动度评分及IL-17 mRNA呈显著负相关性(P<0.05)。在CD患者中,BATF2 mRNA与C反应蛋白、疾病活动度评分及IL-17 mRNA呈显著负相关性(P<0.05)。美沙拉嗪联合康复新液治疗后UC和CD患者BATF2 mRNA表达量显著高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05)。结论BATF2在IBD患者中异常下降,并与疾病活动性、炎症水平及L-17呈显著性相关性,提示其可能成为IBD的生物标志物。美沙拉嗪联合康复新液治疗可显著增加肠粘膜中BATF2的表达。

BATF2/SARI通过抑制p53依赖的NF-κB转录活性诱导肿瘤细胞凋亡

BATF2/SARI是一种新发现的转录因子,具有与BATF和BATF3类似的碱性亮氨酸拉链结构,可抑制AP-1转录因子家族(AP-1 transcription factors)活性,从而发挥抑癌作用.但目前关于BATF2表达调节与功能尚不十分清楚.本研究证明,BATF2通过抑制p53相关的NF-κB活性诱导细胞凋亡.实时定量PCR检测mRNA揭示,BATF2/SARI在p53-野生型的A549、HeLa细胞高水平表达,但在p53-缺失型的H1299细胞表达较低.基因转染结合MTT法、TUNEL法显示,过表达BATF2可诱导凋亡,抑制肿瘤细胞增殖;这种抑制效应与细胞p53表达水平相关.采用含NF-κB或AP-1结合位点的(人工合成)启动子驱动的荧光素酶报告基因活性分析发现,过表达BATF2既可抑制AP-1,又可抑制NF-κB转录活性;抑制NF-κB活性与细胞p53状态有关.RNA干扰敲减A549、HeLa细胞的p53表达可消除过表达外源BATF2引起的NF-κB活性下降.本研究结果提示,BATF2通过抑制NF-κB及AP-1转录活性诱导凋亡,从而抑制细胞增殖;BATF2对NF-κB活性的抑制作用依赖p53.因此,BATF2作为一种抑癌基因产物,其作用机制可能比当前的认识和预期更为复杂.

AAV介导的BATF2/SARI过表达抑制肝癌细胞HepG2增殖

目的探讨腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)介导的BATF2/SARI过表达对肝癌细胞HepG2细胞活力的影响及其分子机制。方法通过分子克隆技术构建AAV介导的BATF2/SARI过表达载体,用包装纯化后的AAV-BATF2感染HepG2细胞,MTT检测其对细胞活力的作用,荧光素酶分析其对NFκB转录活性的影响。结果重组AAV-BATF2载体构建成功,AAV-BATF2感染的HepG2细胞生长活力受到明显抑制,NFκB转录活性明显下调。结论重组AAV-BATF2病毒感染人肝癌细胞HepG2可抑制肿瘤细胞增殖,其对NFκB转录活性的抑制可能是其发挥作用的机制之一。

白藜芦醇上调BATF2表达及抑制肝癌细胞增殖的研究

目的初步探讨白藜芦醇对BATF2表达的调控作用及对肝癌细胞(HepG2)增殖能力的影响。方法用不同剂量的白藜芦醇(终浓度分别为20、40、80μmol/L)处理HepG2细胞,进行逆转录PCR(RT-PCR)、实时定量PCR(Real-time PCR)、Western blot检测碱性亮氨酸拉链转录因子2(BATF2)mRNA和蛋白水平表达的变化,并采用细胞增殖检测试剂(CCK-8)实验检测对细胞增殖能力的影响。结果在HepG2细胞中,白藜芦醇能剂量依赖性地诱导BATF2在转录和翻译水平的表达,并抑制细胞的增殖(P<0.05);基因检测发现白藜芦醇显著诱导BATF2启动区活性,-244^-152区域存在白藜芦醇的可能结合位点。结论白藜芦醇能增强HepG2细胞中BATF2的表达并抑制细胞的增殖,提示上调BATF2的表达可能是白藜芦醇抑制肝癌细胞增殖的机制之一。

BATF2真核表达载体的构建及其对肝癌细胞Bel-7402增殖的影响

目的:构建人BATF2真核表达载体,并验证其过表达对肝癌Bel-7402细胞增殖的影响。方法:利用Trizol法提取正常人外周血单核细胞RNA并将其反转录成cDNA,再以cDNA为模板扩增出BATF2基因序列,再将其连接到pcDNA3.1真核表达载体上,采用酶切和测序的方法对重组质粒进行鉴定;用脂质体转染的方法将重组质粒转染Bel-7402细胞后,Western blot检测BATF2蛋白表达变化,MTT法检测对细胞增殖的影响。结果:双酶切和DNA测序结果验证了pcDNA3.1-BATF2真核表达载体构建成功;pc-DNA3.1-BATF2组BATF2蛋白表达量高于空白对照组与pcDNA3.1组(P<0.05)。转染48、72、96 h后,pc-DNA3.1-BATF2组Bel-7402细胞增殖的OD值均低于空白对照组和pcDNA3.1组(P<0.05)。结论:成功构建pcDNA3.1-BATF2真核表达载体并转染Bel-7402细胞后BATF2蛋白表达量增加,且过表达BATF2能够显著抑制肝癌细胞Bel-7402细胞增殖能力。

BATF2在舌鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的 探讨BATF2基因在人舌鳞状细胞癌（oral tongue squamous cell carcinoma,OTSCC）中的表达及临床意义.方法 采用定量PCR、蛋白质印迹法及免疫组化方法检测BATF2基因在OTSCC组织（16例）及对应癌旁黏膜组织（16例）的表达,探讨BATF2表达水平与临床病理及预后的关系.结果 定量PCR显示BATF2 mRNA在13例OTSCC组织表达低于癌旁黏膜组织;蛋白质印迹法检测显示BATF2蛋白在14例OTSCC组织表达低于癌旁黏膜组织;免疫组化显示在202例OTSCC标本中,BATF2蛋白无表达20例（9.9％）,低表达104例（51.5％）,高表达78例（38.6％）;且BATF2蛋白表达水平与OTSCC组织分化相关（P=0.002）,BATF2蛋白低表达患者预后显著差于BATF2高表达者（P＜ 0.001）.结论 BATF2在OTSCC中低表达与肿瘤分化程度及预后相关,可作为预测OTSCC预后的分子指标及OTSCC潜在的治疗靶点.

AG490上调BATF2表达抑制淋巴瘤细胞增殖

目的:AG490作为JAK2/STAT3通路的抑制剂,在对肿瘤细胞的抑制作用上所展现出的高效低毒性,使其有望成为临床上治疗肿瘤的一种可能的药物。然而,AG490的抗瘤机制尚未明确。因此,本文拟对AG490抑制淋巴瘤细胞增殖的效应及其作用机制进行进一步探讨,为AG490应用于临床提供实验依据。方法:用不同剂量的AG490处理淋巴瘤细胞(Namalwa和JeKo-1)、Jurkat T淋巴细胞性白血病细胞和THP-1单核细胞性白血病细胞24小时,CCK-8法检测AG490(0μM、2μM、20μM、50μM、200μM)对上述细胞的增殖抑制作用,实时定量PCR法检测BATF2 mRNA的变化,Western blot法检测其蛋白水平的变化,细胞转染siRNA法抑制BATF2表达后CCK8法检测AG490对Namalwa细胞的增殖抑制效应。结果:AG490呈剂量依赖性地抑制Namalwa、JeKo-1、Jurkat细胞的增殖(P<0.05),同时上调其BATF2 mRNA水平和蛋白水平的表达(P<0.05)。对于无显著抑制作用的THP-1细胞,BATF2的表达亦未见升高(P>0.05)。siRNA法抑制BATF2基因表达后,AG490对Namalwa细胞的增殖抑制效果明显降低(P<0.05)。结论:AG490杀肿瘤细胞的效率与其诱导的BATF2的表达呈正相关,抑制BATF2的表达后AG490抑制肿瘤细胞增殖的效率明显降低。因此,AG490可能是通过上调BATF2表达的方式抑制淋巴瘤细胞增殖。这意味着BATF2是AG490杀伤淋巴瘤细胞的作用靶点,可能为新药的开发做出一定的贡献。

BATF2对Wnt信号通路影响的研究

Wnt信号通路在各种生物体内高度进化保守,与癌症的发生发展密切相关。BATF2是一个新近发现的基因,研究表明其具有抑癌基因的作用。目前,BATF2与Wnt信号通路的关系尚不清楚,该文用荧光素酶报告基因检测、Real-time PCR和Western blot发现BATF2能影响Wnt信号通路。过表达BATF2可明显下调TCF4/β-catenin的转录活性和Wnt信号通路下游基因的表达,可以下调细胞核中的β-catenin。推测BATF2可能通过下调细胞核中的β-catenin来实现对Wnt信号通路的下调。上述结果为抑制Wnt信号通路用于肿瘤治疗提供了一定的依据。

过表达BTAF2对肝癌Bel-7402细胞侵袭和迁移的影响

目的 探讨碱性亮氨酸拉链转录因子2(BATF2)过表达对肝癌Bel-7402细胞侵袭迁移的影响。方法 利用Lipofeetamine 3000 Reagent脂质体转染法进行肝癌Bel-7402细胞转染,以转染pcDNA3.1空载体的Bel-7402细胞和转染pcDNA3.1-BATF2的Bel-7402细胞为研究对象,利用Western blot法检测转染后Bel-7402细胞的BATF2蛋白表达水平,Transwell小室检测转染后Bel-7402细胞侵袭能力,细胞划痕实验检测转染后Bel-7402细胞迁移能力。结果 相较于pcDNA3.1组,pcDNA3.1-BATF2组蛋白表达量显著增加,差异具有显著性(P<0.05);pcDNA3.1组侵袭穿膜的细胞数为(108.5±27.7)个,而pcDNA3.1-BATF2组侵袭穿膜的细胞术为(45.6±17.9)个,pcDNA3.1-BATF2组细胞穿膜数量明显减少(P<0.05);pcDNA3.1组迁移距离为(90.15±27.58)μm,而pcDNA3.1-BATF2组迁移距离为(51.46±16.17)μm, pcDNA3.1-BATF2组细胞迁移距离明显缩短(P<0.05)。结论 BATF2过表达能够抑制肝癌细胞Bel-7402侵袭和迁移能力。