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CRX-527 as a candidate adjuvant in a recombinant BCG-based malaria vaccine
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作者 Nor Munirah Zakaria Muhammad Adamu Abbas Rapeah Suppian 《Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine》 SCIE CAS 2024年第1期1-7,共7页
Objective:To investigate the role of CRX-527,a Toll-like receptor 4 agonist,as the possible adjuvant for recombinant Mycobacterium bovis Bacillus Calmette-Guerin expressing merozoite surface protein 1C(BCG-MSP-1C).Met... Objective:To investigate the role of CRX-527,a Toll-like receptor 4 agonist,as the possible adjuvant for recombinant Mycobacterium bovis Bacillus Calmette-Guerin expressing merozoite surface protein 1C(BCG-MSP-1C).Methods:The mice were immunized with BCG and BCG-MSP-1C in the presence and absence of CRX-527.The untreated mice(injected with PBS-T80 only)were the negative control.The ability of CRX-527 to enhance IgG and its subclasses,as well as IL-4 and IFN-γproduction in the serum and spleen supernatant was evaluated using ELISA.Results:Mice immunized with BCG-MSP-1C exhibited the highest production of IgGs,IL-4 and IFN-γafter third immunization.In addition,CRX-527 further promoted the production of total IgG and IgG subclasses as well as IFN-γand IL-4 in the serum and splenocytes of immunized mice.Conclusions:CRX-527 has the potential as an adjuvant candidate for the candidate vaccines.Further study is needed to verify appropriate dosage for immunization and its efficacy. 展开更多
关键词 CRX-527 bcg bcg-MSP-1C TLR-4 agonists Cytokine IgG MALARIA
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BCG感染巨噬细胞对肾小管上皮细胞损伤和修复的影响
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作者 乔春林 吴子毅 +3 位作者 孙湛 勾璇 王新敏 章乐 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1036-1041,共6页
目的:探讨肾结核发生过程中结核分枝杆菌BCG感染巨噬细胞对肾小管上皮细胞损伤和修复的影响。方法:Transwell建立BCG感染的M0型巨噬细胞(上室)与HK-2细胞(下室)共培养模型,100 ng/ml佛波酯(PMA)诱导THP-1人单核巨噬细胞24 h成为M0型巨... 目的:探讨肾结核发生过程中结核分枝杆菌BCG感染巨噬细胞对肾小管上皮细胞损伤和修复的影响。方法:Transwell建立BCG感染的M0型巨噬细胞(上室)与HK-2细胞(下室)共培养模型,100 ng/ml佛波酯(PMA)诱导THP-1人单核巨噬细胞24 h成为M0型巨噬细胞,建立BCG感染细胞模型,分别于感染12 h和24 h收集细胞总蛋白,Western blot检测M1型巨噬细胞标志物CD86及M2型巨噬细胞标志物CD206蛋白表达,ELISA检测细胞培养上清中M1型巨噬细胞极化标志因子IL-6和TNF-α表达、M2型巨噬细胞极化标志因子TGF-β表达;实验分为HK-2组、BCG+HK-2组、BCG+M0+HK-2组及M0+HK-2组,CCK-8检测各组HK-2细胞活力,Hoechst实验检测各组HK-2细胞凋亡,蛋白免疫印迹检测各组HK-2细胞上皮细胞标志物E-cadhren及成纤维细胞标志物α-SMA等转分化指标表达。结果:BCG感染M0型巨噬细胞后,M1型巨噬细胞活力12 h高于24 h(P<0.05),M2型巨噬细胞活力24 h高于12 h(P<0.05);BCG感染的巨噬细胞与HK-2细胞共培养后,HK-2细胞活力24 h高于12 h(P<0.001),凋亡水平12 h高于24 h,上皮细胞标志蛋白E-cadherin蛋白水平24 h高于12 h(P<0.001),成纤维细胞标志蛋白α-SMA蛋白水平12 h高于24 h(P<0.01)。结论:肾结核发生发展过程中,早期BCG感染巨噬细胞可能通过M1型极化促进肾小管上皮细胞炎症损伤;随着感染时间延长,可能通过M2型极化修复肾小管上皮细胞损伤,发挥保护作用。 展开更多
关键词 肾小管上皮细胞 巨噬细胞 极化 bcg 损伤
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乌头酸脱羧酶1对BCG诱导巨噬细胞炎症反应的调控作用研究
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作者 戴帆 刘占有 +1 位作者 张旭阳 李武 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期1696-1706,共11页
旨在探究乌头酸脱羧酶1(aconitate decarboxylase 1,ACOD1)对减毒牛分枝杆菌卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin, BCG)诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症反应的调控作用。基于小干扰RNA技术构建ACOD1敲减模型,采用Western blot、qRT-PC... 旨在探究乌头酸脱羧酶1(aconitate decarboxylase 1,ACOD1)对减毒牛分枝杆菌卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin, BCG)诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症反应的调控作用。基于小干扰RNA技术构建ACOD1敲减模型,采用Western blot、qRT-PCR、免疫荧光等技术检测BCG感染巨噬细胞RAW264.7后细胞内ACOD1、细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-4、IL-6、IL-10、COX2、iNOS以及TLR4/MyD88/NF-κB信号通路蛋白的表达变化。结果显示,BCG感染巨噬细胞RAW264.7后以时间和浓度依赖性方式显著上调ACOD1及促炎细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、COX2、iNOS的表达,下调抑炎细胞因子IL-4、TGF-β的表达(P<0.01);si-ACOD1结合BCG感染会显著下调促炎细胞因子表达(P<0.01),同时也会下调TLR4/MyD88/NF-κB通路相关蛋白TLR4、MyD88、TRAF6、p-NF-κB p65的表达。综上,ACOD1可能通过TLR4/MyD88/NF-κB信号通路参与调控BCG引起的炎症反应。 展开更多
关键词 乌头酸脱羧酶1 bcg 小鼠巨噬细胞RAW264.7 炎症反应 TLR4/MyD88/NF-κB信号通路
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过表达miR-144-3p下调感染巨噬细胞 IL-6 mRNA抑制BCG的存活
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作者 江升升 李杨 +5 位作者 李淑萍 李雪芳 张叶 周怀珩 刘晓倩 余晓丽 《武汉轻工大学学报》 CAS 2024年第1期28-33,53,共7页
探究miR-144-3p对巨噬细胞IL-6 mRNA表达量和巨噬细胞免疫能力的影响,为结核诊疗提供理论参考。方法(1)建立BCG感染THP-1巨噬细胞模型,qPCR检测感染不同时间miR-144-3p和IL-6 mRNA表达变化;(2)瞬转miR-144-3p模拟物/抑制剂来过表达/抑制... 探究miR-144-3p对巨噬细胞IL-6 mRNA表达量和巨噬细胞免疫能力的影响,为结核诊疗提供理论参考。方法(1)建立BCG感染THP-1巨噬细胞模型,qPCR检测感染不同时间miR-144-3p和IL-6 mRNA表达变化;(2)瞬转miR-144-3p模拟物/抑制剂来过表达/抑制miR-144-3p后,qPCR检测感染不同时间miR-144-3p和IL-6 mRNA表达变化;皮尔森相关系数分析miR-144-3p和IL-6 mRNA的相关性;(3)CCK-8检测瞬转miR-144-3p模拟物/抑制剂后,CCK-8检测BCG感染的巨噬细胞增殖能力;CFU检测BCG存活状态。结果显示:(1)巨噬细胞感染BCG后,miR-144-3p和IL-6 mRNA表达均显著上升(P<0.05),miR-144-3p表达量在12 h达到峰值,IL-6 mRNA表达量在24 h达到峰值;(2)巨噬细胞感染BCG后,过表达miR-144-3p使IL-6 mRNA表达显著下降(P<0.01);抑制miR-144-3p使IL-6 mRNA表达显著上升(P<0.01);皮尔森相关系数分析结果显示两者存在负相关性;(3)过表达/抑制miR-144-3p不影响巨噬细胞增殖能力,但过表达miR-144-3p能抑制巨噬细胞中BCG的存活。结论:BCG感染巨噬细胞后miR-144-3p和IL-6 mRNA表达均显著上升;过表达/抑制巨噬细胞miR-144-3p,miR-144-3p可能负调控IL-6 mRNA表达;过表达miR-144-3p能抑制BCG存活,进而增强巨噬细胞的先天免疫能力。 展开更多
关键词 结核病 bcg THP-1巨噬细胞 miR-144-3p IL-6 mRNA
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lincRNA Cox2通过miR-129-5p/AMPK调控BCG感染的巨噬细胞糖酵解进程
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作者 徐蕾 于嘉霖 +2 位作者 刘莉 邓光存 吴晓玲 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1606-1619,共14页
[目的]探究lincRNA Cox2对BCG(Bacillus Calmette-Guérin)感染的RAW264.7巨噬细胞糖酵解进程的调控作用,阐明Mtb与巨噬细胞之间的相互作用,为结核病的诊断和治疗提供新的靶点。[方法]利用小干扰RNA敲减lincRNA Cox2的表达,以及使用... [目的]探究lincRNA Cox2对BCG(Bacillus Calmette-Guérin)感染的RAW264.7巨噬细胞糖酵解进程的调控作用,阐明Mtb与巨噬细胞之间的相互作用,为结核病的诊断和治疗提供新的靶点。[方法]利用小干扰RNA敲减lincRNA Cox2的表达,以及使用miR-129-5p mimics过表达载体,结合BCG感染,通过实时荧光定量PCR检测lincRNA Cox2、miR-129-5p和促炎因子IL-1β、TNF-α、IL-6的表达量;乳酸含量检测试剂盒检测乳酸(LD)的分泌情况;平板涂布法检测巨噬细胞菌载量情况;双荧光素酶报告基因系统验证lincRNA Cox2与miR-129-5p以及miR-129-5p与AMPK的互作关系;蛋白免疫印迹检测AMPK(AMP依赖蛋白激酶)及糖酵解途径中关键基因HK1(己糖激酶1)、PKM2(丙酮酸激酶2)和LDHA(乳酸脱氢酶)的表达变化。[结果]BCG感染12 h能够极显著上调RAW264.7巨噬细胞中lincRNA Cox2的表达(P=0.000013),与BCG组相比,siRNA+BCG组中AMPK(P=0.000771)、HK1(P=0.00323)、PKM2(P=0.000135)和LDHA(P=0.002532)的表达量以及乳酸的分泌量(P=0.020802)发生显著上调,而促炎因子IL-1β(P=0.000451)、TNF-α(P=0.000147)、IL-6(P=0.0001)的表达发生显著下调,菌载量试验表明siRNA+BCG组中的巨噬细胞菌载量显著下调(P=0.000127)。双荧光素酶报告基因系统表明lincRNA Cox2和miR-129-5p存在相互作用关系并以AMPK为靶基因。BCG感染RAW264.7巨噬细胞12 h后极显著下调miR-129-5p的表达(P=0.000156),与BCG组相比,miR-129-5p mimics+BCG组中AMPK(P=0.000262)、HK1(P=0.019524)、PKM2(P=0.001658)和LDHA(P=0.000887)表达量以及乳酸分泌量(P=0.044952)发生显著下调。[结论]lincRNA Cox2通过海绵吸附miR-129-5p并靶向AMPK,促进BCG感染的RAW264.7巨噬细胞糖酵解进程。 展开更多
关键词 lincRNA Cox2 miR-129-5p AMPK bcg 巨噬细胞 糖酵解进程
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IL—2膀胱内注射及BCG+IL—2联合膀胱灌注预防膀胱癌复发
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作者 于廷亮 《中文科技期刊数据库(引文版)医药卫生》 2024年第6期0185-0188,共4页
考察IL-2膀胱内给药、BCG与IL-2联合膀胱灌注以及传统丝裂霉素C膀胱内注射在防止防治癌症复发的疗效。方法 总共有60名膀胱癌病人,当中30个为观察组,运用IL-2膀胱内注射与BCG+IL-2联合膀胱灌注医治;另外30位充当对照组,采纳化疗药物治... 考察IL-2膀胱内给药、BCG与IL-2联合膀胱灌注以及传统丝裂霉素C膀胱内注射在防止防治癌症复发的疗效。方法 总共有60名膀胱癌病人,当中30个为观察组,运用IL-2膀胱内注射与BCG+IL-2联合膀胱灌注医治;另外30位充当对照组,采纳化疗药物治疗方式。运用SPSS 21.0专业统计分析软件,深入研究收集来的数据。结果 观察组癌症复发概率仅仅3.33%,明显少于对照组百分之十五;观察组在存活率方面的表现形式显著超过对照组。主要问题表现为轻微到适中的尿道不适感,如尿频、尿急、尿痛,并伴随发烫等症状。结论 IL-2膀胱内给药及BCG与IL-2联合膀胱浸泡在预防膀胱癌再次发作方面表现出显著效果。这个方法为防止膀胱癌术后再次发作带来了新的途径。然而在实际应用中,还需针对可靠性和实效性进行仔细考察,接着应对种种困难,目的在于为病人给出更有效的治疗方案。 展开更多
关键词 膀胱癌 IL-2 bcg 膀胱灌注 复发预防
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多维复苏与倡导BCG发展模式——泰国2022年回顾与2023年展望 被引量:1
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作者 袁春生 《东南亚纵横》 2023年第1期1-22,共22页
2022年,泰国政府有效应对新冠疫情冲击,开启了经济、社会、外交等多维度复苏之路。政治方面,受执政联盟内斗、反对派持续攻势、修宪案制衡和民意支持率以及各政党角逐新一轮大选准备等因素叠加影响,泰国政局总体保持平稳但也呈现诸多不... 2022年,泰国政府有效应对新冠疫情冲击,开启了经济、社会、外交等多维度复苏之路。政治方面,受执政联盟内斗、反对派持续攻势、修宪案制衡和民意支持率以及各政党角逐新一轮大选准备等因素叠加影响,泰国政局总体保持平稳但也呈现诸多不确定性。经济方面,采取制定《第十三个国民经济和社会发展计划(2023—2027年)》,实施“生物循环绿色”经济发展行动计划,推进“东部经济走廊”建设等系列措施,主要宏观经济指标加速上扬,除了建筑业,贸易经济、旅游业、外国投资、数字经济等各产业领域持续复苏并取得新发展。社会方面,劳动就业、居民消费和民生福祉等主要社会指标发展趋好,但控枪、禁毒及减少交通事故等仍是亟待解决的社会难题。外交方面,立足提升国际影响力,突出加强经济外交,持续推进多边合作,着力谋求在气候变化、粮食安全和能源安全等国际事务中发挥建设性作用。延续大国平衡的外交传统,平衡和稳定与中国、美国、日本等国家的战略合作关系,加强与东盟及其成员国的友好合作关系。展望2023年,新一轮大选是泰国的焦点,同时受全球经济持续低迷和地缘政治紧张局势影响,泰国2023年政治、经济、社会和外交等发展仍然面临不确定性风险。 展开更多
关键词 “泰国4.0”战略 bcg模式 EEC 泰国大选 中泰关系
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谷氨酰胺对BCG诱导小鼠传代巨噬细胞凋亡的调控作用 被引量:2
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作者 安琪 于嘉霖 +1 位作者 吴晓玲 邓光存 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期3054-3063,共10页
旨在探讨谷氨酰胺在牛分枝杆菌卡介苗(Bacille Calmette-Guerin vaccine,BCG)感染巨噬细胞过程中对凋亡的调控作用。本文采用小鼠单核巨噬细胞RAW264.7,首先建立了BCG感染致细胞凋亡的细胞模型,采用Western blotting检测凋亡关键因子的... 旨在探讨谷氨酰胺在牛分枝杆菌卡介苗(Bacille Calmette-Guerin vaccine,BCG)感染巨噬细胞过程中对凋亡的调控作用。本文采用小鼠单核巨噬细胞RAW264.7,首先建立了BCG感染致细胞凋亡的细胞模型,采用Western blotting检测凋亡关键因子的表达变化,确定最佳感染条件;进而利用无谷氨酰胺培养基构建谷氨酰胺剥夺模型并结合BCG感染,采用ELISA、免疫印迹、免疫荧光和流式细胞术等技术检测了细胞内谷氨酰胺关键代谢指标的差异变化。通过上述研究,阐明谷氨酰胺对BCG诱导的巨噬细胞凋亡的调控作用,并初步探讨其机制。结果表明,BCG感染显著上调了小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞中Caspase 3和PARP的蛋白表达(P<0.001),最佳感染时间为12 h,最佳感染复数为10 MOI,同时BCG感染促进了RAW264.7细胞内谷氨酰胺的分解代谢。剥夺谷氨酰胺后能极显著降低BCG感染后巨噬细胞中谷氨酸(P<0.001)和谷胱甘肽(P<0.01)的含量,极显著增加了细胞内ROS的含量(P<0.001)。同时,抑制谷氨酰胺代谢促进了RAW264.7细胞内促凋亡蛋白Caspase 3、PARP、Cytc和Bax的表达(P<0.001),极显著下调抑凋亡蛋白Bcl-2的表达(P<0.001)。综上表明,在BCG感染RAW264.7细胞的过程中,抑制谷氨酰胺代谢可以降低细胞内谷胱甘肽的含量,造成ROS的累积,进而通过内源性途径促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 bcg 谷氨酰胺 巨噬细胞RAW264.7 细胞凋亡
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脂肪分化相关蛋白2对BCG诱导小鼠传代巨噬细胞自噬的调控作用 被引量:1
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作者 王崇年 于嘉霖 +2 位作者 宫照乾 吴晓玲 邓光存 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期2134-2146,共13页
本研究旨在探讨脂肪分化相关蛋白2(perilipin 2,PLIN2)在卡介苗(bacillus calmette-guérin,BCG)感染的小鼠巨噬细胞RAW264.7中对自噬的调控作用。利用小干扰RNA敲减小鼠巨噬细胞RAW264.7中PLIN2的表达,结合BCG感染,通过免疫印迹、... 本研究旨在探讨脂肪分化相关蛋白2(perilipin 2,PLIN2)在卡介苗(bacillus calmette-guérin,BCG)感染的小鼠巨噬细胞RAW264.7中对自噬的调控作用。利用小干扰RNA敲减小鼠巨噬细胞RAW264.7中PLIN2的表达,结合BCG感染,通过免疫印迹、流式细胞术和免疫荧光等技术,检测胞内PLIN2、自噬、内质网应激及脂肪酸代谢相关因子指标的表达变化。结果显示:BCG感染显著上调巨噬细胞RAW264.7中PLIN2的表达(P<0.05),极显著上调自噬相关蛋白ATG5(P<0.01)、ATG12(P<0.001)及LC3(P<0.001)的表达,并伴随着细胞内中性脂质的蓄积。敲减PLIN2能使BCG感染的巨噬细胞RAW264.7中自噬相关蛋白ATG5(P<0.05)和ATG12(P<0.05)显著下调以及LC3(P<0.001)极显著下调,细胞自噬率极显著降低(P<0.001),并极显著降低细胞内中性脂质的含量(P<0.001)。同时,敲减PLIN2显著下调CHOP(P<0.05),并极显著下调ATF4(P<0.001)内质网应激相关蛋白表达,细胞内Ca^(2+)浓度极显著降低(P<0.001)。此外,利用内质网应激激动剂Tunicamycin持续激活内质网应激通路后,无论是否敲减PLIN2,BCG感染的巨噬细胞内自噬相关蛋白表达均无显著差异(P>0.05)。BCG感染巨噬细胞上调了PLIN2的表达,而PLIN2通过上调细胞内脂肪酸含量,进而级联激活PERK-eIF2α-ATF4-CHOP内质网应激信号通路,诱导细胞自噬发生。 展开更多
关键词 PLIN2 bcg 小鼠巨噬细胞RAW264.7 内质网应激 细胞自噬
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IL-10对于耐药BCG感染巨噬细胞后iNOS和乳酸表达水平的影响
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作者 庞慧 戎燕筱 +4 位作者 马翠卿 张洵 王家超 高雪 魏林 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期396-402,共7页
目的通过IL-10作用于耐药BCG感染巨噬细胞的体外模型,研究其对巨噬细胞产生iNOS和乳酸的影响,为筛选耐药分枝杆菌诊疗靶点提供理论依据。方法采用Western blot检测巨噬细胞中STAT1、STAT3表达水平;运用比色法测定诱导型一氧化氮合酶(iN... 目的通过IL-10作用于耐药BCG感染巨噬细胞的体外模型,研究其对巨噬细胞产生iNOS和乳酸的影响,为筛选耐药分枝杆菌诊疗靶点提供理论依据。方法采用Western blot检测巨噬细胞中STAT1、STAT3表达水平;运用比色法测定诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及乳酸含量;通过小干扰RNA敲低IL-10,分析STAT1、STAT3、iNOS、乳酸等表达水平。结果敲除IL-10与未敲除IL-10的2组细胞在敏感BCG(S’与S组)作用下,S’组诱导STAT1的能力受到影响;耐药BCG(R’与R组)诱导STAT1的能力较敏感BCG更弱;而STAT3在R’组显著低于S’组(P=0.0018);R’组比R组也有显著降低(P=0.0041)。敲低IL-10后,iNOS、乳酸在R’组表达水平均显著升高。结论耐药BCG促进巨噬细胞向M2型分化以及产生杀菌酶的能力依赖于IL-10。 展开更多
关键词 耐药bcg 白介素-10 巨噬细胞 诱导型一氧化氮合酶 乳酸
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BCG矩阵与床位利用评价模型在医院床位资源配置中的应用 被引量:2
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作者 张宇欣 仲琴 +1 位作者 汤金琴 蒋元琦 《江苏卫生事业管理》 2023年第4期434-439,共6页
目的:分析医院临床科室床位运行效率与产出效益,综合评价各科床位使用情况,为医院精细化床位运营管理提供客观依据。方法:以南京市某大型三甲医院2021年运营数据为基础,以床位使用率、平均住院日O/E值以及床位周转次数绘制床位运行效率... 目的:分析医院临床科室床位运行效率与产出效益,综合评价各科床位使用情况,为医院精细化床位运营管理提供客观依据。方法:以南京市某大型三甲医院2021年运营数据为基础,以床位使用率、平均住院日O/E值以及床位周转次数绘制床位运行效率模型BCG-1矩阵图;以床均净收入及其增长率结合床位数绘制床位产出效益模型BCG-2矩阵图,以床均业务量及其增长率结合床位数绘制床位产出效益模型BCG-3矩阵图。运用床位运行效率指标模型和床位产出效益指标模型,综合评价科室床位利用情况,分为Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级、Ⅴ级,并利用床位工作效率指标通过SPSS 25.0与Excel统计软件计算出各科床位合理配置范围。结果:全院35个临床科室中,7个Ⅰ级科室中4个科室和6个Ⅱ级科室中3个科室的床位数需上调;10个Ⅲ级科室中3个和5个Ⅳ级科室中4个科室以及7个Ⅴ级科室中5个科室床位数需下调;其余科室床位数均在合理配置区间。结论:利用多指标模型对医院床位利用效率进行综合评价,结合科室实际发展潜力,能够客观全面地平衡好科室床位需求,实现医院床位精细化运营管理。 展开更多
关键词 bcg矩阵 床位利用评价模型 床位资源配置 精细化运营管理
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BCG-CpG-DNA佐剂人用狂犬病疫苗(MRC-5细胞)在食蟹猴体内的免疫原性
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作者 黄帅 王汀 《中国人兽共患病学报》 CSCD 北大核心 2023年第12期1146-1150,共5页
目的 评价BCG-CpG-DNA佐剂人用狂犬病疫苗(MRC-5细胞)在食蟹猴体内的免疫原性。方法 将食蟹猴随机分为对照组、3针组及4针组,经后肢肌肉免疫,1.0 mL/剂。3针组及4针组均接种BCG-CpG-DNA佐剂人用狂犬病疫苗,3针组于0 d、7 d、21 d各接种1... 目的 评价BCG-CpG-DNA佐剂人用狂犬病疫苗(MRC-5细胞)在食蟹猴体内的免疫原性。方法 将食蟹猴随机分为对照组、3针组及4针组,经后肢肌肉免疫,1.0 mL/剂。3针组及4针组均接种BCG-CpG-DNA佐剂人用狂犬病疫苗,3针组于0 d、7 d、21 d各接种1剂,4针组于0 d、3 d、7 d、14 d各接种1剂;对照组接种市售国产同类疫苗,于0 d注射2剂、7 d及21 d各1剂。初免前(0 d)及初免后7 d、14 d、28 d、35 d、49 d、63 d后肢隐静脉采血,分离血清及外周血淋巴细胞。快速荧光灶抑制实验(Rapid Fluorescent focus Inhibition Test, RFFIT)及酶联免疫斑点检测技术(Enzyme-linked Immunospot Assay, ELISPOT)分别检测血清中抗狂犬病病毒中和抗体水平和外周血淋巴细胞中细胞因子IFN-γ、IL-2的表达水平。结果 食蟹猴血清中和抗体水平于免疫前均呈阴性(抗体效价<0.5 IU/mL),3针组和对照组在初免后7~28 d呈上升趋势,于28 d达最高,4针组在14 d达最高;在初免后28 d,对照组、3针组中和抗体水平显著高于4针组;初免后35 d,3针组中和抗体水平显著高于4针组,其余时间点同时间各组间差异均无统计学意义(P均>0.05)。3针组及4针组外周血淋巴细胞中IL-2及IFN-γ水平在7~14 d呈上升趋势,于14 d达最高,且3针组IFN-γ水平显著高于对照组,其余时间点同时间各组间差异均无统计学意义。结论 BCG-CpG-DNA佐剂人用狂犬病疫苗(MRC-5细胞)具有良好的免疫原性,具有优化狂犬病免疫接种程序的应用价值。 展开更多
关键词 狂犬病疫苗 bcg-CpG-DNA佐剂 MRC-5细胞 食蟹猴 免疫原性
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Development,Characterization and Application of a Three-Layer Intelligent pH-Sensing Indicator Based on Bromocresol Green(BCG)for Monitoring Fish Freshness
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作者 WEN Haiying OU Changrong +3 位作者 TANG Haiqing SANG Shangyuan DU Yingqi CHEN Jingyi 《Journal of Ocean University of China》 SCIE CAS CSCD 2023年第2期565-575,共11页
As a novel food quality monitoring technology,intelligent freshness indicator has received wide attention in recent years.However,its poor safety and stability are the main problems hindering its practical application... As a novel food quality monitoring technology,intelligent freshness indicator has received wide attention in recent years.However,its poor safety and stability are the main problems hindering its practical application.Hence a new pH-sensing indicator based on bromocresol green(BCG)was developed in this study for nondestructive and real-time monitoring the freshness of marine fishes.The indicator was designed with a three-layer structure,using the polytetrafluoroethylene(PTFE)membrane with high hydrophobicity and air permeability as the inner layer to isolate the moisture in the package,BCG-coated filter paper as the colorchanging layer to indicate the freshness of fish,and a transparent unidirectional permeable(TUP)membrane with moisture resistance as the out layer to isolate the moisture in the environment.This contributed to weaken the influence of humidity and prevent dye migration,so as to improve the accuracy and safety of the indicator.Therefore,a highly sensitive and distinguished color variation response to trimethylamine(TMA)standard solution with different concentrations was observed on the indicator.Additionally,the indicator showed a high color stability at different storage temperatures up to 14 days with total color differences(ΔE)less than 5.0.The indicator presented visible color variations from yellow to green then eventually to blue when applied to monitor the freshness of sea bass and salmon stored at 4℃,implying that fish was spoiled.Meanwhile,indicatorsΔE value was significantly positively correlated with total volatile basic nitrogen(TVB-N)and total viable count(TVC)in sea bass and salmon samples.Thus,the pH-sensing indicator can be applied as a cost-effective and promising intelligent indicator for monitoring fish freshness. 展开更多
关键词 fish freshness spoilage pH-sensing indicator color change bromocresol green(bcg) intelligent packaging
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多房棘球绦虫pBCG-Em14-3-3重组质粒的构建及其在BCG中的表达 被引量:15
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作者 李文桂 王鸿 朱佑明 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1111-1114,共4页
目的构建多房棘球绦虫重组质粒pBCG-Em14-3-3,并转化BCG进行表达。方法超声粉碎泡球蚴组织提取总RNA,通过RT-PCR扩增Em14-3-3抗原编码基因;将该扩增产物定向克隆到大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达载体pBCG,构建重组质粒pBCG-Em14-3-3;电穿孔... 目的构建多房棘球绦虫重组质粒pBCG-Em14-3-3,并转化BCG进行表达。方法超声粉碎泡球蚴组织提取总RNA,通过RT-PCR扩增Em14-3-3抗原编码基因;将该扩增产物定向克隆到大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达载体pBCG,构建重组质粒pBCG-Em14-3-3;电穿孔法转化BCG,构建多房棘球绦虫重组BCG-Em14-3-3。免疫印迹分析pBCG-Em14-3-3的表达产物。结果RT-PCR成功扩增出779bp的Em14-3-3抗原编码基因;双酶切证实Em14-3-3抗原编码基因成功插入pBCG中;PCR证实rBCG-Em14-3-3构建成功;免疫印迹分析发现pBCG-Em14-3-3的表达产物在相对分子质量(Mr)约为27×103处有明显的目的蛋白表达条带,且能被活动性泡球蚴病鼠血清特异识别。结论成功构建了多房棘球绦虫重组BCG-Em14-3-3。 展开更多
关键词 多房棘球绦虫 重组pbcg-Em 14—3—3 bcg 构建 表达效率
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BCG-CpG-DNA制备、理化特性及免疫刺激活性的初步研究 被引量:18
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作者 赵爱华 贾淑珍 +2 位作者 乔来艳 寇丽杰 王国治 《微生物学免疫学进展》 2005年第1期39-43,共5页
采用机械破碎、CTAB沉淀、酚:氯仿:异戊醇抽提法从卡介菌(BCG)中制备BCG-CpG-DNA,经化学方法确定其理化成分,通过双抗体夹心ELISA法检测小鼠IgM水平检测其免疫刺激活性.结果显示每克半干重的卡介菌提取BCG-CpG-DNA约0.9mg.提取物主要成... 采用机械破碎、CTAB沉淀、酚:氯仿:异戊醇抽提法从卡介菌(BCG)中制备BCG-CpG-DNA,经化学方法确定其理化成分,通过双抗体夹心ELISA法检测小鼠IgM水平检测其免疫刺激活性.结果显示每克半干重的卡介菌提取BCG-CpG-DNA约0.9mg.提取物主要成分为BCG-CpG-DNA,分子量大小在3 000~15 710 bp,含少量的多糖和蛋白;紫外分光扫描在260nm有最大吸收;对特异性识别DNA长链的CCGG中的CpG位点的限制性内切酶HpaⅡ高度敏感;能够活化小鼠B细胞产生IgM.所制备的BCG-CpG-DNA含较多的未甲基化CpG基序,具有免疫刺激活性功能. 展开更多
关键词 bcg-CPG-DNA 卡介菌(bcg) CPG基序
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多房棘球绦虫混合重组BCG-EmⅡ/3和BCG-Em14-3-3疫苗诱导小鼠脾细胞因子的变化 被引量:6
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作者 李文桂 王鸿 朱佑明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期911-913,共3页
目的:探讨多房棘球绦虫混合重组BCG-EmⅡ/3和BCG-Em14-3-3疫苗免疫后再以Em原头节攻击后小鼠脾细胞因子的变化。方法:将疫苗采用皮下注射和鼻腔内接种分别免疫BALB/c小鼠后8周,用多房棘球绦虫原头节进行攻击感染。感染后18周杀鼠取脾,... 目的:探讨多房棘球绦虫混合重组BCG-EmⅡ/3和BCG-Em14-3-3疫苗免疫后再以Em原头节攻击后小鼠脾细胞因子的变化。方法:将疫苗采用皮下注射和鼻腔内接种分别免疫BALB/c小鼠后8周,用多房棘球绦虫原头节进行攻击感染。感染后18周杀鼠取脾,分离脾细胞,用EmAg或ConA刺激培养,并收集脾细胞培养上清液,用试剂盒检测脾细胞培养上清液中IL-2、IFN-γ、TNF-α和IL-4的水平,同时设有空载体、BCG和PBS对照。结果:疫苗接种组的IFN-γ和TNF-α水平升高,IL-4水平降低;皮下注射组的TNF-α水平高于鼻腔内接种组。结论:多房棘球绦虫混合重组BCG-EmⅡ/3和BCG-Em14-3-3疫苗可诱导小鼠产生Th1型细胞应答,抵抗Em原头节的攻击感染。疫苗皮下注射途径优于鼻腔内接种。 展开更多
关键词 多房棘球绦虫 重组bcg—Em II/3疫苗 重组bcg.Eml4-3—3疫苗 细胞因子
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BCG多克隆抗体在结核性病变组织中的诊断价值 被引量:4
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作者 何桥 邓晓华 +1 位作者 古聪敏 刘燕 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2003年第1期50-52,共3页
目的 :探讨用卡介苗 (BCG)多克隆抗体检测结核性病变组织中BCG抗原对结核病的诊断价值。方法 收集各种组织不同类型的结核性病变组织标本 175例 ,非结核性病变组织标本 5 4例 ,采用BCG多克隆抗体免疫组化染色标记检测组织中BCG抗原 ,... 目的 :探讨用卡介苗 (BCG)多克隆抗体检测结核性病变组织中BCG抗原对结核病的诊断价值。方法 收集各种组织不同类型的结核性病变组织标本 175例 ,非结核性病变组织标本 5 4例 ,采用BCG多克隆抗体免疫组化染色标记检测组织中BCG抗原 ,同时与细菌学的抗酸染色作比较。结果 结核组对BCG呈阳性反应者 135例 ,占 77 12 %。阳性染色在朗汉斯巨细胞、上皮样细胞的胞质及干酪样坏死组织呈鲜红色颗粒 ;而抗酸染色阳性仅有 11例。占 6 2 9%。结核病的基本病理类型对BCG反应的阳性率分别是渗出为主型 >坏死为主型 >增殖为主型。结论 采用BCG多克隆抗体的免疫组化标记对结核病诊断的敏感性明显高于抗酸染色 。 展开更多
关键词 bcg多克隆抗体 结核性病变组织 诊断 免疫组化 bcg抗原
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多房棘球绦虫混合重组BCG-EmⅡ/3和BCG-Em14-3-3疫苗诱导小鼠的免疫保护力观察 被引量:6
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作者 李文桂 王鸿 朱佑明 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第13期1276-1279,共4页
目的探讨多房棘球绦虫混合重组BCG-EmⅡ/3和BCG-Em14-3-3疫苗免疫鼠后对Em原头节攻击感染的保护性作用。方法将混合重组BCG疫苗采用皮下注射和鼻腔内接种分别免疫BALB/c小鼠,免疫后8周用多房棘球绦虫原头节进行攻击感染,感染后18周剖杀... 目的探讨多房棘球绦虫混合重组BCG-EmⅡ/3和BCG-Em14-3-3疫苗免疫鼠后对Em原头节攻击感染的保护性作用。方法将混合重组BCG疫苗采用皮下注射和鼻腔内接种分别免疫BALB/c小鼠,免疫后8周用多房棘球绦虫原头节进行攻击感染,感染后18周剖杀小鼠,计算减蚴率,测定血清中IgG及其亚类和IgE水平;分离脾细胞,流式细胞仪检测脾CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群的百分比,同时设有空载体、BCG和PBS对照。结果疫苗接种组的减蚴率为45·29%~76.47%,血清IgG、IgG2a、IgG2b和IgE水平明显升高,IgG1和IgG3显著降低;疫苗接种组的脾CD4+T细胞亚群显著增加,CD8+T细胞亚群无明显变化,CD4+/CD8+亚群比值明显升高。结论多房棘球绦虫混合重组BCG-EmⅡ/3和BCG-Em14-3-3疫苗鼻腔内接种是一种较好的途径,IgG、IgG2a、IgG2b和IgE以及CD4+T细胞亚群在疫苗诱导的保护力中起重要作用。 展开更多
关键词 多房棘球绦虫 重组bcg-EmⅡ/3疫苗 重组bcg-EM14-3-3疫苗 保护力
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多房棘球绦虫混合重组BCG-EmⅡ/3和BCG-Em14-3-3疫苗免疫小鼠后脾细胞亚群的动态观察 被引量:4
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作者 李文桂 王鸿 朱佑明 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2007年第7期676-678,共3页
目的:动态观察多房棘球绦虫混合重组BCG-EmⅡ/3和BCG-Em14-3-3疫苗免疫小鼠后脾细胞亚群的变化。方法:将疫苗采用鼻腔内接种免疫BALB/C鼠,在免疫后0、2、4、6、8、10、12、14、16和18周各剖杀4只小鼠取脾,分离脾细胞,流式细胞仪检测脾CD... 目的:动态观察多房棘球绦虫混合重组BCG-EmⅡ/3和BCG-Em14-3-3疫苗免疫小鼠后脾细胞亚群的变化。方法:将疫苗采用鼻腔内接种免疫BALB/C鼠,在免疫后0、2、4、6、8、10、12、14、16和18周各剖杀4只小鼠取脾,分离脾细胞,流式细胞仪检测脾CD_4^+和CD_8^+T淋巴细胞亚群的百分比,同时设有PBS对照。结果:疫苗接种组的脾CD_4^+和CD_8^+T细胞亚群分别在免疫后2~12周和2~18周升高,分别在免疫后6和10周达最高水平。结论:CD_4^+T细胞亚群数目在多房棘球绦虫混合重组BCG-EmⅡ/3和BCG-Em14-3-3疫苗免疫早期(2~6周)显著增加, 展开更多
关键词 多房棘球绦虫 重组bcg-EmⅡ/3疫苗 重组bcg-EM14-3-3疫苗 脾细胞亚群
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多房棘球绦虫混合重组BCG-EmⅡ/3和BCG-Em14-3-3疫苗免疫小鼠后脾细胞因子的动态观察 被引量:2
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作者 李文桂 王鸿 朱佑明 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2008年第7期502-505,共4页
目的动态观察多房棘球绦虫混合重组BCG-EmⅡ/3和BCG-Em14-3-3疫苗免疫小鼠后脾细胞因子的变化。方法将混合疫苗采用鼻腔内接种免疫BALB/c鼠,在免疫后0、2、4、6、8和10周各剖杀4只小鼠,取脾,分离脾细胞,用EmAg或ConA刺激培养,收... 目的动态观察多房棘球绦虫混合重组BCG-EmⅡ/3和BCG-Em14-3-3疫苗免疫小鼠后脾细胞因子的变化。方法将混合疫苗采用鼻腔内接种免疫BALB/c鼠,在免疫后0、2、4、6、8和10周各剖杀4只小鼠,取脾,分离脾细胞,用EmAg或ConA刺激培养,收集脾细胞培养上清液,测定IL-2、IFN-7、TNF-α和IL-4水平。试验设有PBS对照。结果疫苗接种组小鼠脾细胞IL-2、IFN-γ、TNF-α和IL-4分别在免疫后2~10周、4~8周、6~10周和4~6周升高,分别在免疫后6、6、8和4周达最高水平,含量分别为10.0pg/ml、(75.0±6.6)pg/ml、(245.0±83.0)pg/ml和(187.5±16.5)pg/ml。结论多房棘球绦虫混合重组BCG-EmII/3和BCG-Em14—3—3疫苗在免疫早期(2~8周)即可诱导小鼠产生TH1和TH2混合型免疫反应。 展开更多
关键词 多房棘球绦虫 重组bcg-EmⅡ/3疫苗 重组bcg-EM14-3-3疫苗 细胞因子
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