FDA调查接受靶向BCMA或CD19的自体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫治疗后发生T细胞恶性肿瘤的严重风险

美国食品药品监督管理局(FDA)发布消息,已收到接受靶向BCMA或CD19的自体CAR-T细胞免疫治疗后患者出现T细胞恶性肿瘤(包括嵌合抗原受体CAR阳性淋巴瘤)的报告。这些报告来自临床试验和/或上市后不良事件(AE)。FDA已确定,T细胞恶性肿瘤的风险适用于目前批准的所有经基因修饰的靶向BCMA和靶向CD19的自体CAR-T细胞免疫疗法。接受过多种同类产品治疗的患者发生了T细胞恶性肿瘤。

美国FDA向靶向BCMA或CD19的自体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫治疗类产品相关企业发送标签安全性内容变更通知函

美国食品药品管理局(FDA)发函要求企业修改靶向BCMA或CD19的自体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫治疗类产品标签的安全性内容,增加继发性恶性肿瘤相关风险提示。此类产品标签信息应包含以下内容:1.黑框警告,处方信息要点接受靶向BCMA或CD19的自体CAR-T细胞免疫治疗后出现了T细胞恶性肿瘤。

FDA调查接受靶向BCMA或CD19的自体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫治疗后发生T细胞恶性肿瘤的严重风险

美国食品药品管理局(FDA)发布消息,已收到接受靶向BCMA或CD19的自体CAR-T细胞免疫治疗后患者出现T细胞恶性肿瘤(包括嵌合抗原受体CAR阳性淋巴瘤)的报告。这些报告来自临床试验和/或上市后不良事件(AE)。

美国FDA向靶向BCMA或CD19的自体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫治疗类产品相关企业发送标签安全性内容变更通知函

美国食品药品管理局(FDA)发函要求企业修改靶向BCMA或CD19的自体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫治疗类产品标签的安全性内容,增加继发性恶性肿瘤相关风险提示。此类产品标签信息应包含以下内容:1.黑框警告,处方信息要点接受靶向BCMA或CD19的自体CAR-T细胞免疫治疗后出现了T细胞恶性肿瘤。2.黑框警告,处方信息接受靶向BCMA或CD19的自体CAR-T细胞免疫治疗后出现了T细胞恶性肿瘤。[见警告与注意事项]3.警告与注意事项-继发性恶性肿瘤,处方信息要点继发性恶性肿瘤:接受靶向BCMA或CD19的自体CAR-T细胞免疫治疗后出现了T细胞恶性肿瘤。

美国FDA向靶向BCMA或CD19的自体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫治疗类产品相关企业发送标签安全性内容变更通知函

美国食品药品管理局(FDA)发函要求企业修改靶向BCMA或CD19的自体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫治疗类产品标签的安全性内容,增加继发性恶性肿瘤相关风险提示。此类产品标签信息应包含以下内容:1.黑框警告,处方信息要点:接受靶向BCMA或CD19的自体CAR-T细胞免疫治疗后出现了T细胞恶性肿瘤。

靶向BCMA或CD19的CAR-T细胞免疫治疗后发生T细胞恶性肿瘤的风险

近日,美国食品药品管理局(FDA)发布消息,已收到接受靶向B细胞成熟抗原(BCMA)或抗白细胞分化抗原19(CD19)的自体嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞免疫治疗后出现T细胞恶性肿瘤(包括CAR阳性淋巴瘤)的病例报告。这些报告来自临床试验和/或上市后不良事件(AE)。

FDA调查接受靶向BCMA或CD19的自体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫治疗后发生T细胞恶性肿瘤的严重风险

美国食品药品管理局(FDA)发布消息,已收到接受靶向BCMA或CD19的自体CAR-T细胞免疫治疗后患者出现T细胞恶性肿瘤(包括嵌合抗原受体CAR阳性淋巴瘤)的报告。这些报告来自临床试验和/或上市后不良事件(AE)。

基于BCMA突变体构建BCMA CAR-T细胞体外杀伤功能评价模型

目的:为解决野生型B细胞成熟抗原(BCMA)被γ分泌酶切割导致表达不稳定的问题,构建抵抗γ分泌酶切割的BCMA突变体并构建靶细胞,用于评价BCMA CAR-T细胞的杀伤功能。方法:将野生型BCMA的穿膜域替换为人CD8α穿膜域,构建抵抗γ分泌酶切割的BCMA突变体(BCMA-CD8αTM),构建过表达该突变体的U266(U266^(BCMA Mut))、K562(K562^(BCMA Mut))、SKOV3(SKOV3^(BCMA Mut))和CHO(CHO^(BCMA Mut))细胞;构建装载NFAT-EGFP报告基因的BCMA CAR Jurkat细胞(BCMA-CAR-Jurkat-Reporter)与U266^(BCMA Mut)细胞共培养,采用FCM检测该细胞中EGFP表达水平以指示NFAT激活水平,荧光素酶法检测BCMA CAR-T细胞对Luciferase标记的K562^(BCMA Mut)细胞的杀伤作用,实时无标记动态细胞分析技术(RTCA)检测BCMA CAR-T细胞对SKOV3^(BCMA Mut)和CHO^(BCMA Mut)细胞的杀伤作用。结果:应用γ分泌酶抑制剂LY411575抑制γ分泌酶活性,显著增强野生型U266细胞表面BCMA表达水平,平均荧光强度上调10倍以上;但撤除抑制剂后BCMA表达水平逐渐降低(P<0.01);BCMA-CD8αTM突变体可抵抗γ分泌酶的切割作用,在U266细胞表面稳定表达(P>0.05);U266细胞及过表达BCMA-CD8αTM的U266细胞与BCMA-CAR-Jurkat-Reporter细胞共培养后都可激活Reporter系统、增强EGFP表达,但该效应在BCMA-CD8αTM过表达的U266细胞中更显著(P<0.01);BCMA-CD8αTM在BCMA表达阴性的K562、SKOV3和CHO 3种靶细胞中成功过表达,且在LY411575处理下该突变体的表达水平仅有小幅度升高;荧光素酶法检测结果显示,不同效靶比下,BCMA CAR-T细胞均可特异、高效杀伤过表达BCMA-CD8αTM的K562细胞;RTCA结果显示,不同效靶比下,BCMA CAR-T细胞均可有效识别、杀伤过表达BCMACD8αTM的SKOV3和CHO细胞,但同等效靶比下的Mock-T细胞无此效应。结论:本实验构建的BCMA-CD8αTM突变体能够抵抗γ分泌酶的切割,在多种靶细胞表面稳定表达,为评价BCMA CAR-T细胞体外杀伤的有效性和特异性提供多种检测手段。

BCMA CAR-T细胞调节骨髓瘤长期免疫应答的研究进展

多发性骨髓瘤是一种异质性的血液肿瘤疾病,在骨髓微环境中,浆细胞恶性增殖导致的肿瘤免疫逃逸和累积的基因组畸变推动了疾病的进展,进展中损伤的免疫功能易使疾病复发。然而,近年来靶向B细胞成熟抗原(BCMA)的嵌合抗原受体T细胞疗法使骨髓瘤症状产生持久且深度的缓解,复发/难治性骨髓瘤的治疗取得了突破性进步。因此,本文综述了BCMA CAR-T治疗复发/难治性骨髓瘤的最新研究进展,为进一步恢复患者抗肿瘤免疫能力及形成长期免疫应答提供参考。

FDA调查接受靶向BCMA或CD19的自体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫治疗后发生T细胞恶性肿瘤的严重风险

免疫治疗后发生T细胞恶性肿瘤的严重风险美国食品药品管理局(FDA)发布消息,已收到接受靶向BCMA或CD19的自体CAR-T细胞免疫治疗后患者出现T细胞恶性肿瘤(包括嵌合抗原受体CAR阳性淋巴瘤)的报告。这些报告来自临床试验和/或上市后不良事件(AE)。FDA已确定,T细胞恶性肿瘤的风险适用于目前批准的所有经基因修饰的靶向BCMA和靶向CD19的自体CAR-T细胞免疫疗法。接受过多种同类产品治疗的患者发生了T细胞恶性肿瘤。

BCMA基因5′上游序列生物信息学分析

目的对BCMA基因5′上游序列进行生物信息学分析,获取基因调控的相关因素。方法从Genebank获取BCMA基因及其上游序列,利用Transfac 6.0等软件分析转录因子调控信息。结果BCMA基因5′上游序列无典型的TATA和CAAT盒,存在oct-1、cdxA、c-myb等数个高度保守的潜在转录因子结合位点,存在2个可能的转录因子Blimp-1结合序列。结论BC-MA在调控B细胞增殖、分化中可能起着重要作用,转录因子Blimp-1可能调控BCMA基因的表达。

计算机辅助设计可溶性BLyS受体,eBCMA-Fc融合蛋白及其在大肠杆菌中的表达(英文)

B细胞成熟抗原(BCMA)是B淋巴细胞刺激因子(BLyS)的受体之一.它的胞外区与人IgG1Fc的融合蛋白eBCMA-Fc,又称为诱饵受体,具有拮抗BLyS的活性.为了设计新的拮抗肽,基于BCMA和Fc的晶体结构,通过计算机图形学技术、分子模拟方法,建立了eBCMA-Fc融合蛋白的三维理论结构.利用均方根位移(root mean square distance,RMSD)对eBCMA-Fc融合蛋白与单体eBCMA、Fc构象差异进行分析.融合蛋白eBCMA-Fc中的eBCMA段与单体eBCMA的主链碳原子间RMSD值为0.036nm,Fc段与单体Fc的主链碳原子间RMSD值为0.064nm.结果表明,对比单体,融合蛋白eBCMA-Fc并未因eBCMA与Fc直接连接而发生构象的变化.分子对接方法显示,融合蛋白eBCMA-Fc中的BCMA与BLyS作用,而Fc扮演着稳定BCMA构象的支架作用.为进一步验证上述理论分析,构建eBCMA-Fc融合基因,并将载有eBCMA-Fc融合基因的原核表达质粒转化BL21(DE3)菌、在细菌中表达.目的蛋白经蛋白A亲和柱纯化大约为36kD,与理论预测值34kD相近.免疫印迹表明抗人IgG抗体能够识别eBCMA-Fc融合蛋白.ELISA证实,eBCMA-Fc融合蛋白能够结合BLyS.随着eBCMA-Fc融合蛋白增加,结合BLyS的融合蛋白也相应增加.而对照人IgG,即使在高浓度条件下,也不结合BLyS.此外,eBCMA-Fc融合蛋白能够抑制BLyS对B细胞肿瘤Daudi细胞的作用.这些研究为下一步设计和筛选BLyS拮抗肽提供了实验基础.

小鼠BCMA基因启动子活性研究

目的:探索B淋巴细胞成熟抗原(BCMA)基因5′上游序列的启动子活性,为进一步研究BCMA基因的表达调控机制提供实验依据。方法:构建由BCMA基因5′上游-820^+145、-607^+145、-359^+145、-157^+145、-93^+145 5个片段驱动的荧光素酶报告载体pGL3-B820、pGL3-B607、pGL3-B359、pGL3-B157、pGL3-B93,通过转染J558L、293T、HeLa细胞检测荧光素酶的表达,观察荧光素酶相对活性。结果:5种5′删除体的转录激活性由大到小为pGL3-B157>pGL3-B607>pGL3-B359>pGL3-B93>pGL3-B820。pGL3-B157在3种细胞中的转录激活能力为J558L>HeLa>293T,且在J558L中的转录激活能力明显强于Hela和293T细胞。结论:BCMA基因5′上游序列"-820bp^+145bp"具有启动子活性,核心启动子可能位于-93^+145区域中。

BCMA基因5'上游序列定点删除突变对启动子活性的影响

目的探索BCMA基因5'上游序列-24～-26位点删除突变对启动子活性的影响,为进一步研究BCMA基因的表达调控机制提供实验依据。方法设计一对突变引物,采用定点删除技术,删除BCMA基因5'上游序列-24～-26位点,电转J558L细胞检测荧光素酶的表达,观察荧光素酶相对活性。结果成功删除BCMA基因-24～-26"AAA",启动子活性明显下降。结论BCMA基因5'上游序列-24～-26位点可能是RNA聚合酶识别的重要位点,也可能为重要转录因子结合位点。

B细胞成熟抗原BCMA在细胞内诱导NF-κB的活化

目的 :研究细胞表面B细胞成熟抗原 (B cellmatu rationantigen ,BCMA)在B细胞激活因子刺激下 ,对转录因子NF κB是否具有激活作用 .方法 :采用电转移基因转染和卤化钙基因转染方法 ,将BCMA和C末端缺失 80个氨基酸残基的BCMA基因 (BCMAΔC80 )分别转染 3T8细胞及kbgfp细胞 ,观察与NF κB启动子下游的报告基因表达水平的变化 .结果 :BCMA在 3T8细胞中经BAFF激活后可上调报告质粒中CD14基因的表达 ,而C末端缺失 80个氨基酸残基的突变BCMA(BCMAΔC80 )则不具备此功能 .同时在另一报告细胞系kbgfp中亦观察到类似作用 .结论 :细胞表面的BCMA在被B细胞激活因子刺激后 ,可引起NF κB的活化 ,这一作用依赖于BCMA的C末端的 80个氨基酸残基 .

BLyS受体TACI、BCMA与人IgG1 Fc融合蛋白在哺乳动物细胞中的表达与鉴定

从人肝脏和肾脏cDNA文库中扩增了人IgG1Fc与B淋巴细胞刺激因子 (BLyS)的受体TACI及BCMA的胞外编码区 ,构建了TACI Fc及BCMA Fc融合表达质粒pSec1 Fc TACI与 pSec1 Fc BCMA ,并使用电穿孔法转染COS 7细胞 ,从 1L无血清培养上清中可纯化得到分泌表达的TACI Fc与BCMA Fc融合蛋白约 2mg。为获得TACI Fc与BCMA Fc的稳定来源 ,构建了TACI Fc与BCMA Fc的CHO稳定表达细胞株。免疫沉淀和ELISA结果显示 ,TACI Fc及BCMA Fc能特异性地结合其配体BLyS而不与BLyS同家族的TNF结合。TACI Fc及BCMA

靶向BCMA的CAR-T细胞治疗衰弱老年复发难治性骨髓瘤病人的临床观察

多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是血液系统常见的恶性肿瘤之一,目前仍不可治愈[1-2]。因此,探索复发难治(refractory/relapsed,R/R)MM病人的治疗方法一直是研究的热点。近几年来,大量的临床研究显示,靶向B细胞成熟抗原(B cell maturation antigen,BCMA)的嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)修饰的T细胞免疫治疗对R/R MM显示出卓越的治疗效果[3-5]。

靶向BCMA CAR-T细胞在复发难治性多发性骨髓瘤中的治疗进展

多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是由骨髓中浆细胞恶性增殖引起的血液系统恶性肿瘤,现临床上多采取化疗、自体干细胞移植、蛋白酶体抑制剂、免疫调节药物及单克隆抗体等方法治疗,但终将复发不可治愈。复发难治性多发性骨髓瘤(relapsed/refractory multiple myeloma,R/R MM)现仍是治疗中的难题。近年来,随着嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cell,CAR-T)技术的发展,靶向BCMA CAR-T治疗作为一种新型的治疗R/R MM的方法,在临床试验中获得了较高的反应率和疗效。本文将对现有的靶向BCMA CAR-T产品的最新研究进行综述。

靶向CD19和BCMA的CAR-NK92MI细胞的构建及抗肿瘤活性研究

目的:探讨嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor, CAR)结构对CAR-NK细胞特异性杀伤能力的增强情况。方法:利用逆转录病毒载体分别构建出稳定表达靶向B细胞成熟抗原(B cell maturation antigen, BCMA)与分化群抗原19(cluster of differentiation 19,CD19)CAR的CAR-NK92MI细胞,随后使用流式细胞术检测经MYC-PE抗体染色的CAR-NK细胞的CAR阳性率。采用荧光素酶检测法、IncuCyte实时动态细胞成像分析系统、流式细胞术检测两种CAR-NK92MI细胞与只表达CD19或者只表达BCMA的肿瘤细胞共孵育一定时间后肿瘤细胞的凋亡情况。结果:成功构建出稳定高表达CAR的ANTI-CD19-CAR-NK92MI细胞系和ANTI-BCMA-CAR-NK92MI细胞系。体外杀伤实验结果显示,相比表达BCMA的肿瘤细胞,ANTI-CD19-CAR-NK92MI细胞对表达CD19的肿瘤细胞具有更高的杀伤活性;而相比表达CD19的肿瘤细胞,ANTI-BCMA-CAR-NK92MI细胞对表达BCMA的肿瘤细胞具有更高的杀伤活性。结论:CAR结构可以显著增强CAR-NK细胞的特异性杀伤能力。

Observation of liver indexes in patients with relapsed/refractory multiple myeloma treated with CAR-T-cells based on BCMA

Objective To observe the characteristics of the evolution of liver indexes in patients with relapsed/refractory multiple myeloma (RRMM) treated with CART-cells based on BCMA.Methods Retrospective analysis was performed on patients with RRMM who received an infusion of anti-BCMA CAR-T-cells and anti-BCMA combined with anti-CD 19 CAR-T-cells at our center between June 1,2019,and February 28,2023.