BATF2/SARI通过抑制p53依赖的NF-κB转录活性诱导肿瘤细胞凋亡

BATF2/SARI是一种新发现的转录因子,具有与BATF和BATF3类似的碱性亮氨酸拉链结构,可抑制AP-1转录因子家族(AP-1 transcription factors)活性,从而发挥抑癌作用.但目前关于BATF2表达调节与功能尚不十分清楚.本研究证明,BATF2通过抑制p53相关的NF-κB活性诱导细胞凋亡.实时定量PCR检测mRNA揭示,BATF2/SARI在p53-野生型的A549、HeLa细胞高水平表达,但在p53-缺失型的H1299细胞表达较低.基因转染结合MTT法、TUNEL法显示,过表达BATF2可诱导凋亡,抑制肿瘤细胞增殖;这种抑制效应与细胞p53表达水平相关.采用含NF-κB或AP-1结合位点的(人工合成)启动子驱动的荧光素酶报告基因活性分析发现,过表达BATF2既可抑制AP-1,又可抑制NF-κB转录活性;抑制NF-κB活性与细胞p53状态有关.RNA干扰敲减A549、HeLa细胞的p53表达可消除过表达外源BATF2引起的NF-κB活性下降.本研究结果提示,BATF2通过抑制NF-κB及AP-1转录活性诱导凋亡,从而抑制细胞增殖;BATF2对NF-κB活性的抑制作用依赖p53.因此,BATF2作为一种抑癌基因产物,其作用机制可能比当前的认识和预期更为复杂.

AAV介导的BATF2/SARI过表达抑制肝癌细胞HepG2增殖

目的探讨腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)介导的BATF2/SARI过表达对肝癌细胞HepG2细胞活力的影响及其分子机制。方法通过分子克隆技术构建AAV介导的BATF2/SARI过表达载体,用包装纯化后的AAV-BATF2感染HepG2细胞,MTT检测其对细胞活力的作用,荧光素酶分析其对NFκB转录活性的影响。结果重组AAV-BATF2载体构建成功,AAV-BATF2感染的HepG2细胞生长活力受到明显抑制,NFκB转录活性明显下调。结论重组AAV-BATF2病毒感染人肝癌细胞HepG2可抑制肿瘤细胞增殖,其对NFκB转录活性的抑制可能是其发挥作用的机制之一。

美沙拉嗪联合康复新液治疗对炎症性肠病患者BATF2表达的影响分析

目的探究美沙拉嗪联合康复新液治疗对炎症性肠病(Inflammatory bowel disease,IBD)患者肠粘膜碱性亮氨酸拉链ATF样转录因子2(Basic leucine zipper transcription factor ATF-like 2,BATF2)表达的影响。方法选取2019年5月至2022年8月我院收治的IBD患者76例作为观察组,其中溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)和克罗恩病(Crohn's disease,CD)患者各38例。选取30例结肠镜检查未见结肠病变的健康体检人群作为正常对照组。收集观察组和对照组患者的新鲜肠粘膜组织,并收集美沙拉嗪联合康复新液治疗后的肠粘膜组织,荧光定量PCR测定BATF2 mRNA、白介素17(Interleukin,IL-17)mRNA和白介素10(Interleukin,IL-10)mRNA的表达水平。结果UC和CD患者肠粘膜组织中BATF2 mRNA均显著低于对照组,IL-17 mRNA显著高于对照组,而IL-10 mRNA显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。UC患者中,BATF2 mRNA与C反应蛋白、血沉、疾病活动度评分及IL-17 mRNA呈显著负相关性(P<0.05)。在CD患者中,BATF2 mRNA与C反应蛋白、疾病活动度评分及IL-17 mRNA呈显著负相关性(P<0.05)。美沙拉嗪联合康复新液治疗后UC和CD患者BATF2 mRNA表达量显著高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05)。结论BATF2在IBD患者中异常下降,并与疾病活动性、炎症水平及L-17呈显著性相关性,提示其可能成为IBD的生物标志物。美沙拉嗪联合康复新液治疗可显著增加肠粘膜中BATF2的表达。

BATF2真核表达载体的构建及其对肝癌细胞Bel-7402增殖的影响

目的:构建人BATF2真核表达载体,并验证其过表达对肝癌Bel-7402细胞增殖的影响。方法:利用Trizol法提取正常人外周血单核细胞RNA并将其反转录成cDNA,再以cDNA为模板扩增出BATF2基因序列,再将其连接到pcDNA3.1真核表达载体上,采用酶切和测序的方法对重组质粒进行鉴定;用脂质体转染的方法将重组质粒转染Bel-7402细胞后,Western blot检测BATF2蛋白表达变化,MTT法检测对细胞增殖的影响。结果:双酶切和DNA测序结果验证了pcDNA3.1-BATF2真核表达载体构建成功;pc-DNA3.1-BATF2组BATF2蛋白表达量高于空白对照组与pcDNA3.1组(P<0.05)。转染48、72、96 h后,pc-DNA3.1-BATF2组Bel-7402细胞增殖的OD值均低于空白对照组和pcDNA3.1组(P<0.05)。结论:成功构建pcDNA3.1-BATF2真核表达载体并转染Bel-7402细胞后BATF2蛋白表达量增加,且过表达BATF2能够显著抑制肝癌细胞Bel-7402细胞增殖能力。

蒙药萨日嘎日迪联合西药治疗对2型糖尿病合并勃起功能障碍患者血清同型半胱氨酸和一氧化氮及一氧化氮合酶水平的影响

目的分析蒙药萨日嘎日迪联合西药治疗对2型糖尿病(T2DM)合并勃起功能障碍(ED)患者血清同型半胱氨酸(Hcy)、一氧化氮、一氧化氮合酶(NOS)水平的影响。方法选取2015年1月至2017年1月内分泌科住院治疗的346例T2DM合并ED患者作为研究对象,其中来自河北港口集团有限公司港口医院213例,内蒙古自治区科尔沁右翼中旗蒙医医院133例。应用随机数字表法将其分为观察组和对照组,每组173例。对照组在对症治疗基础上采用α-硫辛酸、前列地尔、甲钴胺治疗,观察组在对照组治疗基础上加服蒙药萨日嘎日迪治疗,2组患者均连续治疗2周。对2组患者治疗前后的国际勃起功能指数5(IIEF-5)评分、血清总睾酮及游离睾酮、Hcy、一氧化氮及NOS水平进行比较;观察治疗期间不良反应发生情况。结果 2组患者治疗前IIEF-5评分、血清总睾酮及游离睾酮、Hcy、一氧化氮及NOS水平差异均无统计学意义(均P> 0. 05)。经治疗后,2组IIEF-5评分、血清总睾酮及游离睾酮水平均较治疗前明显升高,且观察组明显高于对照组(均P <0. 05)。经治疗后,2组血清Hcy水平较治疗前明显降低,血清一氧化氮、NOS水平较治疗前明显升高[观察组:(8. 0±1. 0)μmol/L比(13. 3±1. 7)μmol/L、(36. 2±4. 6)μmol/L比(16. 6±2. 3)μmol/L、(35. 0±4. 2) k U/L比(19. 6±2. 7) k U/L;对照组:(9. 9±1. 2)μmol/L比(13. 2±1. 8)μmol/L、(29. 5±3. 8)μmol/L比(16. 6±2. 2)μmol/L、(29. 8±3. 8) k U/L比(19. 7±2. 8) k U/L];观察组治疗后的血清Hcy水平明显低于对照组,血清一氧化氮、NOS水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。2组不良反应发生率差异无统计学意义(P=0. 445)。结论在T2DM合并ED的治疗中,将蒙药萨日嘎日迪与α-硫辛酸、前列地尔、甲钴胺进行多药联合应用,能够更加明显地提升勃起功能和血清性激素水平,降低血清Hcy水平,改善血管内皮舒张功能,具有提高疗效的作用且安全性较高。

过表达BTAF2对肝癌Bel-7402细胞侵袭和迁移的影响

目的 探讨碱性亮氨酸拉链转录因子2(BATF2)过表达对肝癌Bel-7402细胞侵袭迁移的影响。方法 利用Lipofeetamine 3000 Reagent脂质体转染法进行肝癌Bel-7402细胞转染,以转染pcDNA3.1空载体的Bel-7402细胞和转染pcDNA3.1-BATF2的Bel-7402细胞为研究对象,利用Western blot法检测转染后Bel-7402细胞的BATF2蛋白表达水平,Transwell小室检测转染后Bel-7402细胞侵袭能力,细胞划痕实验检测转染后Bel-7402细胞迁移能力。结果 相较于pcDNA3.1组,pcDNA3.1-BATF2组蛋白表达量显著增加,差异具有显著性(P<0.05);pcDNA3.1组侵袭穿膜的细胞数为(108.5±27.7)个,而pcDNA3.1-BATF2组侵袭穿膜的细胞术为(45.6±17.9)个,pcDNA3.1-BATF2组细胞穿膜数量明显减少(P<0.05);pcDNA3.1组迁移距离为(90.15±27.58)μm,而pcDNA3.1-BATF2组迁移距离为(51.46±16.17)μm, pcDNA3.1-BATF2组细胞迁移距离明显缩短(P<0.05)。结论 BATF2过表达能够抑制肝癌细胞Bel-7402侵袭和迁移能力。

BATF2在舌鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的 探讨BATF2基因在人舌鳞状细胞癌（oral tongue squamous cell carcinoma,OTSCC）中的表达及临床意义.方法 采用定量PCR、蛋白质印迹法及免疫组化方法检测BATF2基因在OTSCC组织（16例）及对应癌旁黏膜组织（16例）的表达,探讨BATF2表达水平与临床病理及预后的关系.结果 定量PCR显示BATF2 mRNA在13例OTSCC组织表达低于癌旁黏膜组织;蛋白质印迹法检测显示BATF2蛋白在14例OTSCC组织表达低于癌旁黏膜组织;免疫组化显示在202例OTSCC标本中,BATF2蛋白无表达20例（9.9％）,低表达104例（51.5％）,高表达78例（38.6％）;且BATF2蛋白表达水平与OTSCC组织分化相关（P=0.002）,BATF2蛋白低表达患者预后显著差于BATF2高表达者（P＜ 0.001）.结论 BATF2在OTSCC中低表达与肿瘤分化程度及预后相关,可作为预测OTSCC预后的分子指标及OTSCC潜在的治疗靶点.

AG490上调BATF2表达抑制淋巴瘤细胞增殖

目的:AG490作为JAK2/STAT3通路的抑制剂,在对肿瘤细胞的抑制作用上所展现出的高效低毒性,使其有望成为临床上治疗肿瘤的一种可能的药物。然而,AG490的抗瘤机制尚未明确。因此,本文拟对AG490抑制淋巴瘤细胞增殖的效应及其作用机制进行进一步探讨,为AG490应用于临床提供实验依据。方法:用不同剂量的AG490处理淋巴瘤细胞(Namalwa和JeKo-1)、Jurkat T淋巴细胞性白血病细胞和THP-1单核细胞性白血病细胞24小时,CCK-8法检测AG490(0μM、2μM、20μM、50μM、200μM)对上述细胞的增殖抑制作用,实时定量PCR法检测BATF2 mRNA的变化,Western blot法检测其蛋白水平的变化,细胞转染siRNA法抑制BATF2表达后CCK8法检测AG490对Namalwa细胞的增殖抑制效应。结果:AG490呈剂量依赖性地抑制Namalwa、JeKo-1、Jurkat细胞的增殖(P<0.05),同时上调其BATF2 mRNA水平和蛋白水平的表达(P<0.05)。对于无显著抑制作用的THP-1细胞,BATF2的表达亦未见升高(P>0.05)。siRNA法抑制BATF2基因表达后,AG490对Namalwa细胞的增殖抑制效果明显降低(P<0.05)。结论:AG490杀肿瘤细胞的效率与其诱导的BATF2的表达呈正相关,抑制BATF2的表达后AG490抑制肿瘤细胞增殖的效率明显降低。因此,AG490可能是通过上调BATF2表达的方式抑制淋巴瘤细胞增殖。这意味着BATF2是AG490杀伤淋巴瘤细胞的作用靶点,可能为新药的开发做出一定的贡献。

BATF2对Wnt信号通路影响的研究

Wnt信号通路在各种生物体内高度进化保守,与癌症的发生发展密切相关。BATF2是一个新近发现的基因,研究表明其具有抑癌基因的作用。目前,BATF2与Wnt信号通路的关系尚不清楚,该文用荧光素酶报告基因检测、Real-time PCR和Western blot发现BATF2能影响Wnt信号通路。过表达BATF2可明显下调TCF4/β-catenin的转录活性和Wnt信号通路下游基因的表达,可以下调细胞核中的β-catenin。推测BATF2可能通过下调细胞核中的β-catenin来实现对Wnt信号通路的下调。上述结果为抑制Wnt信号通路用于肿瘤治疗提供了一定的依据。