重组白细胞介素-4增强日本血吸虫组织蛋白酶B核酸疫苗诱导小鼠的保护力

目的探讨重组白细胞介素-4(IL-4)真核表达质粒增强日本血吸虫组织蛋白酶BDNA疫苗对小鼠的免疫保护效果。方法将小鼠IL-4基因克隆至真核表达载体pcDNA3.1以构建小鼠重组IL-4表达质粒,并联合日本血吸虫组织蛋白酶B的表达质粒DNA(VR1012-Sj31)肌注免疫小鼠,设重组IL-4表达质粒、组织蛋白酶B表达质粒和2种空载体质粒对照组。免疫组化检测IL-4和组织蛋白酶B在小鼠肌细胞内的表达,末次免疫3周后攻击感染,用减虫率及减卵率表示保护力。结果重组IL-4和组织蛋白酶BDNA均在小鼠肌细胞表达,重组IL-4和组织蛋白酶BDNA联合免疫小鼠,产生43.2%的减虫率和76.6%的减卵率,与组织蛋白酶BDNA单独免疫相比差异有显著性(P<0.01,P<0.05)。结论重组IL-4能提高日本血吸虫组织蛋白酶B核酸疫苗的抗血吸虫保护力作用,具有佐剂的免疫效应。

日本血吸虫组织蛋白酶B DNA疫苗不同免疫途径免疫保护效果研究

目的 :观察本室所构建日本血吸虫大陆株 31kDa组织蛋白BDNA疫苗在BALB/c小鼠体内的不同免疫途径的免疫保护效果。方法 :用纯化的空白质粒载体VR1 0 1 2、重组质粒VR1 0 1 2 Sj31免疫BALB/c鼠 ,将 36只 6～ 8周龄BALB/c鼠随机分为 3组 ,每组 1 2只 ,对照组 (A组 )肌肉注射空白质粒载体VR1 0 1 2 ,实验组 (B组 )皮下注射重组质粒VR1 0 1 2 Sj31 ,C组肌肉注射重组质粒VR1 0 1 2 Sj31。质粒剂量均为 1 0 0 μg ,每隔 2w免疫 1次 ,共免疫 3次 ,第 3次免疫后第 2 1d ,每只鼠经腹部感染 1 0条尾蚴 ,4 2d后剖杀计数各小鼠成虫数和每克肝卵数 ,观察诱导产生的减虫和减卵效果 ,并用ELISA分析小鼠血清中的抗体。结果 :ELISA分析表明 ,第 3次免疫后小鼠出现特异性IgG抗体。与空白质粒对照组比较 ,2个实验组的减虫率分别为 1 5 .0 % (P >0 .0 5 )和 2 5 .0 % (P <0 .0 5 ) ,减卵率分别为 38.2 2 %和 5 4.90 % (P <0 .0 0 1 )。与皮下免疫组相比 ,VR1 0 1 2 /Sj31肌肉免疫组的减卵率分别为 2 6 .99% (P <0 .0 0 1 )。结论 :DNA疫苗VR1 0 1 2 Sj31能诱导小鼠产生一定水平的抗日本血吸虫感染保护作用 ,肌肉注射的保护效果大于皮下注射。