血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗对小鼠血清NO浓度的影响

目的研究血吸虫重组 BCG- Sj2 6 GST疫苗对小鼠血清 NO浓度的影响。方法第 1次实验用 10 6 和 10 8CFU疫苗分别皮下注射免疫 BAL B/C鼠 ,免疫后 8周用日本血吸虫尾蚴攻击 ,感染后 6周剖杀小鼠 ,同时设有 PBS对照组 ;第 2次实验用 10 6 CFU疫苗皮下和静脉分别注射免疫鼠 ,于免疫后 0、4、8、10、14和 16周各剖杀 4只 ,分离血清 ,用 NO试剂盒检测小鼠血清 NO浓度。结果发现疫苗免疫 ,尾蚴攻击后血清 NO浓度降低 ;疫苗皮下和静脉注射免疫后 4～ 16周血清 NO浓度升高 ,分别于免疫后 10周或 16周达最高水平。结论血吸虫重组 BCG- Sj2 6 GST疫苗能降低感染鼠血清 NO浓度 ,提高宿主抗血吸虫感染的保护力。

血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗诱导小鼠T淋巴细胞亚群变化的研究

目的研究血吸虫重组BCG－Sj26GST疫苗对小鼠T淋巴细胞亚群的影响。方法实验一采用106和108CFU疫苗皮下接种BALB／c小鼠，接种后8WK用日本血吸虫尾蚴进行攻击感染，感染6wk剖杀小鼠，取脾制备脾细胞，同时设有PBS对照组。实验二分别用106CFU疫苗皮下和静脉注射免疫小鼠，分别于免疫后0、4、8、10、14和16wk各剖杀4只，分离脾脏，用FACsort流式细胞仪分析T细胞CD4＋和CD8＋亚群百分比。结果实验一疫苗免疫络小鼠经尾蚴攻击后脾T细胞CD4＋亚群明显升高，CD8＋亚群缓慢增加。实验二动态观察发现在皮下和静脉注射组，CD4＋亚群分别于免疫后10和18WK显著增加；皮下注射组CD8＋亚群在整个观察期间均无明显变化，静脉注射组则于免疫后4～16wk有轻度增加。结论T细胞CD4＋亚群可能在疫苗保护性免疫中起重要作用。

血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗对小鼠保护性免疫力的影响因素

目的 探讨血吸虫重组 BCG- Sj2 6 GST疫苗对小鼠保护性免疫力的影响因素。方法 将实验动物随机分为 8组 ,以免疫后不同攻击感染时间 ,不同免疫途径和不同免疫次数为主要参数。结果 各实验组减虫率为 2 9.6 9%～ 39.74% ,减卵率为 37.0 2 %～ 6 2 .86 % ,各实验组减虫率和减卵率与对照组相比 ,差异均有显著意义(P <0 .0 5 )或极显著意义 (P <0 .0 1)。结论 8周 。

重组BCG-Sj26GST疫苗诱导小鼠sIL-2R和IFN-γ的变化

目的研究日本血吸虫重组 BCG- Sj2 6 GST疫苗对小鼠脾细胞 s IL- 2 R和 IFN- γ的影响。方法第 1次实验采用 1× 10 6 和 1× 10 8CFU疫苗皮下免疫 BAL B/ C鼠 ,免疫后 8周用日本血吸虫尾蚴进行攻击感染 ,感染后 6周剖杀小鼠 ,同时设有 PBS对照组。第 2次实验用 1× 10 6 CFU疫苗皮下和静脉注射分别免疫小鼠 ,于免疫后 0、4、8、10、14和 16周各剖杀 4只 ,分离脾脏 ,用 Sj2 6或 Con A刺激脾细胞 ,用 EL ISA法检测脾细胞上清液中 s IL 2 - R和 IFN -γ含量。结果疫苗免疫 ,尾蚴攻击后 ,s IL- 2 R和 IFN- γ水平显著升高 ;动态观察发现 s IL- 2 R和 IFN- γ分别于免疫后 8～ 10周和 4～ 8周达最高水平。结论日本血吸虫重组 BCG- Sj2 6 GST疫苗可加强宿主 Th1反应 ,促进 Th1细胞分泌 IL- 2和 IFN- γ,它们与免疫细胞相互作用 。

日本血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗免疫小鼠保护力的观察

目的探讨日本血吸虫重组BCG鄄Sj26GST疫苗免疫鼠后对尾蚴攻击感染的保护作用。方法采用106和108CFU疫苗皮下接种免疫BALB/C鼠,免疫后8周用日本血吸虫尾蚴进行攻击感染,感染后6周剖杀小鼠,计算减虫率和减卵率,观察肝脏病理变化,测量虫卵肉芽肿周长和面积,测定血清中CAg、IgG及其亚类水平,同时设有PBS和BCG对照。结果疫苗接种组的减虫率为16.64%～46.20%,减卵率为55.75%～60.50%,肝组织病变明显减轻,虫卵肉芽肿的平均周长和平均面积显著减少,血清IgG和IgG2a水平明显升高,108CFU组CAg升高。结论日本血吸虫重组BCG鄄Sj26GST疫苗是一种新型比较理想的疫苗,值得进一步深入研究。

重组BCG-Sj26GST疫苗诱导小鼠体液免疫应答的动态观察

目的 检测日本血吸虫重组BCG Sj2 6GST疫苗免疫小鼠不同时间后的血清IgG及其亚类和循环抗原 (circulat ingantigen ,CAg)反应。方法 1× 10 6克隆形成单位 (colony formingunit,CFU)疫苗皮下和静脉注射免疫BALB/c鼠 ,分别于免疫后 0、4、8、10、14和 16周各剖杀 4只 ,收集血清 ,常规ELISA法检测IgG及其亚类和CAg ,同时设PBS皮下注射对照组。结果皮下注射组IgG在免疫后 10周 ,IgG1在免疫后 14～ 16周 ,IgG2a在免疫后 4周和IgG2b在免疫后 16周达最高水平 ,未能测到CAg ;静脉注射组IgG在免疫后 10周 ,IgG1和IgG2a在免疫后 8周以及IgG2b在免疫后 16周达最高水平 ,CAg在免疫后 14周升高。结论 日本血吸虫重组BCG Sj2 6GST疫苗能诱导宿主产生高水平的IgG、IgG2a和IgG2b 。

血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗接种BALB/c鼠后肝脏病理学变化

血吸虫重组 BCG- Sj2 6 GST疫苗是一种新型疫苗。本文用 10 6克隆形成单位 ( Colony- froming unit,CFU)和10 8CFU疫苗皮下接种 BAL B/ c鼠 ,接种后 8wk用日本血吸虫尾蚴进行攻击感染 ,感染后 6 wk剖杀小鼠 ,分离肝脏 ,观察其病理学变化 ,同时设 PBS对照组。光镜下观察发现肝脏病变明显减轻 ,肉芽肿数目少 ,体积小 ;电镜观察发现肝组织病变轻微 ,大部分肝细胞变性 ,肝纤维组织增生 ,有嗜酸粒细胞和淋巴细胞浸润。这些结果为阐明血吸虫重组 BCG- Sj2 6

日本血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗诱导小鼠脾细胞TNF-α和IL-1变化的研究

目的 研究日本血吸虫重组 BCG- Sj2 6 GST疫苗对小鼠脾细胞产生 TNF-α和 IL - 1的影响。方法 实验 1分别采用 10 6 CFU和 10 8CFU疫苗皮下免疫 BAL B/C鼠 ,免疫后 8w用日本血吸虫尾蚴进行攻击感染 ,感染后 6 w剖杀小鼠 ,同时设有 PBS对照组。实验 2用 10 6 CFU疫苗皮下和静脉注射分别免疫小鼠 ,于免疫后 0、4、8、10、14和 16 w各剖杀 4只 ,分离脾脏 ,用 Sj2 6或丝裂原刺激脾细胞 ,用 EL ISA法检测脾细胞上清液中 TNF-α水平 ,用成纤维细胞增殖法检测 IL - 1的生物活性。结果 疫苗免疫 ,尾蚴攻击后 ,TNF-α和 IL - 1水平显著升高。动态观察发现皮下注射组 TNF-α和 IL - 1于免疫后 4～ 8w达最高水平 ;静脉注射组 TNF-α和 IL - 1分别于免疫后 16 w和 4～ 8w达较高水平。结论 日本血吸虫重组 BCG- Sj2 6 GST疫苗促进小鼠脾细胞较早分泌 TNF-α和IL - 1。

日本血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗免疫小鼠后IgG及其亚类和CAg的动态观察

目的 检测日本血吸虫重组BCG Sj2 6GST疫苗免疫小鼠不同时间后的血清IgG及其亚类和CAg反应。 方法 10 6CFU疫苗皮下和静脉注射免疫BALB/C鼠 ,分别于免疫后 0、4、8、10、14、16周各剖杀 4只 ,收集血清 ,常规ELISA法检测IgG及其亚类和CAg。结果 皮下注射组IgG在免疫后 14周 ,IgG1在免疫后 14～ 16周 ,IgG2a在免疫后 4周和IgG2b在免疫后 16周达最高水平 ,未能测到CAg ;静脉注射组IgG在免疫后 10周 ,IgG1和IgG2a在免疫后 8周以及IgG 2b在免疫后 16周达最高水平 ,CAg在免疫后 10周升高。结论 日本血吸虫重组BCG Sj2 6GST疫苗能诱导宿主产生高水平的IgG、IgG2a和IgG2b,静脉注射的免疫效果优于皮下注射。

多糖佐剂FQ_2对日本血吸虫rBCG-Sj26GST疫苗增效作用及其机理的初步探讨

为探讨多糖佐剂FQ2 对血吸虫疫苗保护性免疫力的增效作用及其机理 ,采用 1 0 8CFU日本血吸虫重组BCG -Sj2 6GST疫苗分别与 5 %、1 0 %、2 0 %浓度的佐剂FQ2 混匀皮下接种BALB/c小鼠 ,同时设对照组。接种后第 8W以日本血吸虫尾蚴攻击感染 ,感染后 6W剖杀小鼠 ,计算减虫率 ,测定血清中特异抗体水平和胸腺T淋巴细胞及其亚群。结果实验组获得了 33 49% - 4 0 50 %的减虫率 ,与对照组相比 ,胸腺细胞总数、胸腺活性细胞率、CD8+ 细胞率、CD4 + 细胞率均显著升高 ,尤其是疫苗 +1 0 %佐剂 ,疫苗 +2 0 %佐剂组差别有非常显著意义 (P <0 0 1 )。而各实验组IgG抗体水平无统计学差别。提示多糖佐剂FQ2 对日本血吸虫rBCG -Sj2 6GST疫苗有一定的增效作用 。

血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗接种后保护力的观察

为了探讨血吸虫重组ＢＣＧ－Ｓｊ２６ＧＳＴ疫苗免疫鼠后对尾蚴攻击感染的保护性作用，采用１０６ＣＦＵ和１０８ＣＦＵ重组ＢＣＧ－Ｓｊ２６ＧＳＴ疫苗皮下接种ＢＡＬＢ／Ｃ鼠，接种后８周用日本血吸虫尾蚴进行攻击感染，感染后６周剖杀小鼠，计算减虫率、减卵率，同时进行虫卵肉芽肿周长和面积测量，以及抗体水平和抗原水平测定，同时设有ＰＢＳ对照组。结果表明重组ＢＣＧ－Ｓｊ２６ＧＳＴ疫苗免疫小鼠后，１０６ＣＦＵ、１０８ＣＦＵ组与对照组相比，减虫率分别为２７．３４％、１６．６４％，减卵率分别为５５．７５％、６０．５０％，虫卵肉芽肿的平均周长和平均面积、免疫后血清抗体水平差别均具有非常显著意义；１０８ＣＦＵ与１０６ＣＦＵ组相比，血清抗原水平差别具有显著意义，说明血吸虫重组ＢＣＧ－Ｓｊ２６ＧＳＴ疫苗是一种比较理想的新型疫苗。

日本血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗免疫小鼠后IgG抗体反应的动态观察

目的：检测日本血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗免疫小鼠不同时间后的IgG抗体。方法：将106CFU疫苗采用皮下和静脉注射分别免疫BABL/C鼠，分别于免疫后0、4、8、10、14和16周各剖杀4只，收集血清，常规ELISA法检测IgG抗体，同时设PBS皮下注射对照组。结果：皮下注射组和静脉注射组IgG抗体水平都于免疫后4周显著增加，免疫后10周达最高水平，并持续在较高水平至免疫后16周。疫苗免疫后10周静脉注射组的抗体水平显著高于皮下注射组。结论：日本血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗静脉注射免疫效果优于皮下注射。

日本血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗免疫小鼠血清IgG动态观察及免疫保护力的研究

为检测血吸虫重组 BCG- Sj2 6 GST疫苗免疫小鼠血清 Ig G动态变化和免疫保护力 ,采用 10 6 CFU疫苗皮下 1次和 3次接种小鼠 ,接种后 8周用日本血吸虫尾蚴攻击感染。感染后 6周剖杀小鼠 ,计算减虫率和减卵率 ,同时设有 BCG对照组。结果发现 :实验组免疫后血清 Ig G抗体迅速升高并持续于高水平 ;减虫率分别为 39.74%和 39.74% ,减卵率分别为 6 2 .86 %和 5 5 .6 2 % ,与对照组相比均有非常显著的差异 (P<0 .0 1)。而免疫 3次和免疫 1次小鼠血清 Ig G抗体水平及减虫率、减卵率均无显著差异。血吸虫重组 BCG- Sj2 6 GST疫苗皮下注射 1次即能诱导小鼠较高水平的 Ig G抗体和免疫保护力 ,是一种比较理想的新型疫苗 。

日本血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗诱导小鼠脾细胞IL-6变化的研究

目的： 研究日本血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗对小鼠脾细胞IL-6的影响。方法：实验1采用该疫苗皮下免疫小鼠，免疫后8周用日本血吸虫尾蚴进行攻击感染，感染后6周剖杀小鼠，同时设有PBS对照组。实验2用该疫苗皮下和静脉注射分别免疫小鼠，于免疫后0、4、8、10、14和16周各剖杀4只，分离脾脏，用Sj26或PHA刺激脾细胞，用ELISA法检测脾细胞上清液中IL-6含量。结果：疫苗免疫,尾蚴攻击后，IL-6水平无明显变化；动态观察发现IL-6于疫苗免疫后8～10周达最高水平。结论：IL-6可能与日本血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗诱导的保护性免疫力无关。

日本血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗诱导小鼠血清IgG及其亚类免疫应答的研究

目的 研究日本血吸虫重组 BCG- Sj2 6 GST疫苗接种小鼠 ,尾蚴攻击后诱导的血清 Ig G及其亚类变化。方法 采用 10 6 CFU和 10 8CFU疫苗皮下接种 BAL B/ C鼠 ,接种后 8周用日本血吸虫尾蚴进行攻击感染 ,感染后 6周扑杀小鼠 ,收集血清 ,用常规 EL ISA法检测 Ig G及其亚类。结果 疫苗免疫后 8周血清 Ig G水平明显升高 ;疫苗免疫 ,尾蚴攻击后 6周血清 Ig G2 a显著增加 ,但 Ig G1 和Ig G2 b无明显变化。结论 日本血吸虫重组 BCG- Sj2 6 GST疫苗可能诱导宿主产生高水平的 Ig G和Ig G2 a。

分枝杆菌重组疫苗rBCG-Sj26 GST对小鼠的保护作用

为了研究分枝杆菌重组疫苗rBCG Sj26GST对小鼠的保护作用,用分枝杆菌重组疫苗rBCG Sj26GST免疫雄性BALB/c,结核杆菌H37Ra进行攻击,检测小鼠淋巴细胞刺激指数(SI),腹腔巨噬细胞培养上清释放NO量,小鼠血清IFN γ、IL 2的含量,并计数小鼠肝、肺活细菌数.rBCG Sj26GST疫苗免疫的小鼠,其脾淋巴细胞刺激指数(SI)为4.12±1.11,与对照组(2.63±0.47)、载体组(1.06±0.08)和BCG组(1.50±0.41)相比,差异具有显著意义(P<0.05);rBCG Sj26GST组巨噬细胞释放的NO量明显高于对照组(P<0.05).小鼠血清IFN γ的浓度较对照组高33%,但差异无显著意义(P>0.05);与载体组相比,差异具有显著意义(P<0.05).血清白介素 2的浓度较对照组高43%,较载体组高38%,但差异无显著意义(P>0.05).经rBCG Sj26GST免疫的小鼠受结核杆菌攻击后其肺、肝脏结核菌数较对照组少.分枝杆菌重组疫苗rBCG Sj26GST免疫小鼠后能提高小鼠淋巴细胞刺激指数,刺激IFN γ、IL 2的分泌,说明此疫苗能诱导CD+4Th1和CD+8CTL的细胞免疫反应,增强小鼠细胞免疫功能,并使小鼠能抵抗结核杆菌的攻击.

重组日本血吸虫26kDa GST抗原诱导水牛产生抗体及减少排卵的初步观察

目的 观察rSjc2 6GST抗原诱导水牛产生特异性抗体水平以及排卵数量的减少。 方法 2 0头水牛随机分为两组 ,每组 1 0头。试验组免疫rSjc2 6GST抗原 ,对照组注射佐剂 ,攻击感染日本血吸虫尾蚴后 ,定期检测抗rSjc2 6GST抗体、粪检虫卵和毛蚴。 结果 水牛免疫rSjc2 6GST抗原后 1个月 ,产生抗rSjc2 6GST抗体 ,至 1 2个月一直维持较高水平。试验组水牛感染后 50～ 90d,粪便EPG和MPG几何均值明显低于对照组 ,但在 1 0 0d以后两组的EPG和MPG均逐渐降低 ,至 330d均为 0。结论 水牛免疫rSjc2 6GST抗原后能产生特异性抗体 ,维持较高水平至 1 2个月 ,在感染后 3个月内有显著的减卵效果 。

日本血吸虫中国大陆株 26kDa基因重组蛋白(rSjc26GST)对宿主肝肉芽肿形成的影响

目的探讨日本血吸虫中国大陆株２６ｋＤａ基因重组蛋白对宿主肝虫卵肉芽肿形成的影响。方法将 ＩＣＲ雄性小鼠分成 ２组，１组经 ｒＳｊｃ２６ＧＳＴ免疫，另 １组为对照。免疫结束后第 ５天，２组小鼠均感染日本血吸虫尾蚴 ４０条±１条／鼠，于 ６周后剖杀，取肝组织进行观察。结果免疫组与对照组肝表面虫卵结节数分别为５．６９±１．１９和２０．４７±１．８３，前者比后者减少７２．２０％；肝肉芽肿平均直径免疫组为 １４０．００ μｍ±３８．２４ μｍ，与对照组２４５．７２ μｍ±３２．７３ μｍ相比，减少４３．０２％；同时免疫组小鼠体内特异性抗ｒＳｊｃ２６ＧＳＴ抗体水平明显高于对照组。结论ｒＳｊｃ２６ＧＳＴ对日本血吸虫具有明显的抗病效果。

金标抗rSjc26GST多克隆抗体斑点免疫金渗滤法检测血吸虫循环抗原的研究

目的 探索一种简捷的检测血吸虫循环抗原的方法。方法 应用抗日本血吸虫重组谷胱甘肽 - S-转移酶 (r Sjc2 6 GST)的多克隆抗体标记胶体金 ,建立检测日本血吸虫病患者血清循环抗原的双抗体夹心斑点免疫金渗滤法 (S- DIGFA) ,并以 S- EL ISA作对比。结果 用 S- DIGFA和 S- EL ISA平行检测 95例慢性血吸虫病患者 ,阳性检出率分别为 81.0 5 %和 82 .11% ;正常人血清 180份 ,两者的假阳性率分别为 6 .6 7%和 7.78%。结论 经统计分析证明 S- DIGFA的敏感性和特异性与 S-EL ISA相近 ,且方法更简便快速 ,适合于基层应用。并表明 r Sjc2 6 GST抗原具有诊断血吸虫病的应用价值。

日本血吸虫(中国大陆株)线粒体相关的重组融合蛋白(rSj338/26GST)的免疫原性鉴定

目的 鉴定纯化的重组日本血吸虫线粒体相关融合蛋白 (r Sj3 3 8/2 6GST)的免疫原性。方法 对已构建的阳性表达菌 p GEX-6p-1/Sj3 3 8进行大量诱导表达 ,并对纯化蛋白进行活性分析。将粗提包涵体蛋白、复性包涵体蛋白、经分子筛纯化并复性的蛋白分别免疫新西兰家兔 2只。用 West-ern blot及 Dot-EL ISA方法检测特异性抗体的免疫原性及各组抗体水平。结果 用分子筛纯化的融合蛋白 r Sj3 3 8/2 6GST经 SDS-PAGE电泳鉴定显示达电泳纯 ;Western blot显示纯化蛋白能够被日本血吸虫重感染兔血清及 r Sj3 3 8/2 6GST免疫兔血清识别。Dot-ELISA法检测结果表明 ,经分子筛纯化并复性的 r Sj3 3 8/2 6GST融合蛋白免疫兔血清中特异性抗体的滴度最高 ,为 1∶ 5 12 0 0。结论 纯化后的融合蛋白 r Sj3 3 8/2 6GST具有较高的纯度及较强的免疫活性 ,可望作为日本血吸虫病疫苗候选分子 。