安体优调节BCAP37细胞TIMP2表达的体外实验研究

吴良村从事肿瘤防治工作40余载,精心研制了安体优(黄芩、天冬等),用于防治肿瘤患者术后的转移和复发,取得了一定的疗效.为探讨安体优防治肿瘤转移和复发的机理,进一步推广其在肿瘤临床中的使用,我们提取了安体优的主要成分黄芩甙,结合细胞培养、MTT和RT-PCR等技术,发现黄芩甙在转录水平对tissue inhibitor metalloproteinase 2 (TIMP2)有一定的调节作用.

RNAi沉默β-arrestin2基因对人乳腺癌Bcap37细胞凋亡的影响

目的:通过体外实验观察β-arrestin2的小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对人乳腺癌Bcap37细胞凋亡的影响。方法:针对β-arrestin2基因设计siRNA序列,克隆到空载体PGPU6/GFP/Neo,转化DH5α菌株,提取质粒,进行测序分析。在脂质体lipofectamineTM2000的介导下转染Bcap37细胞,同时转染空白对照组及阴性对照组。转染后用定量Western blot检测Bcap37细胞β-arrestin2蛋白的表达情况,流式细胞仪检测Bcap37细胞的凋亡情况。结果:我们的研究表明,β-arrestin2的siRNA能有效下调β-arrestin2的表达,与对照组相比,β-arrestin2干扰组β-arrestin2的表达明显下降(P<0.05);β-arrestin2干扰组Bcap37细胞凋亡率显著高于对照组。结论:β-arrestin2干扰组能有效降低β-arrestin2的表达,有效促进Bcap37细胞凋亡;β-arrestin2可能成为乳腺癌基因治疗的一个新靶点。

黄芩苷体外调控乳腺癌细胞表达TI MP2的实验研究

目的:探讨黄芩苷对Bcap37细胞生长及TIMP2表达的影响。方法:体外细胞培养、MTT法测定不同浓度黄芩苷对Bcap37细胞生长曲线的影响,RTPCR、Westernblot方法研究不同浓度黄芩苷对Bcap37细胞TIMP2的影响。结果:黄芩苷对Bcap37细胞的生长抑制呈浓度依赖关系;黄芩苷对Bcap37细胞TIMP2在mRNA水平、蛋白水平呈浓度依赖关系,小剂量上调,高剂量下调。结论:黄芩苷对人乳腺癌Bcap37细胞生长有抑制作用,可能与肿瘤细胞TIMP2的下调有关。

天麻素在Caco-2细胞及Bcap37、Bcap37/MDR1细胞模型中的转运和摄取(英文)

天麻素是传统中药天麻的有效活性成分。本研究以Caco-2细胞、Bcap37和Bcap37/MDR1为模型,体外评价天麻素在Caco-2细胞模型上的转运过程以及天麻素与P-糖蛋白之间的相互作用。在50～500μmol.L?1浓度内,天麻素的表观渗透系数(Papp)比值<2.0,与转运方向无关,且不受P-糖蛋白的经典抑制剂(维拉帕米和GF120918)的影响。天麻素在Bcap37、Bcap37/MDR1细胞中的积聚呈浓度依赖性,且不干扰罗丹明123在Bcap37/MDR1细胞中的积聚。结果表明,天麻素在Caco-2细胞模型上的转运方式以被动转运为主,天麻素不是P-糖蛋白的底物和抑制剂。