BCOR突变通过PI3K/Akt/mTOR通路介导MDS细胞生物学行为改变的机制研究

目的 探讨BCOR(BCL6 co-repressor)基因突变介导骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndromes, MDS)细胞生物学行为的分子机制。方法 通过构建BCORP483L过表达慢病毒以及空载体病毒,转染K562细胞,采用集落形成实验检测BCOR突变对细胞克隆形成能力的影响,流式细胞术检测细胞凋亡、细胞周期,Western blot法和实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)方法检测细胞焦亡和PI3K/Akt/mTOR通路分子水平,采用转录组测序技术(RNA-sequencing, RNA-Seq)检测分析BCORP483L突变对下游靶基因表达的影响。结果 BCORP483L突变显著地抑制细胞克隆形成能力,促进细胞凋亡,并导致细胞周期阻滞和细胞焦亡水平增加。RNA-Seq分析发现,BCORP483L突变后K562内与细胞凋亡、G2M周期检查点、慢性髓系白血病、细胞衰老、细胞内炎性反应相关的基因以及原癌基因MYC目标基因表达上调。Western blot法实验进一步证实,BCORP483L突变细胞的PI3K/Akt/mTOR通路明显受到抑制。结论 BCOR突变导致细胞PI3K/Akt/mTOR通路受到抑制,进而导致细胞凋亡增加、增殖受抑。BCOR突变能通过上调细胞衰老相关基因以及原癌基因MYC目标基因表达,提高细胞内炎性反应水平,从而促进MDS疾病进展。

伴BCOR/BCORL1基因突变骨髓增生异常综合征患者的临床特征及预后意义

目的:探讨伴BCOR/BCORL1基因突变骨髓增生异常综合征(MDS)患者的临床特征及BCOR/BCORL1基因突变对MDS患者的预后意义。方法:回顾性分析2015年9月至2019年9月在新疆维吾尔自治区人民医院确诊的135例初治MDS患者的临床资料,采用二代测序对34种髓系肿瘤相关基因进行检测,分析BCOR/BCORL1基因突变MDS患者的临床特征及BCOR/BCORL1基因突变对MDS患者无进展生存(PFS)时间和总生存(OS)时间的影响。结果:MDS患者中检出BCOR/BCORL1基因突变34例(25.2%),其中BCOR突变16例(11.9%),BCORL1突变18例(13.3%)。与未突变组相比,BCOR/BCORL1突变更多见于女性,且中性粒细胞计数偏低[0.75(0.08-22.20)vs 1.27(0.06-35.71)×10^9/L,P=0.047]。不同IPSS-R分组各亚组之间及较低危组和较高危组之间、不同遗传学分组之间以及转白组与未转白组MDS患者之间BCOR/BCORL1基因的突变率差异均无统计学意义(P=0.725,P=0.713,P=0.273,P=0.165)。BCOR/BCORL1基因突变与DNMT3A、NF1、STAG2、U2AF1、EZH2基因突变相关(P=0.003,P=0.007,P=0.000,P=0.004,P=0.024)。而与无BCOR/BCORL1突变MDS患者相比,BCOR/BCORL1突变患者的中位PFS时间无显著差异(P=0.210),但中位OS时间显著较短[16(3-32)vs 22(0.2-48)个月,P=0.039]。结论:BCOR/BCORL1突变在MDS患者中较多见,且常伴有其他基因共突变。BCOR/BCORL1基因突变与MDS患者疾病进展及转急性髓系白血病(AML)无关,但是预示着较差的总生存。

伴BCOR/BCORL1突变的髓系肿瘤共突变基因表达谱及病理参数分析

目的探讨BCOR/BCORL1突变的髓系肿瘤患者的共突变基因表达谱,分析其病理参数及临床意义。方法回顾性分析2017年1月至2021年8月在上海交通大学附属第一人民医院确诊的47例BCOR/BCORL1突变的髓系肿瘤患者。运用二代测序技术分析患者的基因共突变表达谱,采用两独立样本秩和检验分析BCOR/BCORL1突变患者病理参数之间的差异。通过Kaplan-Meier分析突变位置和治疗方法对患者无病生存(DFS)时间和总生存(OS)时间的影响。结果急性髓系白血病(AML)患者以点突变为主(51.1%),骨髓增生异常综合征(MDS)和MDS/骨髓增殖性肿瘤(MPN)患者以移码突变、错义突变和无义突变为主(19.1%),二者分布差异具有统计学意义(χ^(2)=7.458,P=0.006)。伴代谢酶组突变患者白细胞计数(Z=-3.500,P=0.018)、血小板计数(Z=82.500,P=0.027)、血浆纤维蛋白原(Fib)含量(Z=-0.935,P=0.008)和凝血酶时间(Z=0.800,P=0.027)与野生型患者相比差异均有统计学意义;伴甲基化组突变患者血浆Fib含量(Z=-0.855,P=0.030)、伴信号传导通路组突变患者的白细胞计数(Z=5.500,P=0.019)和转录因子组突变患者凝血酶原时间(Z=-1.600,P=0.008)与野生型患者相比差异有统计学意义。结构域突变患者中位DFS时间明显短于非结构域突变患者(χ^(2)=4.920,P=0.027)。与未移植组患者相比,移植组患者中位DFS时间和中位OS时间显著延长(χ^(2)=7.703,P=0.006;χ^(2)=13.380,P=0.000)。结论BCOR/BCORL1突变的髓系肿瘤患者的共突变基因与白细胞计数、血浆Fib等临床病理参数密切相关。异基因造血干细胞移植可有效改善此类突变患者预后。