BCR/ABL阴性的骨髓增殖性疾病患者JAK2V617F点突变及凝血功能的研究

目的探讨BCR/ABL阴性的骨髓增殖性疾病(Myeloproliferative disorders,MPD)患者的JAK2V617F点突变的突变率,分析其与患者的血液学特征、凝血功能的关系。方法回顾性分析68例BCR/ABL阴性的MPD患者的临床资料,统计实验室各项检测指标及JAK2V617F点突变情况。结果 68例MPD患者中,检出JAK2V617F突变45例,突变率66.18%;其中原发性骨髓纤维化(Primary myelofibrosis,PMF)2例,原发性血小板增多症(Primary thrombocytosis,PT)16例,真性红细胞增多症(Polycythemia vera,PV)27例。与健康对照组比较,不管是否JAK2V617F点突变,MPD患者中PV患者的WBC、TT、Hb及D-D、Fbg均显著升高(均P<0.05);PV患者中JAK2V617F点突变阳性患者的WBC、TT、Hb及D-D、Fbg水平明显高于阴性患者(P<0.05),PLT、APTT及PT差异无统计学意义(P>0.05)。结论 MPD患者发生JAK2V617F基因突变率较高,且阳性突变患者凝血功能及血细胞计数存在明显异常。

IKZF1基因拷贝数异常在儿童BCR/ABL阴性B系急性淋巴细胞白血病中的意义

目的了解BCR/ABL阴性B系急性淋巴细胞白血病（B-ALL）患儿IKZF1基因拷贝数异常情况,并分析IKZF1基因拷贝数异常与该部分患儿预后的相关性。方法应用多重连接探针扩增（MLPA）技术检测180例初诊BCR/ABL阴性B-ALL患儿IKZF1基因拷贝数异常情况。根据有无IKZF1基因缺失将其分成两组：IKZF1缺失组和IKZF1正常组。回顾性分析IKZF1拷贝数缺失与BCR/ABL阴性B-ALL患儿预后的关系。结果 180例患儿中共有27例（15.0%）患儿发生了IKZF1缺失,其中IKZF1基因8个外显子全部缺失者4例,单纯1号外显子缺失者17例,4～7号外显子缺失者3例,2～7号外显子缺失者3例。IKZF1缺失组患儿初诊时白细胞水平及流式MRD-高危组患儿的比例明显高于IKZF1正常组;IKZF1缺失组患儿多发生在无特殊融合基因异常的BCR/ABL阴性患儿,且IKZF1基因缺失患儿易伴随出现11、8、5、7、21号等染色体的异常。Kaplan-Meier法分析显示,IKZF1缺失组无病生存率（DFS）明显低于IKZF1正常组（0.740±0.096 vs 0.905±0.034,P=0.002）。Cox法分析显示在排除了年龄、性别、初始WBC、初诊时脑脊液状态、泼尼松松试验反应情况、染色体核型后,IKZF1缺失仍不利于患儿的DFS（P〈0.05）。结论部分BCR/ABL阴性B-ALL患儿存在IKZF1缺失,IKZF1缺失为BCR/ABL阴性B-ALL患儿DFS的独立危险因素。

BCR/ABL阴性骨髓增殖性肿瘤的临床特征分析

目的分析BCR/ABL阴性骨髓增殖性肿瘤的临床特征。方法选择2014年4月至2018年6月就诊于本院的78例初诊诊断为BCR/ABL阴性骨髓增殖性肿瘤患者,对患者的年龄、性别、疾病分布、首发症状、血常规、血管事件发生率、基因学检测结果等临床资料进行采集和整理。对患者的年龄、性别、疾病分布、症状进行描述性分析;统计患者JAK2V617F基因突变检出情况;比较突变阳性组和突变阴性组患者的WBC计数、Hb水平、PLT计数;统计不同疾病类型患者的血管事件发生率。结果基因突变阳性患者较基因突变阴性患者存在不同程度的白细胞计数、血红蛋白水平和血小板计数增高的现象。真性红细胞增多症、原发性血小板增多症患者的血管事件发生率均明显高于原发性骨髓纤维化,差异有统计学意义(χ2=4.286,5.128;P<0.05)。结论骨髓增殖性疾病以中老年多见,临床发病表现多样。JAK2V617F基因突变在骨髓增殖性疾病中有较高的检出率,与发病类型和血象指标有关。骨髓增殖性疾病的类型与血栓的发生存在一定的关系。

208例BCR/ABL1阴性慢性骨髓增殖性疾病JAK2、CALR、MPL基因突变检测及其诊断价值

目的:检测经典BCR/ABL1阴性慢性骨髓增殖性疾病患者JAK2、CALR、MPL基因突变,探讨其诊断价值。方法:2012年3月至2015年12月208例BCR/ABL1阴性慢性骨髓增殖性疾病患者(ET146例,PV37例,MF25例)纳入BCR/ABL1阴性CMPN组,124例继发性血小板增多及73例继发性红细胞增多症患者纳入对照组。抽取骨髓或静脉血提取基因组DNA及总RNA,进行JAK2基因外显子12至20,MPL基因外显子10以及CALR基因外显子3至9测序分析。结果:146例ET患者中,JAK2V617F突变86例(58.9%);JAK2 exon 12突变2例(1.4%);CALR突变41例(28.1%),其中Ⅰ型(c.1092_1143del)22例,Ⅱ型(c.1154_1155insTTGTC)11例,Ⅴ型(c.1091_1142del)1例,Ⅷ型(c.1104_1137del)1例,41型(c.1107_1137del)1例,42型(c.1125_1125del)1例,其他(c.1107_1115del,c.1111_1144 del,c.1101 A>C,c.1112_1117del)4例;MPL基因突变9例(6.2%)。JAK2、CALR、MPL基因突变均阴性的患者有8例(5.4%)。37例PV中检出JAK2以及CALR突变共35例(94.6%),其中JAK2V617F突变31例(83.8%),JAK2 exon 12突变2例(5.4%);CALR突变2例(5.4%),其中Ⅰ型1例,另1例为CALR c.1191_1193del。JAK2、CALR、MPL突变均阴性2例。25例MF中检出JAK2V617F突变19例(76%),CALR突变2例(8%);JAK2、CALR、MPL突变均阴性的患者有4例(16%)。124例继发性血小板增多的患者以及73例继发性红细胞增多的患者中,均未检测出JAK2、CALR或者MPL基因突变。结论:联合JAK2、CALR、MPL基因突变能覆盖大多数BCR/ABL1阴性的骨髓增殖性疾病患者,CALR突变在ET患者中检出率较高,因此CALR突变可作为JAK2、MPL突变阴性的ET的新诊断指标。

BCR/ABL阴性骨髓增殖性肿瘤骨髓JAK2/V617F和CALR及MPL W515基因突变检测临床意义

目的骨髓增殖性肿瘤(Myeloproliferative neoplasms,MPN)是以骨髓造血干细胞一系或多系过度增殖为特征的恶性肿瘤,根据MPN患者年龄、初诊血常规数据和有无血管事件发生等可将其分为高、中、低危组,且存在基因突变者危险分层较高。本研究旨在探讨BCR/ABL阴性MPN患者JAK2/V617F、CALR及MPL W515基因突变临床特征及对MPN危险分层影响。方法回顾性分析2015-01-01-2018-02-28郑州大学人民医院血液内科收治的179例BCR/ABL阴性MPN患者临床资料,统计各项实验室数据及基因突变情况。采用PCR扩增技术检测患者骨髓JAK2/V617F、CALR及MPL W515突变。非正态分布2组数据比较采用Mann-Whitney U检验,3组数据比较采用Kruskal-Wallis H检验;采用Logistic有序回归分析与疾病高低危险型有关联的危险因素。结果在179例MPN患者中,男78例,女101例,年龄12～81岁,平均年龄(56.04±16.44)岁,中位年龄59岁;JAK2/V617F、CALR及MPL W515突变在41例真性红细胞增多症(polycythemia vera,PV)、106例原发性血小板增多症(essential thombocytosis,ET)和32例原发性骨髓纤维化(primary myelofibrosis,PMF)患者构成上差异有统计学意义,P=0.030。PV患者JAK2/V617F突变阳性者白细胞(Z=-4.269,P<0.001)、血小板(Z=-4.527,P<0.001)和纤维蛋白原(Z=-3.695,P<0.001)水平高于JAK2/V617F突变阴性者,差异有统计学意义。ET患者JAK2/V617F突变阳性患者白细胞(H=19.457,P<0.001)和血红蛋白(H=14.520,P<0.001)水平高于CALR突变阳性及基因突变均阴性者,差异有统计学意义。PMF患者JAK2/V617F突变阳性者白细胞(H=14.994,P=0.002)、血红蛋白(H=9.691,P=0.021)、血小板(H=7.877,P=0.049)和纤维蛋白原(H=8.825,P=0.012)水平高于基因突变均阴性患者,差异有统计学意义。多因素logistic回归分析显示JAK2/V617F基因突变(95%CI:0.128～1.869,P=0.025)与疾病危险分层相关,JAK2/V617F突变阳性者危险分层较高。结论不同MPN亚型基因突变发生频率、分布情况不同,PV患者仅出现JAK2/V617F突变,ET患者CALR突变率高于PV和PMF,MPL W515突变仅存在于PMF患者,且JAK2/V617F基因突变与疾病危险分层相关,JAK2/V617F突变阳性者MPN危险分层较高,但尚需扩大样本量进行验证。