BCMA-Fc-Myc融合蛋白的构建、表达及活性鉴定

目的:旨在可溶性BAFF受体末端加上myc标签,构建BCMA-Fc-myc,用于竞争ELISA分析BAFF拮抗肽-Fc同BCMA-Fc-myc与BAFF的竞争性结合能力。方法:通过PCR法获得BCMA-Fc-Myc基因,进而构建重组子pET28a-BCMA-Fc-Myc,转入E.coli BL21(DE3)中进行融合蛋白的表达。采用蛋白A凝胶亲和柱进行纯化以及ELISA法检测其生物活性。结果:成功获得了BCMA-Fc-Myc重组基因和pET28a-BCMA-Fc-Myc重组子。并表达和纯化得该融合蛋白,且其能够与BAFF特异性结合。结合活力呈现剂量依赖性,浓度50ng/μl时,两者的吸附达饱和。结论:此研究表达的BCMA-Fc-Myc融合蛋白具有结合BAFF的生物活性,可作为其他融合蛋白竞争性ELISA的对照蛋白,为用于筛选BAFF拮抗肽的竞争ELISA实验平台。