茯苓甘草合剂辅助西药对慢性阻塞性肺疾病合并肌肉衰减患者NF-κB信号通路的影响

目的探讨茯苓甘草合剂辅助西药对慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并肌肉衰减NF-κB信号通路的影响及分子机制。方法选取2020年8月至2022年8月COPD合并肌肉衰减患者104例,作为研究对象随机数字表法分为对照组和观察组,每组52例。对照组给予西药治疗,观察组给予西药+茯苓甘草合剂治疗。统计2组中医疗效、不良反应及治疗前后中医证候积分、NF-κB mRNA、蛋白及因子[白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]、营养状况指标[转铁蛋白(Tf)、血红蛋白(Hb)、白蛋白(ALB)]、肌肉衰减相关指标[握力试验、起立-行走计时测试(TUGT)、5次坐立试验(FTSST)、肌少症筛查问卷(SARC-F)]。结果观察组中医治疗总有效率[86.54%(45/52)]高于对照组[67.31%(35/52)](P<0.05);治疗1个月、3个月后观察组中医证候积分低于对照组(P<0.05);治疗1个月、3个月后观察组NF-κB mRNA、NF-κB蛋白、IL-8、IL-1、TNF-α低于对照组(P<0.05);治疗3个月后观察组握力高于对照组,FTSST、TUGT、SARC-F评分低于对照组(P<0.05);治疗期间,2组均未出现明显不良反应。结论茯苓甘草合剂辅助西药治疗COPD合并肌肉衰减效果确切,可通过抑制NF-κB信号通路,减轻炎性反应,改善患者营养状态,有效改善临床症状,且安全性高。

茯苓酸调节PI3K/AKT/NF-κB信号通路对大鼠幽门螺旋杆菌相关性胃炎的治疗作用

目的 探讨茯苓酸(PA)对大鼠幽门螺旋杆菌(Hp)相关性胃炎的治疗效果及作用机制。方法 建立Hp相关性胃炎大鼠模型;所有大鼠分为对照组(CT组)、模型组(M组)、PA低剂量组(PA L组)和PA高剂量组(PA H组)、PA H+磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)激活剂(740 Y-P)组;评估各组大鼠胃黏膜损伤指数(UI),透射电子显微镜观察胃黏膜细胞形态学,HE染色评价胃黏膜病理学特征,ELISA检测胃组织白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-10、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、超氧化物歧化酶(SOD)的水平,Western blot法检测PI3K、磷酸化-PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、p-AKT、核因子(NF)-κB p65、p-NF-κB p65蛋白表达。结果 与CT组比较,M组大鼠胃黏膜糜烂,上皮水肿、充血、溃疡严重,上皮细胞固缩,炎性细胞浸润,UI、IL-6、TNF-α、iNOS以及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白表达水平升高,IL-10和SOD水平降低(P<0.05);与M组比较,PA L组、PA H组大鼠胃黏膜损伤改善,炎性细胞浸润减少,UI、IL-6、TNF-α、iNOS以及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白表达水平降低,IL-10和SOD水平升高(P<0.05);与PA H组比较,PA H+740 Y-P组大鼠胃黏膜病理损伤加重,上皮细胞固缩,UI、IL-6、TNF-α、iNOS以及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白表达水平升高,IL-10和SOD水平降低(P<0.05)。结论 PA可能通过抑制PI3K/AKT/NF-κB信号通路发挥对大鼠Hp相关性胃炎的治疗作用。

白细胞介素17C通过IKK/NF-κB通路调控慢性鼻窦炎的作用机制

[目的]探讨白细胞介素17C(IL-17C)通过IKK/NF-κB通路调控慢性鼻窦炎(CRS)的作用机制,旨在为临床治疗CRS提供参考.[方法]选择IL-17C刺激人鼻黏膜原代上皮细胞(HNEPCs),采用CCK-8法检测不同质量浓度的IL-17C对HNEPCs活力的影响;利用ELISA法检测IL-17C诱导的HNEPCs中相关因子的表达水平;采用Western blot法检测IL-17C诱导的HNEPCs中IKK/NF-κB信号通路中相关蛋白的表达情况.[结果]与对照组比较,不同质量浓度的IL-17C对HNEPCs活力无显著影响(P>0.05);IL-17C干预组HNEPCs中IL-4、IL-5、IL-13、IL-17及p-IKK表达水平均明显升高,差异均具有统计学意义(P<0.05);IL-17C干预组HNEPCs中p-IKK、p-IκBα及p-NF-κB表达均明显升高(P<0.05),IKK、IκBα及NF-κB蛋白表达无明显改变(P>0.05).与IL-17C干预组比较,IL-17C+地塞米松组p-IKK、p-IκBα及p-NF-κB蛋白表达均明显降低(P<0.05).[结论]IL-17C可诱导HNEPCs中Th2及Th17相关炎症因子的产生,机制认为可能是调控IKK/NF-κB信号通路.

泼尼松联合阿奇霉素序贯疗法治疗儿童重症肺炎支原体肺炎的疗效及对血清TLR4/MyD88/NF-κB信号通路相关蛋白和下游炎性因子水平的影响

目的探讨泼尼松联合阿奇霉素序贯疗法治疗儿童重症肺炎支原体肺炎的疗效及对血清Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核因子κB(NF-κB)信号通路相关蛋白和下游炎性因子水平的影响。方法招募2019年1月至2022年6月唐山市妇幼保健院收治的儿童重症肺炎支原体肺炎患者120例,采用随机数字表法将其分为对照组(采用阿奇霉素治疗,60例)和观察组(采用泼尼松联合阿奇霉素治疗,60例)。治疗4周后,比较两组治疗效果、临床肺部感染量表(CIPS)评分、TLR4/MyD88/NF-κB信号通路相关蛋白以及下游炎性因子的水平。结果观察组患者的体温恢复时间、咳嗽缓解时间、咳痰缓解时间、喘息缓解时间、肺部啰音消失时间较对照组更快,住院时间更短,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组的体温、白细胞计数、气道分泌物、氧合情况、胸部X射线、痰培养等CIPS项目评分以及总分均较治疗前降低,且观察组评分较对照组更低,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组TLR4、MyD88、NF-κB、C-反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、降钙素原(PCT)水平均降低,且观察组水平较对照组更低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论泼尼松联合阿奇霉素序贯疗法对人体血清TLR4/MyD88/NF-κB信号通路相关蛋白及下游炎性因子水平有显著下调作用,可提高儿童重症肺炎支原体肺炎患者的临床疗效。

2型糖尿病肾病患者血清NF-κB炎症信号通路与肾功能指标的相关性

【目的】探讨2型糖尿病肾病(T2DN)患者血清核转录因子-κB(NF-κB)炎症信号通路与肾功能指标[血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、尿白蛋白排泄率(UAER)、β2-微球蛋白(β2-MG)、肾小球滤过率(eGFR)]的相关性。【方法】初诊的T2DN患者87例为A组,同期收治的单纯原发性2型糖尿病患者80例为B组,体检健康的志愿者70例为C组。比较三组临床资料,肾功能指标及血清NF-κB、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)水平。采用Pearson相关法分析T2DN患者血清NF-κB、TNF-α、IL-1β、hs-CRP、IL-6水平与肾功能指标的相关性。【结果】A组和B组空腹血糖、餐后2 h血糖高于C组(P<0.05);三组其他临床资料比较,差异无统计学意义(P>0.05)。A组BUN、Scr、UAER、β2-MG高于B组和C组(P<0.05),eGFR低于B组和C组(P<0.05);B组与C组上述指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。A组血清NF-κB、TNF-α、IL-1β、IL-6、hs-CRP水平高于B组和C组(P<0.05);B组上述指标均高于C组(P<0.05)。Pearson相关分析显示,T2DN患者血清NF-κB、TNF-α、IL-1β、IL-6、hs-CRP水平与BUN、Scr、UAER、β2-MG均呈正相关(P<0.05),与eGFR均呈负相关(P<0.05)。【结论】NF-κB炎症信号通路的激活介导了T2DN的发生、发展,且NF-κB、TNF-α、IL-1β、IL-6、hs-CRP均与肾功能指标存在明显相关性。

乌司他丁抑制TLR4/NF-κB信号通路对心肺复苏大鼠心功能的改善作用

目的旨在探究乌司他丁对心肺复苏大鼠的影响。方法通过窒息构建心脏骤停大鼠模型,窒息9.5 min后,对大鼠静脉注射肾上腺素,并对大鼠胸部进行按压以实施心肺复苏。Kaplan-Meier存活曲线分析大鼠存活率,神经系统缺损评分(NDS)评估大鼠神经系统缺损,转棒疲劳实验评估大鼠运动协调及平衡能力。ELISA法检测血清炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、IL-6水平,western blotting检测大脑皮层TLR4/NF-κB信号通路的表达。结果乌司他丁治疗提高大鼠存活率,改善心脏骤停后的心功能及大鼠神经认知功能、运动协调能力。乌司他丁降低心脏骤停/心肺复苏后促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平,降低TLR4蛋白及p-p65/p65水平。结论乌司他丁抑制TLR4/NF-κB通路活性,对心肺复苏大鼠心功能及运动协调能力具有改善作用。

微小核糖核酸mmu-miR-8114和mmu-miR-3473b在细粒棘球蚴致敏小鼠中的调控作用

目的探索微小核糖核酸(miRNAs)在通过细粒棘球蚴感染引起的小鼠过敏反应中的调节作用。方法建立小鼠体内棘球蚴病动物模型,收集脾脏单核细胞进行转录组测序。比较过敏性小鼠和非过敏小鼠之间mRNAs和miRNAs的差异表达。使用Targetscan和miRanda软件预测mRNAs和miRNAs之间的靶向调控关系,并通过蛋白质—蛋白质相互作用(PPI)网络分析,识别核心基因,通过富集分析探讨核心基因的生物学作用。最后利用qRT-PCR和Western blot验证关键结果。结果过敏与非过敏小鼠之间存在1642个差异表达的mRNAs。对18个差异表达的miRNAs进行分析,鉴定出60个差异表达的靶标基因,其中在PPI网络中连通度最大的前10个基因被认定为核心基因。富集分析显示核心基因主要参与NF-kappa B信号通路。基于miRNAs与mRNAs之间的负调控作用以及双荧光素酶报告系统发现mmu-miR-8114与Atf3以及mmu-miR-3473b与Myd88具有靶向调控关系,并与NF-kappa B信号通路有关。通过qRT-PCR验证了mmu-miR-8114和mmu-miR-3473b在过敏小鼠中下调表达,Atf3、Myd88、Socs3在过敏小鼠中上调表达。qRT-PCR和Western blot结果发现NF-kappa B信号通路在过敏小鼠中的活性增加。结论本研究揭示了mmu-miR-8114和mmu-miR-3473b通过NF-kappa B信号通路调控导致小鼠过敏反应的重要作用,为理解细粒棘球蚴感染引起的过敏反应机制提供了新的见解。

中药单体调控NF-κB信号通路治疗宫颈癌的研究进展

宫颈癌是女性生殖系统中发病率较高的恶性肿瘤,人乳头瘤病毒(HPV)持续感染是导致宫颈癌变的主要因素。NF-κB作为肿瘤相关炎症信号通路,在调节机体炎症反应与免疫应答方面发挥重要作用。HPV感染可激活NF-κB信号通路以促进宫颈慢性炎症,从而参与宫颈癌的发生发展。随着中医药的不断发展,中药在治疗肿瘤方面发挥了独特优势,中药单体能多靶点、多通路干预肿瘤细胞生长。通过多个中英文数据库的检索,发现中药单体可通过调控NF-κB信号通路发挥抑制宫颈癌细胞增殖、侵袭和转移、促进癌细胞凋亡、诱导癌细胞自噬、增强癌细胞化疗敏感性等作用以干预宫颈癌的发展。因此基于研究现状,本文从分子生物学角度全面论述中药单体调控NF-κB信号通路治疗宫颈癌的研究进展,以期为中医药靶向治疗宫颈癌的研究提供重要方向。

葫芦巴碱调节PI3K/Akt/NF-κB信号通路对变应性接触性皮炎大鼠免疫反应的影响

目的探讨葫芦巴碱对变应性接触性皮炎(ACD)大鼠免疫、炎性反应及PI3K/Akt/NF-κB信号通路的影响。方法60只SD大鼠随机分为正常组、ACD组、葫芦巴碱(低、中、高)剂量组(20、40、80 mg/kg)和PI3K抑制剂(LY294002)组(40 mg/kg),每组10只。除正常组外,其余组大鼠采用2,4二硝基氟苯(DNFB)诱导ACD模型。给药结束后,通过录像观察大鼠挠痒行为;HE染色检测大鼠耳皮肤组织病理学变化;ELISA检测大鼠血清IgE及Th1、Th2、Th17型细胞因子(IFN-γ、IL-4、IL-17)水平;Western blot检测大鼠耳皮肤组织中炎性因子(IL-1β、IL-6)蛋白及PI3K/Akt/NF-κB信号通路相关蛋白表达。结果与正常组比较,ACD组大鼠挠痒次数增加,血清IgE、IFN-γ、IL-4、IL-17水平及耳皮肤组织中IL-1β、IL-6蛋白表达和p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-NF-κB/NF-κB比值升高(P<0.05),耳皮肤组织角化过度且可见大量炎性细胞浸润;与ACD组比较,葫芦巴碱(低、中、高)剂量组和LY294002组大鼠挠痒次数减少,血清IgE、IFN-γ、IL-4、IL-17水平及耳皮肤组织中IL-1β、IL-6蛋白表达和p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-NF-κB/NF-κB比值降低(P<0.05),耳皮肤组织病理损伤均有所改善,且葫芦巴碱各给药组呈剂量依赖效应;葫芦巴碱高剂量组和LY294002组大鼠上述指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论葫芦巴碱可抑制ACD大鼠皮肤组织中PI3K/Akt/NF-κB信号通路激活,调控Th1、Th2、Th17型免疫应答并减轻皮肤局部和全身炎性反应。

丹参新醌乙减轻ox-LDL诱导的内皮细胞损伤:基于抑制NF-κB/NLRP3信号通路介导的细胞焦亡

目的探讨丹参新醌乙对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的影响及机制。方法取对数生长期的人脐静脉内皮细胞,分为正常组(加入10%胎牛血清)、ox-LDL组(在正常组基础上加入100ug/mL的ox-LDL)、二甲基亚砜(DMSO)组(在ox-LDL组基础上加入0.1%浓度DMSO)、丹参新醌乙组(在ox-LDL组基础上加入由DMSO溶解的100ng/ml的丹参新醌乙),培养24 h后进行实验。微板法检测乳酸脱氢酶(LDH)表达;qRT-PCR法检测NF-κB1、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、消皮素D(GSDMD)、白介素(IL)-1β的mRNA表达;WesternBlot法检测NF-κB1、NLRP3、caspase-1、GSDMD-N的蛋白表达。免疫荧光法检测GSDMD表达情况。结果与正常组比较,ox-LDL组、DMSO组LDH表达明显升高(P<0.01),NF-κB1、NLRP3、GSDMD、IL-1β的mRNA水平均显著上调(P<0.01),NF-κB1、NLRP3、caspase-1、GSDMD-N、IL-1β的蛋白表达水平明显升高(P<0.01);与ox-LDL组、DMSO组比较,丹参新醌乙组LDH表达有所降低(P<0.05),NF-κB1、NLRP3、GSDMD、IL-1β的mRNA水平显著下调(P<0.01),NF-κB1、NLRP3、caspase-1、GSDMD-N、IL-1β的蛋白水平显著降低(P<0.01),GSDMD在质膜表达抑制,入核受限。结论丹参新醌乙可能通过NF-κB/NLRP3信号通路,抑制NLRP3炎症小体介导的细胞焦亡,改善ox-LDL诱导的内皮细胞损伤。

NF-κB信号通路介导CRY1基因甲基化促进急性髓系白血病预后的机制研究

目的 检测急性髓系白血病(acute myeloid leukemia, AML)中隐色素1(cryptochrome 1,CRY1)甲基化状态,探讨CRY1甲基化与AML预后的相关性,进一步探讨其促进AML预后的相关机制。方法 培养THP-1细胞,收集58例AML患者(AML组)及23例正常健康人(正常组)骨髓标本,进行基因组DNA及RNA提取。甲基化特异性聚合酶链反应(methylation specific polymerase chain reaction, MSP)方法对CRY1基因进行甲基化检测。逆转录实时荧光定量聚合酶链反应(reverse transcription quantitative real-time polymerase chain reaction, RT-qPCR)和Western blot分别对CRY1、核因子κB p65(nuclear factor kappa-B p65,NF-κB p65)、磷酸化核因子κB p65(phospho-nuclear factor kappa-B p65,p-NF-κB p65)及核因子κB抑制因子α(inhibitor of NF-κB,IκBα)基因和蛋白的表达进行检测。结果 AML组患者的CRY1启动子甲基化率高于正常组(P<0.05)。异常核型AML患者CRY1基因甲基化率和CRY1 mRNA表达分别低于和高于正常核型AML患者。CRY1的甲基化阳性率在不同年龄、性别和FAB分型方面差异无统计学意义(P>0.05)。CRY1甲基化组CRY1、NF-κB p65、p-NF-κB p65及IκBα的mRNA和蛋白相对表达量较CRY1未甲基化组均明显下降(P均<0.05)。结论 AML患者CRY1启动子甲基化下调CRY1 mRNA表达,通过抑制NF-κB的抗凋亡作用,影响细胞增殖与凋亡,促进AML的预后。

地五养肝方调控TLR4/NF-κB信号通路对肝癌模型肠道菌群调节作用

目的分析地五养肝方调控TLR4/NF-κB信号通路对肝癌模型肠道菌群及其菌群代谢功能的调节作用。方法选择24只SPF级大鼠随机分为对照组、模型组和观察组;模型组和观察组建立大鼠肝癌模型;末次给药后24 h时大鼠处死后取出肝脏组织,观察肝组织病理学变化;采用酶联免疫吸附法检测CA19-9、AFP、ALT水平;采用变性梯度凝胶电泳法(DGGE)绘制DGGE指纹图谱;利用气相色谱法检测大鼠粪便中短链脂肪酸水、D-乳酸水平;采用Western blotting法检测瘤组织中TLR4、NF-κB、GAPDH水平。结果对照组大鼠肝功能正常无受损,肝脏健全,模型组出现明显的癌细胞,且肝脏受损严重,观察组大鼠肝脏结构较为完整,肝脏组织炎性细胞减少,损伤程度减弱;观察组大鼠血清标志物CA19-9、AFP及ALT水平均明显低于模型组,且差异存在统计学意义(P<0.05);观察组大鼠大肠道菌群中双歧杆菌、乳酸杆菌、大肠埃希菌、肠球菌水平均明显低于模型组,且差异存在统计学意义(P<0.05);观察组大鼠肠道菌群DGGE指纹图谱的多样性指数、丰富度和均匀度明显高于模型组,且差异存在统计学意义(P<0.05);观察组大鼠TLR4蛋白和NF-κB蛋白表达水明显低于模型组,且差异存在统计学意义(P<0.05)。结论地五养肝方可有效调控TLR4/NF-κB信号通路,并改善肝癌模型肠道菌群及其菌群代谢功能。

外泌体介导miR-3473b靶向NF-κB对肺癌细胞肺内转移及B细胞数量的影响

目的探讨外泌体介导miR-3473b靶向NF-κB对肺癌细胞肺内转移及B细胞数量的影响。方法提取小鼠肺癌细胞(LLC)外泌体,鉴定外泌体形态及标志物表达。将Cy5.5标记的LLC来源外泌体与成纤维细胞共培养,共聚焦显微镜观察外泌体行踪。RT-PCR检测细胞内及外泌体内miR-3473b表达。分析LLC来源外泌体对小鼠肺内转移及B细胞数量的影响。蛋白免疫印迹法LLC来源外泌体miR-3473b对肺成纤维细胞NF-κB通路的影响。结果LLC来源外泌体微囊泡直径为30~100 nm,外泌体标记蛋白Hsp90、CD63呈阳性表达;LLC来源外泌体内miR-3473b表达水平显著高于细胞内(P<0.01);LLC来源外泌体组小鼠肺转移数目及面积显著多于对照组(P<0.05);LLC来源外泌体+miR-3473b抑制剂组小鼠肺转移数目及面积显著低于LLC来源外泌体组(P<0.05);LLC来源外泌体组小鼠肺内CD45+标记免疫细胞中B细胞百分比显著高于对照组(P<0.05);LLC来源外泌体+miR-3473b抑制剂组小鼠肺内CD45+标记免疫细胞中B细胞百分比显著低于LLC来源外泌体组(P<0.05);LLC来源外泌体组小鼠成纤维细胞p65和p-p65水平显著高于对照组,Nfkbid水平显著低于对照组(P<0.05);LLC来源外泌体+miR-3473b抑制剂组小鼠成纤维细胞p65和p-p65水平显著低于LLC来源外泌体组,Nfkbid水平显著高于对照组(P<0.05)。结论外泌体介导miR-3473b可能通过抑制肺成纤维细胞Nfkbid表达,靶向激活NF-κB信号通路,促进肺癌细胞肺内转移以及诱导肺内B细胞聚集。

丹酚酸B对肝癌H22小鼠TLR_(4)/MyD88/NF-κB通路及肠道细菌的影响

目的研究丹酚酸B(Salvianolic acid B,Sal B)对肝癌H22小鼠抗肿瘤效果、TLR_(4)/MyD88/NF-κB通路以及肠道菌的影响。方法构建H22肝癌移植瘤小鼠,随机分为模型组、环磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX)阳性对照组、丹酚酸B中剂量组(50 mg·kg^(-1))和丹酚酸B高剂量组(100 mg·kg^(-1)),另设置一组正常小鼠为正常对照组。给药15天后计算抑瘤率;苏木精-伊红(Hematoxylin-eosin staining,HE)染色法观察肿瘤组织病理改变;实时定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)法分别检测肿瘤组织Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR_(4))、髓样分化因子(Myeloid differentiation factor88,MyD88)、核转录因子NF-κB(Nuclear transcription factor-κB,NF-κB)基因和蛋白表达;高通量测序(High-throughput sequencing)法分析小鼠粪便细菌群落结构多样性。结果与模型组比较,丹酚酸B显著抑制肿瘤生长(P<0.05),下调TLR_(4)、MyD88、NF-κB基因和蛋白表达。与正常组比较,模型组小鼠肠道细菌组成结构发生显著改变(P<0.05);与模型组比较,丹酚酸B高剂量组小鼠肠道细菌的群落结构更接近正常组。结论丹酚酸B可抑制H22荷瘤小鼠肿瘤生长,抑制TLR_(4)/MyD88/NF-κB信号通路的激活,对肿瘤小鼠肠道细菌菌群紊乱具有正向的调节作用。

Advances in Mathematical Modeling of NFκB Signal Transduction in Mammals

NFκB is a basic transcription factor of cell signal transduction in mammals. Mathematical modeling can be used to simulate NFκB signal transduction and investigate the molecular mechanism. The initial IKB-NFκB signal transduction model emphasized the effects of negative feedback on NFκB temporal dynamics and gene expression control, while subsequent studies are concentrated on other feedback loops, input-output behaviors of modules, crosslinking of several NFκB activation paths and NFκB oscillation. Computer technology will continue to contribute to studies of NFKB signaling pathway. Finally, several potential development trends were discussed in this paper.

丹酚酸B通过抑制Toll样受体4/核因子κB信号通路对小鼠BV2细胞炎症模型保护作用的研究

目的探讨丹酚酸B对1-甲基-4-苯基-吡啶离子(MPP+)诱导的小鼠BV2小胶质细胞神经炎症反应的影响及作用机制.方法将BV2细胞分为空白对照组、MPP+组,以及低、中、高浓度丹酚酸B+MPP+处理组.低、中、高浓度组的细胞分别用10、50、100μmol/L丹酚酸B处理2h.此后用1 mmol/L MPP+处理细胞24 h.MPP+组仅用1 mmol/L MPP+处理24 h.采用流式细胞术和CCK-8法分别检测细胞凋亡和存活情况,采用Western blot法、免疫组化法、免疫荧光法检测各组细胞中Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)和核因子κB(NF-κB)p65蛋白表达水平,酶联免疫吸附法测定肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素lβ(IL-1β)和白细胞介素6(IL-6)水平.结果与对照组比较,MPP+组细胞TLR4、MyD88、p-NF-κB p65蛋白及炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6表达水平增加(P<0.01);与MPP+组相比,低、中、高浓度丹酚酸B+MPP+处理组细胞,TLR4、MyD88、p-NF-κB p65蛋白及炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6表达水平与丹酚酸B浓度成正比降低(P<0.01).结论在MPP+诱导的小鼠炎症细胞模型中,丹酚酸B可通过抑制TLR4/NF-κB炎症信号通路激活而发挥抗炎作用.

山柰酚通过下调NF-κB信号通路减轻猪源甲型H9N2流感病毒所致小鼠急性肺损伤

目的:探讨山柰酚是否通过下调转录因子NF-κB信号通路的表达而保护感染猪源甲型H9N2流感病毒引起急性肺损伤的小鼠。方法:猪源甲型H9N2流感病毒感染BALB/c小鼠建立急性肺损伤模型,山柰酚干预后检测肺湿重与干重比,观察肺组织的病理学变化,检测支气管肺泡灌洗液内炎性细胞数量以及肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素1β(IL-1β)含量同时检测肺组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)和髓过氧化物酶(MPO)活性以及丙二醛(MDA)含量,Western blot检测小鼠肺内NF-κB P65的表达,ELISA检测小鼠肺组织匀浆细胞核提取物中NF-κB P65和NF-κB P50的核转位。结果:山柰酚能降低小鼠死亡率,改善肺组织的病理学变化和肺水肿程度,并能降低肺内巨噬细胞、淋巴细胞和中性粒细胞等炎性细胞的数量同时降低TNF-α、IL-6、IL-1β和MDA的含量,抑制MPO的活性并升高SOD的活性。另外,山柰酚可以下调NF-κB P65的表达增加细胞核提取物中NF-κB P65和NF-κB P50的核转位。结论:山柰酚通过下调NF-κB信号通路的表达从而降低猪源甲型H9N2流感病毒所致急性肺损伤小鼠的炎症程度和氧化应激损伤,最终减轻流感病毒所致的急性肺损伤。

复方甘草酸苷对小鼠实验性结肠炎NF-κB、STAT3信号转导通路的影响

背景:溃疡性结肠炎(UC)的病因、发病机制不明,且缺乏有效治愈手段。对相关信号转导通路的研究有助于了解药物干预的作用机制。目的:观察复方甘草酸苷对小鼠实验性结肠炎的治疗作用及其对NF-κB、STAT3信号转导通路的影响。方法:40只健康昆明小鼠随机分为四组,一组为正常对照组,另三组以噁唑酮诱导实验性结肠炎,随后分别腹腔注射0.9%NaCl溶液(模型对照组)、复方甘草酸苷(甘草酸苷组)或予柳氮磺砒啶(SASP)灌胃(SASP组)7 d。观察各组小鼠疾病活动指数(DAI)、结肠组织大体和组织学损伤评分以及髓过氧化物酶(MPO)活性,蛋白质印记法检测结肠黏膜NF-κB、STAT3活化水平。结果:模型对照组DAI、大体和组织学损伤评分、MPO活性以及结肠黏膜固有层单个核细胞中活化NF-κB p65、STAT3的表达均显著高于正常对照组(P<0.05),甘草酸苷组和SASP组则较模型对照组显著降低(P<0.05),甘草酸苷组与SASP组间仅DAI和组织学损伤评分有显著差异(P<0.05)。结论:复方甘草酸苷能有效改善小鼠实验性结肠炎的炎症活动水平,其作用机制可能与下调NF-κB、STAT3信号转导通路有关。

PKC／Raf-1／NF-κB信号通路在低氧诱导大鼠单核细胞表达TNF-α中的作用

目的:研究PKC/Raf-1/NF-κB信号通路在低氧诱导大鼠外周血单核细胞(PBMCs)肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达中的作用,探讨低氧与全身炎症反应综合征(SIRS)的关系,为进一步研究老年多器官功能障碍综合征(MODSE)的肺启动机制奠定基础。方法:采用明胶法分离大鼠外周血单核细胞,分为chelerythrine+低氧组、forskolin+低氧组和单纯低氧组。Chelerythrine+低氧组和forskolin+低氧组细胞在低氧前分别予10μmol/L chelerythrine和50μmol/L forskolin预处理。然后各组均于低氧条件下(3%O2,5%CO2,92%N2)培养0、1、3、6、9、12、24h后,收集细胞及培养液上清,分别采用PKC、Raf活性检测试剂盒、电泳迁移分析法(EMSA)、逆转录PCR(RT-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测PKC、Raf-1、NF-κB活性及TNF-α表达量。结果:低氧1-9h,PKC、Raf-1活性、NF-κB结合活性及TNF-α表达量显著高于正常对照组(P<0.01)。低氧后1-24h,PKC、Raf-1活性、NF-κB结合活性与TNF-α mRNA和蛋白表达水平间呈显著正相关(P<0.01,P<0.05)。10μmol/L chelerythrine可显著抑制低氧诱导的PKC、Raf-1、NF-κB活性升高和TNF-α表达。50μmol/L forskolin可显著抑制低氧诱导的Raf-1、NF-κB活性升高及TNF-α表达。结论:低氧可显著增强大鼠外周血单核细胞的PKC、Raf-1活性及NF-κB结合活性,并可诱导其产生大量的促炎症因子TNF-α,这些变化可能与急性呼吸窘迫综合征(ARDS)时血浆中大量促炎症因子持续存在密切相关。

急性B淋巴细胞白血病中非经典性NF-κB信号通路的作用研究

目的:研究以Rel-B为标志的非经典性NF-κB信号通路在急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)中的作用。方法:收集2015年3月至2016年3月期间48例B-ALL病人的骨髓标本作为研究标本,应用实时荧光定量RT-PCR方法测定NF-κB家族成员mRNA的表达水平,ELISA法定量分析B-ALL细胞核中NF-κB DNA结合活性,流式细胞术分析B-ALL细胞体外单独或与骨髓基质细胞(hBMSC)共培养后的细胞凋亡率。结果:ALL-B细胞中的NF-κB家族成员mRNA,包括Rel A、Rel B、p50和p52的相对表达量均明显的高于正常对照组(P<0.05);不同NF-κB活性的B-ALL患者的临床特征无显著的差异(P>0.05);B-ALL细胞单独培养以及与hBMSC共培养后Rel A^+/Rel B-组细胞的凋亡率明显的高于Rel A^+/Rel B^+细胞组(P<0.05);两组细胞单独培养与和h BMSC共培养后的细胞凋亡率具有显著的差异(P<0.05)。结论:以Rel B为标志的非经典性NF-κB信号有望作为治疗BALL的一个新靶点。