碱性磷酸酶组化染色在克罗恩病诊断中的价值

目的探讨碱性磷酸酶组化染色在克罗恩病（CD）诊断中的价值。方法应用BCIP/NBT组化染色检测手术切除的15例克罗恩病和10例溃疡性结肠炎中碱性磷酸酶活性表达水平。结果15例克罗恩病中未受损的肠黏膜表面刷状缘呈紫蓝色BCIP/NBT为（＋）,而10例溃疡性结肠炎BCIP/NBT均（-）。结论BCIP/NBT组化染色对诊断克罗恩病具有一定的价值。肠黏膜活检中HE常规染色结合BCIP/NBT组化染色可提高CD的诊断正确率。

双重免疫组化染色法的操作体会

双重染色法是在同一张切片上为显示两种不同目的物质而采用的两种相同或不同染色的方法,如免疫组化和免疫组化;免疫组化和原位杂交;免疫组化和特殊染色[1];DNA染色和免疫组化[2]等.其中双重免疫组化染色是在一张组织切片上同时进行或先后显示两种抗原成分.

两种显示大鼠不同组织微血管方法的比较

目的比较CD34免疫组织化学法和硝基四氮唑蓝/5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸盐(NBT/BCIP)酶组织化学法显示不同组织微血管的特性。方法选取大鼠小肠、肾、脾、肝、心、肺和皮肤等7种组织,通过形态学分析和显微计数,分析上述两种方法的区别。结果CD34免疫组织化学法对所取各器官组织内微血管均能显示,NBT/BCIP酶组织化学法能显示心、肠、肾、肝组织内微血管,而不能显示皮肤、脾和肺组织内微血管;对同一组织同一切面,CD34免疫组织化学法显示微血管密度显著性低于NBT/BCIP酶组织化学法。结论CD34免疫组织化学法适于各种组织内微血管的显示,而NBT/BCIP酶组织化学法能够更大密度地显示部分器官组织内的微血管。

HRP和AP呈现束缚-浸水应激大鼠NTS儿茶酚胺能神经元Fos表达的效果比较

用辣根过氧化物酶(HRP)单酶先后标记Fos和酪氨酸羟化酶(TH),用二氨基联苯胺(DAB)增强剂和DAB分别呈色;以及同时用碱性磷酸酶(AP)和HRP双酶分别标记TH和Fos,再分别用5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸盐(BCIP)和氯化硝基四氮唑蓝(NBT)对TH和DAB对Fos呈色,比较免疫双标时两种不同酶标记显色方法对研究大鼠孤束核(NTS)内儿茶酚胺能神经元在束缚-浸水应激中作用效果的影响.两种显色方法的免疫阳性神经元都清晰易辩,结果应激组NTS内Fos,TH及Fos/TH双标阳性神经元数目均显著增加.但HRP单酶双底物显色系统耗时长、非特异性着色强,在抗体种属来源不同时可优先考虑使用HRP/AP双酶双底物显色.

BCIP/NBT比色法测定碱性磷酸酶活力

以５－溴－４－氯－３－吲哚磷酸盐和氯化硝基四氮唑蓝为底物，建立ＡＬＰ活力比色测定法。线性下限０．２Ｕ／Ｌ（皮－劳法）；两份标本ＣＶ值批内为１．０７％和１．５９％，批间为４．１３％和４．３８％；与皮－劳法（连续监测法）结果比较，相关系数为０．９９２。结果表明，此法简便、可靠、灵敏。

碱性磷酸酶组化染色在炎症性肠病鉴别诊断中的价值

目的探讨碱性磷酸酶组化染色在炎症性肠病鉴别诊断中的价值。方法应用BCIP/NBT组化染色检测34例克罗恩病(CD组)、36例溃疡性结肠炎(UC组)及15例非炎症性肠病(NIBD组,包括12例肠结核、2例细菌性肠道感染和1例缺血性结肠炎)肠黏膜中肠碱性磷酸酶表达水平。结果 CD组碱性磷酸酶组化染色阳性率显著高于UC组和NIBD组(85.29%vs.5.56%和0)(P<0.05)。碱性磷酸酶组化染色诊断CD的敏感性为93.55%,特异性为90.74%,阳性预测率为85.29%,阴性预测率为96.08%;其与CD病变部位、是否伴有肛周病变、活动度及病变类型无明显相关性(P>0.05)。结论碱性磷酸酶BCIP/NBT组化染色可以作为CD诊断的一个辅助指标。