大鼠脊髓挫伤后BDNF表达的实验性研究

目的探讨大鼠脊髓挫伤后脑源性神经营养因子（BDNF）在脊髓内的表达变化规律。方法建立大鼠脊髓挫伤模型，以正常脊髓组织为对照，采用RT—PCR和免疫组化SABC法对伤后即刻、1h、3h、6h、12h、1d、3d、5d、7d大鼠脊髓组织中的BDNF和BDNF mRNA进行检测，并对所得数据进行统计学分析。结果正常大鼠脊髓组织细胞内有低水平的BDNF mRNA表达和少量BDNF阳性染色细胞，BDNF mRNA和BDNF的积分光密度（IOD）值分别为45．83±3．545、20286．225±2094．955，BDNF阳性细胞数为16．50±3．391；伤后6～12h，BDNF mRNA和BDNF呈升高趋势，5d达高峰，二者的IOD值及阳性细胞数分别为795．83±112．55、54272．143±2704．239和158．17±12．287。伤后7d，BDNF mRNA和BDNF的IOD值及阳性细胞数分别为655．17±80．871、42249．928±809．391和100．17±5．529。各组之间比较，其差异具有统计学意义（P〈0．05）。BDNF免疫阳性细胞在损伤早期主要是脊髓神经元和少量星形胶质细胞，后期则以小胶质细胞为主。结论大鼠脊髓挫伤后，脊髓组织细胞中的BDNF及其mRNA增多，并随伤后时间呈现一定规律性变化。

大鼠液压冲击脑损伤BDNF及其受体TrkB表达的实验研究

目的研究脑损伤后BDNF及其受体TrKB蛋白表达及其时序性变化,进一步研究脑损伤的分子机制及法医学脑损伤时间推断。方法用免疫组织化学方法,观察液压冲击脑损伤大鼠BDNF及其受体TrKB蛋白在受伤后不同时间(5min、15min、30min、1h、3h、6h、12h,1d、3d、7d)的表达情况,以正常大鼠及手术大鼠作为对照。结果正常及手术对照组大鼠脑组织表达少量的BDNF及TrKB:脑损伤后1h大脑皮质颗粒和锥体细胞、海马CA3及小脑Purkinje细胞表达增强,3h达高峰,维持较高水平,12h开始下降,24h后降至对照水平。1h、3h、6h和12h与正常及手术对照组比较均有显著性差异。结论表明脑损伤可诱导BDNF及TrKB基因在脑内表达,其时序性改变可望用于法医学脑损伤时间推断。

大鼠弥漫性脑损伤后BDNF表达的法医学研究

目的:观察大鼠弥漫性脑损伤后BDNF的表达变化。方法:采用Marmarou的弥漫性脑损伤模型,分别于伤后15min、30min、lh、3h、6h、12h、24h、48h、72h取脑组织,运用免疫组化SABC法观察BDNF的表达,以正常大鼠和假手术大鼠作为对照。结果:正常大鼠即有少量BDNF的表达。打击后15min,BDNF表达增强,1h达高峰,48h降至正常水平。结论:机体对脑损伤存在自我保护机制;BDNF的时序性变化可望为法医学脑损伤时间的推断提供参考。

胃癌组织中Survivin、TrkB和BDNF的表达及意义

目的观察生存素基因蛋白（Survivin）、酪氨酸激酶受体B（TrkB）及其配体脑源性神经营养因子（BDNF）在胃癌组织和癌旁黏膜中的表达情况，探讨和分析Survivin、TrkB和BDNF与胃癌临床病理学参数的关系。方法采用免疫组化sP法检测64例原发性胃癌组织、癌旁黏膜组织和34例淋巴结癌转移组中对应的阳性淋巴结Survivin、TrkB和BDNF蛋白的表达，分析其与临床病理学特征的关系。结果胃癌组织中Survivin、TrkB和BDNF蛋白的阳性表达率分别为71．87％（46／64）、60．93％（39／64）和59．37％（38／64），而癌旁黏膜组织无一例表达。Survivin、TrkB和BDNF蛋白表达与患者性别、年龄、肿瘤分化程度等无关（P〉0．05），而与浸润深度、淋巴结转移和TNM分期有关。浸润至胃壁全层组、有淋巴结转移组和TNM分期Ⅲ～Ⅳ组的Survivin、TrkB和BDNF阳性表达率明显高于未浸润至胃壁全层组、无淋巴结转移组和TNM分期Ⅰ～Ⅱ组（分别P〈0．01）。研究还显示，Survivin与TrkB和BDNF的阳性表达率随着肿瘤不同浸润深度、有无淋巴结转移呈现相同的变化趋势，相关分析表明，Survivin阳性表达与TrkB和BDNF呈正相关（P〈0．05）。胃癌转移组Survivin、TrkB和BDNF蛋白在淋巴结转移癌中的阳性表达率（82．35％，28／34；76．47％，26／34；70．58％，24／34）均较原发癌（88．23％，30／34；85．29％，29／34；82．35％，28／34）低，但两者差异无显著性（分别P〉0．05）。结论Survivin、TrkB和BDNF表达与胃癌发生发展密切相关，联合检测Survivin、TrkB和BDNF可有助于判断胃癌局部侵袭和远处转移的能力。

大鼠脑外伤后BDNF的表达及其死后稳定性的研究

目的:探讨脑外伤后脑源性神经营养因子(Brain derived neurotrophical factor,BDNF)表达的变化和损伤时间的关系及其死后稳定性。方法:将健康SD大鼠105只,随机分成4组:正常组、假手术组、脑外伤组、死后稳定性组。采用重物砸伤脑组织建立脑外伤模型(创伤组、稳定性组),运用免疫组化和图像分析技术,检测各组BDNF的表达变化规律。结果:与正常组、假手术组比较,损伤后0.5 h,BDNF的免疫反应阳性细胞在损伤区周围增多,损伤后6 h BDNF阳性细胞数达高峰,以后逐渐下降,24 h后降至接近正常;死后稳定性组各时间点BDNF表达无显著性差异(P>0.05)。结论:脑外伤后BDNF表达与损伤时间具有相关性;在-20℃条件下,死后稳定性好。

NGF、BDNF和NT-3在背根节卫星细胞的表达

目的 观察神经因子 (NGF)、脑源性神经营养因子 (BDNF)和神经营养因子 - 3(NT- 3)及其 m RNA在成年猫背根节 (L6 )卫星细胞的表达情况。方法 成年雄猫 5只 ,随机取一侧的 L6 背根节 (DRG)制作 2 0μm厚冰冻切片 ,行免疫组化及原位杂交染色。观察 NGF、BDNF和 NT- 3及其 m RNA在 DRG卫星细胞的分布以及亚细胞定位。结果 在正常 DRG,可见 NGF、BDNF和 NT- 3及其 m RNA阳性卫星细胞。各因子 m RNA的阳性反应物定位于胞质。 BDNF- IR定位于胞质 ,而 NGF- IR和 NT- 3- IR则定位于胞核。结论 背根节部分卫星细胞内有 NGF、BDNF和 NT- 3及其 m RNA的分布 ,BDNF和 NGF、NT-

脑源性神经营养因子在成年猴脑的分布

采用免疫组织化学方法探讨了 BDNF在成年猴脑的分布。结果显示 ,脑源性神经营养因子阳性反应产物主要分布于下列结构 :大脑皮层 III～ V层的锥体细胞及突起 ;小脑皮质篮状细胞、Purkinje细胞、Golgi细胞及小脑顶核的神经元及其突起 ;海马各区的神经元、纤维和齿状核的颗粒细胞 ;尾状核、豆状核和室旁核部分神经元和纤维 ;脑干脑桥核、舌下神经核、迷走神经背核、前庭神经核、下橄榄核及网状结构的神经元及纤维或膨体。此外 ,在大、小脑的白质也可见到部分脑源性神经营养因子阳性胶质细胞。脑源性神经营养因子阳性反应产物广泛地分布于猴脑的多种区域和细胞 ,提示其功能可能涉及不同类型的神经元及可能的非神经细胞。本研究结果为探讨脑源性神经营养因子在成年猴脑的分布规律及其功能特点提供了有用的形态学依据。

钙粘蛋白E、脑源性神经营养因子在胃癌中的表达及临床意义研究

目的研究分析两个因子在胃癌组织、癌旁组织、正常组织中的表达变化,为临床早期诊断胃癌、评价患者预后提供参考。方法采用免疫组织化学法检测65例胃癌中央组织及癌旁正常组织和40例正常胃粘膜组织上皮中钙粘蛋白E、脑源性神经营养因子的表达,并分析比较两个因子的表达分别与年龄、性别、肿瘤直径、分化水平、淋巴结转移、lauren分型、TNM分期、CEA、CA19-9、CA72-4、Hp的关系及两个因子表达的关系,分析临床意义。结果 (1)E-cad在胃癌中央组织组的表达率低于在正常胃粘膜组织上皮组和癌旁正常组织组的表达率,BDNF在胃癌中央组织组的表达率高于正常胃粘膜组织上皮组和癌旁正常组织组表达率。(2)E-cad的表达与淋巴结转移、分化水平及TNM分期有关,与直径、年龄和性别无关。BDNF表达与肿瘤直径、淋巴结转移、癌分化水平及TNM分期有关,与年龄和性别无关。(3)E-cad、BDNF与Lauren分型有关。(4)E-cad、BDNF的表达与CA19-9、CA72-4、CEA无关。(5)E-cad、BDNF的表达与Hp感染有关。(6)E-cad与BDNF的表达无关,可作为独立的影响胃癌因子。结论(1)钙粘蛋白E、脑源性神经营养因子的表达与胃癌发生发展有关。(2)钙粘蛋白E、脑源性神经营养因子存在潜在机制/通路拮抗另一因子,影响胃癌转移、浸润过程。