外周血HMGB1Beclin1表达对多发性硬化急性发作期的诊断价值

目的探究高迁移率族蛋白B1(HMGB1)和Beclin1表达对急性发作期多发性硬化(MS)的诊断价值,分析其表达与病情严重程度的相关性。方法回顾性选取2020-01—2022-12邯郸市中心医院收治的86例急性发作期MS患者为研究组,根据Kurtzke扩展残疾状态评估量表(EDSS)对患者病情进行评估,选取同期健康体检者95例为对照组,收集2组患者一般资料,采集外周血以酶联免疫吸附法进行HMGB1和Beclin1检测,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析HMGB1和Beclin1表达对急性发作期MS的诊断价值,同时采用Pearson相关性分析其表达水平与疾病严重程度的关系。结果2组患者性别、年龄、体重指数(BMI)、淋巴细胞和嗜酸性粒细胞数量差异均无统计学意义(P>0.05),研究组患者白细胞和中性粒细胞均多于对照组(P<0.05)。研究组患者外周血中HMGB1表达水平高于对照组,Beclin1表达水平低于对照组(P<0.05)。经ROC曲线分析,HMGB1和Beclin1诊断急性发作期MS的AUC分别为0.798和0.809,两者联合预测效能最高,灵敏度和特异度分别为78.7%、93.7%。研究组患者EDSS评分为(3.38±1.02)分,随着EDSS评分的上升,HMGB1表达水平上升,Beclin1表达水平下降。经Pearson相关分析,急性发作期MS患者EDSS评分与HMGB1表达呈正相关,与Beclin1表达呈负相关(P<0.05)。结论HMGB1和Beclin1表达对急性发作期MS具有一定的诊断价值,两者联合诊断效能最佳,患者病情严重程度与HMGB1表达水平呈正相关,与Beclin1呈负相关。

子宫内膜癌病灶超声造影参数与Beclin1、Bax及CDK4表达水平的相关性分析

目的分析子宫内膜癌病灶超声造影参数与Beclin1、Beclin1关联X蛋白(Bax)及周期素依赖性激酶4(CDK4)表达水平的相关性。方法选取2022年1月至2023年1月在联勤保障部队第九〇〇医院就诊的42例子宫内膜癌患者作为恶性组,58例癌前病变患者作为良性组。两组患者均给予超声造影成像检查并测定造影剂平均渡越时间(MMT)、达峰时间(TTP)及峰值强度(Peak),均进行子宫切除术并采集病灶组织,检测Beclin1、Bax、CDK4及周期素依赖性激酶6(CDK6)表达水平。采用Pearson相关分析子宫内膜癌病灶超声造影参数与Beclin1、Bax及CDK4表达水平的相关性。结果恶性组病灶Peak高于良性组,MMT长于良性组,TTP短于良性组,Beclin1、Bax表达水平低于良性组,CDK4、CDK6表达水平高于良性组,差异均有统计学意义(P<0.05)。恶性组中TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期患者病灶Peak高于Ⅰ~Ⅱ期患者,MMT长于Ⅰ~Ⅱ期患者,TTP短于Ⅰ~Ⅱ期患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。恶性组中TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期患者病灶组织Beclin1、Bax表达水平低于Ⅰ~Ⅱ期患者,CDK4、CDK6表达水平高于Ⅰ~Ⅱ期患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,子宫内膜癌病灶Peak、MTT与CDK4及CDK6表达水平呈正相关(P<0.05),与Beclin1、Bax表达水平呈负相关(P<0.05),TTP与病灶组织CDK4及CDK6表达水平呈负相关(P<0.05),与Beclin1、Bax表达水平呈正相关(P<0.05)。结论子宫内膜癌患者MTT长于癌前病变患者,以及Peak、CDK4、CDK6表达水平均高于癌前病变患者,子宫内膜癌患者病灶超声造影参数MTT、TTP及Peak与Beclin1、Bax及CDK4表达水平相关,超声造影检查有助于辅助临床判断子宫内膜癌患者细胞凋亡相关蛋白表达情况。

有氧运动通过AMPK/ULK1/Beclin1通路调节模拟失重导致的心脏功能变化的研究

目的探讨模拟航天飞行失重引起心肌损伤以及有氧运动干预促进大鼠心肌恢复的可能机制。方法8周龄雄性SD大鼠40只,体重180~210 g,随机分为对照组和实验组,对照组随机分为对照组C1和对照组C2,实验组随机分为悬吊组T1、有氧运动组A和自然恢复组R,每组8只;采用电子天平称量大鼠体重相关指标;采用超声心动图和离体心脏灌流检测各组大鼠心脏功能指标;采用Western Blot法检测各组大鼠心肌组织中AMPK/ULK1/Beclin1通路相关蛋白的表达。结果(1)相较于对照组C1,悬吊组T1体重无显著性差异(P>0.05),比目鱼肌的湿重、比目鱼肌湿重体重比和心脏重量均显著下降(P<0.01)。(2)尾部悬吊4周和有氧运动4周后,心脏功能相关指标发生显著性变化,悬吊组T1AMPK和p-ULK1的表达水平显著上升(P<0.01),p-AMPK的表达量显著上升(P<0.05)。有氧运动4周后,相较于对照组C2,自然恢复组R的AMPK和ULK1的表达量显著上升(P<0.05);有氧运动组A的p-AMPK的表达量显著下降(P<0.05),p-ULK1的表达量显著下降(P<0.01)。相较于自然恢复组R,对照组C2的心肌蛋白AMPK的表达量显著下降(P<0.05),ULK1的表达量显著下降(P<0.01);有氧运动组A的AMPK、ULK1的表达量显著下降(P<0.01);p-ULK1的表达量显著下降(P<0.05)。结论(1)尾部悬吊4周后,发现大鼠的比目鱼肌湿重、以及湿重体重比显著降低,心脏的重量和心脏功能相关指标也显著降低,AMPK、p-AMPK、ULK1、p-ULK1、Beclin1表达量上升;(2)有氧运动4周后,发现尾部悬吊大鼠的心肌形态,心肌超微结构和心脏功能相关指标上升,心脏功能得到一定的改善,AMPK、p-AMPK、ULK1、p-ULK1、Beclin1表达量下降;(3)心脏功能的损伤和改善与通过AMPK/ULK1/Beclin1通路调控相关蛋白AMPK、p-AMPK、ULK1、p-ULK1、Beclin1表达有关。

三物白散对胃癌细胞自噬相关蛋白Beclin1、LC3、p62表达的影响

目的:探讨三物白散对胃癌细胞自噬相关蛋白Beclin1、LC3、p62表达的影响,探究三物白散抗胃癌的作用机制。方法:将28只SPF级雄性大鼠随机分为4组,每组7只,分别予以0.03125、0.0625、0.1250 g/(kg·d)三物白散及相同体积生理盐水灌胃,经腹主动脉采血制备含药血清。体外培养AGS细胞,设置空白对照组(空白组)、三物白散低剂量含药血清组(低剂量组)、三物白散中剂量含药血清组(中剂量组)、三物白散高剂量含药血清组(高剂量组)。采用CCK-8法检测不同浓度(5%、10%、15%、20%)三物白散含药血清对AGS细胞活性的影响;倒置显微镜下观察三物白散含药血清对AGS细胞形态的影响;RT-qPCR法检测Beclin1 mRNA、LC3 mRNA、p62 mRNA表达;Western blotting法检测Beclin1、LC3、p62蛋白表达。结果:与空白组比较,5%、10%、15%、20%三物白散高剂量含药血清可呈浓度-时间依赖性抑制AGS细胞活性;随着含药血清浓度升高,细胞形态逐渐不规则,细胞数量逐渐减少;中、高剂量组Beclin1 mRNA、LC3-ⅠmRNA、LC3-ⅡmRNA相对表达量均高于空白组,p62 mRNA相对表达量低于空白组(P<0.01);低剂量组LC3-ⅠmRNA、LC3-ⅡmRNA相对表达量高于空白组,p62 mRNA相对表达量低于空白组(P<0.01)。高剂量组Beclin1蛋白相对表达量及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ均高于空白组,p62蛋白相对表达量低于空白组(P<0.01);中剂量组Beclin1蛋白相对表达量及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ高于空白组(P<0.05或P<0.01),p62蛋白相对表达量低于空白组(P<0.01)。结论:三物白散对胃癌细胞的增殖有抑制作用,上调Beclin1、LC3表达、下调p62的表达、诱导胃癌细胞自噬可能是其抗胃癌作用机制之一。

血Beclin1、SFRP5、ACTH和皮质醇水平在糖尿病肾脏疾病中的变化及与蛋白尿的相关性

糖尿病是临床常见的慢性疾病,可引起酮症酸中毒、高渗性昏迷等代谢紊乱综合征[1]。调查显示,糖尿病人群发病率达12.2%,是威胁全球人类健康的三大疾病之一[2]。糖尿病肾脏疾病(DKD)是糖尿病患者主要的并发症之一,长期血糖升高会加重肾脏对葡萄糖代谢负荷,使肾小球灌注异常升高,从而损伤肾脏滤过组织,出现蛋白尿和肾功能下降等表现[3]。

金欣康颗粒提高线粒体自噬蛋白LC3/Beclin1表达改善心力衰竭大鼠心肌纤维化的研究

目的探讨金欣康颗粒(丹参、桂枝、黄芪、人参、毛冬青等7味药组成)对心力衰竭(简称心衰)大鼠线粒体自噬蛋白LC3/Beclin1表达的影响,阐述金欣康颗粒改善心梗后心衰心肌纤维化的机制。方法复制心梗后心衰大鼠模型。将造模成功的心衰大鼠随机分为4组:模型组,金欣康颗粒低剂量组、高剂量组和培哚普利组,另设假手术组,每组10只。给药12周,以HE染色、天狼猩红染色评估心肌组织的病理变化,心脏彩超对心脏结构和心功能进行评估,透射电镜观察自噬小体,免疫组化法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型和Ⅲ型胶原(CollagenⅠ和CollagenⅢ)蛋白的表达,Western Blot法检测自噬蛋白LC3、Beclin1的表达。结果成功复制心梗后心衰大鼠模型,模型组大鼠梗死区周边区域有大量红色的胶原沉积,心肌纤维排列紊乱,部分纤维断裂;线粒体明显肿胀,出现峭断裂,能观察到较多的自噬小体。金欣康颗粒组和培哚普利组心肌纤维排列较模型组整齐,纤维化程度较轻,自噬小体更加明显。与假手术组比较,模型组的射血分数(LVEF)和短轴缩短率(LVFS)显著降低(P<0.01),左室舒张末期内径(LVEDd)及收缩末期内径(LVEDs)增大(P<0.01),α-SMA、CollagenⅠ和CollagenⅢ表达水平升高(P<0.05),线粒体自噬蛋白Beclin1和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的表达升高(P<0.05);与模型组比较,金欣康颗粒组和培哚普利组LVEF和LVFS明显提高(P<0.01),心功能得到改善;α-SMA、CollagenⅠ和CollagenⅢ蛋白表达降低(P<0.05),Beclin1和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的表达升高(P<0.05)。结论金欣康颗粒可减轻心梗后心衰大鼠的心肌纤维化程度,其机制可能与增强线粒体自噬蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin1的表达有关。

膀胱癌组织Beclin1、LC3Ⅱ蛋白的表达及与患者肿瘤特征、预后的相关性分析

目的观察膀胱癌组织中自噬基因Beclin1、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3Ⅱ)蛋白表达状况,并分析两者与预后的相关性。方法选取2020年1月—2021年8月新疆医科大学附属肿瘤医院病理资料完整的110例膀胱癌患者。观察患者膀胱癌组织中Beclin1、LC3Ⅱ蛋白表达状况,记录病理参数,并对患者进行为期1年的随访。统计预后情况,观察不同病理参数及预后的膀胱癌患者膀胱癌组织中Beclin1、LC3Ⅱ蛋白表达,并分析两者与患者预后的相关性。结果膀胱癌组织Beclin1、LC3Ⅱ蛋白高表达率较癌旁组织低,Beclin1、LC3Ⅱ蛋白中低表达率较癌旁组织高(P<0.05)。高组织学分级、T_(2)~T_(4)分期、浸润性、淋巴结转移、预后不良的膀胱癌患者Beclin1蛋白高表达率低于低组织学分级、T_(a)~T_(1)分期、非浸润性、无淋巴结转移、预后良好的患者(P<0.05)。不同性别、年龄、肿瘤直径、血管侵犯的膀胱癌患者Beclin1蛋白表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。高组织学分级、T_(2)~T_(4)分期、浸润性、淋巴结转移、预后不良的膀胱癌患者LC3Ⅱ蛋白高表达率低于低组织学分级、T_(a)~T_(1)分期、非浸润性、无淋巴结转移、预后良好的患者(P<0.05)。不同性别、年龄、肿瘤直径、血管侵犯的膀胱癌患者LC3Ⅱ蛋白表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。经Phi系数相关性分析,Beclin1、LC3Ⅱ蛋白与预后不良均呈负相关(Phi=-0.277和-0.222,均P<0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示:Beclin1高表达[O^R=3.892(95%CI:1.504,10.072)]、LC3Ⅱ蛋白中低表达[O^R=3.358(95%CI:1.165,9.677)]是预后不良的危险因素(P<0.05)。结论膀胱癌组织中Beclin1、LC3Ⅱ表达与预后密切相关,Beclin1、LC3Ⅱ蛋白中低表达是预后不良的危险因素。

miR-30b靶向Beclin1参与慢性肾脏病血管钙化

目的 探究miR-30b在慢性肾脏病(CKD)大鼠血管钙化(VC)中的作用及miR-30b与自噬基因Beclin1的靶向关系。方法 将SD雄性大鼠随机分成对照组、模型组(CKD)、miR-30b组(CKD+miR-30b模拟物)和miR-30b阴性对照(NC)组(CKD+miR-30b NC)。使用全自动生化分析仪检测血清中血尿素氮(BUN)、血钙(Ca)、血磷(P)、血肌酐(Scr)的含量;苏木素-伊红(HE)染色观察肾组织和肾主动脉组织的病理学变化;茜素红染色观察主动脉钙化结节情况;使用试剂盒检测血管壁钙含量及碱性磷酸酶(ALP)水平;反转录荧光定量(qRT)-聚合酶链反应(PCR)检测主动脉miR-30b水平;Western印迹检测主动脉中Beclin1和LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白相对表达水平;透射电镜观察血管平滑肌细胞(VSMC)中自噬小体的变化;双荧光素酶测定miR-30b与Beclin1的靶向关系。结果 与对照组相比,模型组肾小球萎缩,间质增宽,肾小管扩张严重,炎性细胞浸润严重,血清中BUN、Ca、P、Scr水平、主动脉钙含量及ALP水平显著升高(P<0.05),自噬小体数量、miR-30b相对表达水平及Beclin1、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与模型组和miR-30b NC组相比,miR-30b组肾组织损伤明显减轻,血清中BUN、Ca、P、Scr水平、主动脉钙含量及ALP水平显著降低(P<0.05),细胞的自噬小体数量及Beclin1和LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论 miR-30b可通过靶向Beclin1对CKD大鼠的血管钙化起到保护作用。

猪瘟病毒非结构蛋白NS5A与Beclin1相互作用并促进病毒增殖

为探究宿主蛋白Beclin1在猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)非结构蛋白NS5A激活细胞自噬反应过程中的作用及具体分子机制,本研究在感染CSFV及表达NS5A蛋白的ST细胞中,利用qRT-PCR方法检测Beclin1、PI3K/Akt通路相关因子表达变化情况;利用激光共聚焦、Co-IP及GST-pulldown等方法研究Beclin1与NS5A相互作用关系;通过在ST细胞中过表达或敲低Beclin1,研究其对CSFV复制的影响。结果表明,ST细胞感染猪瘟病毒或外源表达NS5A蛋白,Beclin1转录和蛋白表达水平均显著升高,且PI3K/Akt通路相关因子表达水平与之呈正相关。此外,CSFV NS5A蛋白与Beclin1蛋白在细胞中存在共定位且具有相互作用。最后,作者发现在细胞中过表达Beclin1,对CSFV复制起到明显促进作用;反之,利用siRNA敲低Beclin1后,抑制PI3K/Akt通路活化,CSFV增殖表现出明显抑制效应。以上结果表明,Beclin1蛋白对CSFV复制具有促进作用,其机制是通过与NS5A的相互作用调控PI3K/Akt通路来实现。

miR-873通过靶向Beclin1基因调控细胞自噬促进支气管上皮细胞炎症与凋亡

目的:探究miR-873对支气管上皮细胞凋亡、自噬的影响,以及对Beclin1的调控作用。方法:使用miR-873 mimic转染16HBE细胞48 h,qRT-PCR检测miR-873的mRNA水平,并使用CCK-8实验评估细胞活力。使用ELISA试剂盒检测细胞上清液中IL-2、IL-6、IL-10和TNF-α的含量,并采用TUNEL染色法检测细胞凋亡情况。利用免疫荧光技术检测LC-3蛋白表达情况,以及通过qRT-PCR和Western blot技术检测Beclin1基因的mRNA和蛋白表达水平。同时,采用双荧光素酶报告基因技术检测miR-873与Beclin1的结合位点。结果:miR-873 mimic转染显著上调了16HBE细胞中miR-873的mRNA水平,抑制了16HBE细胞的增殖,并促进了其分泌IL-2、IL-6和TNF-α,同时抑制了IL-10的分泌。此外,miR-873还促进了16HBE细胞的凋亡并抑制了LC-3的表达。双荧光素酶报告基因证实miR-873与Beclin1基因存在结合位点,并可以靶向抑制Beclin1的mRNA和蛋白表达。结论:miR-873可能通过靶向Beclin1基因调控细胞自噬,从而促进支气管上皮细胞炎症与凋亡。

前置胎盘及合并胎盘植入组织中LC3、Beclin1、HMGB1表达及临床意义

目的:探究前置胎盘及胎盘植入组织中微管相关蛋白轻链3(LC3)、Beclin1及高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达及临床意义。方法:收集2019年1月-2020年12月本院收治的前置胎盘孕妇96例(前置组)和正常剖宫产孕妇75例(对照组),检测两组胎盘组织中LC3、Beclin1及HMGB1表达,并根据前置组孕妇是否合并胎盘植入分为植入组与未植入组,探究发生植入的危险因素。结果:前置组和对照组年龄无差异,前置组孕周小于对照组,孕次、产次、既往剖宫产次数和距上次剖宫产时间均大于对照组(P<0.05);前置组合并胎盘植入42例(43.8%)为植入组,未植入组54例(56.3%),植入组与未植入组年龄、孕周、孕次间无差异,产次、既往剖宫产次数、距上次剖宫产时间、前置胎盘类型、胎盘位置、LC3、Beclin1及HMGB1表达等均差异(P<0.05)。前置组胎盘组织中LC3(1.67±0.29)、Beclin1(1.58±0.43)及HMGB1(1.03±0.13)表达均高于对照组(1.06±0.12、1.07±0.12、0.68±0.09),植入组(1.93±0.37、1.72±0.52、1.13±0.15)高于未植入组(1.46±0.34、1.39±0.40、1.13±0.15)(均P<0.05)。经多因素logistic分析,影响孕妇发生前置胎盘的因素包括孕周、孕次、产次、既往剖宫产次数、与上次剖宫产间隔时间、LC3、Beclin1及HMGB1高表达;影响前置胎盘孕妇发生胎盘植入的因素包括产次多、既往剖宫产次数多、距上次剖宫产时间长、前置胎盘类型、胎盘位置、LC3、Beclin1及HMGB1表达。结论:LC3、Beclin1及HMGB1蛋白在前置胎盘中表达升高,且合并胎盘植入胎盘中表达更高,LC3、Beclin1及HMGB1蛋白升高是发生前置胎盘和胎盘植入的危险因素。

基于mTOR/Beclin1/LC3信号轴探讨制萎扶胃丸对胃癌前病变大鼠胃窦组织自噬的影响

目的:探讨制萎扶胃丸(ZWFW)对胃癌前病变(PLGC)大鼠胃窦组织哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/自噬关键分子酵母Atg6同系物(Beclin1)/微管相关蛋白1轻链3(LC3)信号轴关键分子表达的影响。方法:SPF级SD大鼠随机分为正常组,模型组,叶酸组,ZWFW低、中、高剂量组,除正常组常规饲养外,模型组、叶酸组、ZWFW低、中、高剂量组,采用N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)联合饥饱失常、乙醇灌胃、氨水自由饮用以及雷尼替丁饲料喂养五因素复合造模法建立PLGC大鼠模型后,分别用生理盐水、叶酸片水溶液(0.002 g/kg)、ZWFW低、中、高剂量水溶液(0.42,0.84,1.67 g/kg)予以治疗4周后剖腹取胃。采用苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠胃窦组织病理学变化,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)、蛋白免疫印迹法(Western blot)及免疫组化检测大鼠胃窦组织mTOR、Beclin1、微管相关蛋白1轻链3β(LC3B)的mRNA及蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠胃窦组织胀大,胃壁变薄,胃黏膜色泽苍白,皱襞萎缩浅平,走行紊乱,可见结节及赘生物;HE染色示:与正常组比较,模型组胃黏膜腺体排列拥挤、紊乱,细胞形态不一,可见大量杯状细胞,细胞浆嗜碱性,细胞核大、深染、不规则,黏膜肌层浸润破坏;与模型组比较,ZWFW显著改善了胃黏膜腺体结构排列紊乱和细胞异型性等病理表现。与正常组比较,模型组大鼠胃窦组织m TOR mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05),Beclin1和LC3B mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.05);与模型组比较,ZWFW中、高剂量组胃窦组织mTOR mRNA和蛋白表达降低(P<0.05),ZWFW低剂量组胃窦组织Beclin1、LC3B蛋白表达升高(P<0.05),中、高剂量组胃窦组织Beclin1、LC3B mRNA和蛋白表达升高(P<0.05)。结论:ZWFW可显著改善PLGC模型大鼠胃黏膜异常组织病理学表现,其机制可能与下调mTOR表达,上调Beclin1、LC3B表达进而促进自噬相关。

芍药甘草汤对Oddi括约肌功能障碍豚鼠自噬相关蛋白Beclin1和LC3-B的影响

目的探讨芍药甘草汤对豚鼠Oddi括约肌功能障碍的治疗作用及其对自噬相关蛋白Beclin1和LC3-B表达的影响。方法30只豚鼠随机分为正常组、模型组和芍药甘草汤治疗组,每组10只。模型组和芍药甘草汤组按0.6 mg/kg体质量静脉注射吗啡注射液以诱导Oddi括约肌功能障碍模型,正常组豚鼠予等体积0.9%氯化钠溶液静脉注射,每周三次;从第一次造模起,芍药甘草汤组按12.5 g/kg灌胃治疗;正常组和模型组分别予等体积0.4%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)灌胃,1次/d,共计4周。末次给药后禁食,收集血清和Oddi括约肌组织。全自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平;H&E染色检测Oddi括约肌病理变化;qRT-PCR检测c-Kit、Beclin1、LC3-B mRNA表达;Western blot检测c-Kit、Beclin1、LC3-B蛋白表达。结果(1)与对照组相比,模型组豚鼠血清ALT、AST水平显著增高(P<0.01);与模型组相比,芍药甘草汤组豚鼠血清ALT、AST水平均明显下降(P<0.05)。(2)H&E染色显示,模型组豚鼠Oddi括约肌纤维排列不规则、部分紊乱,并可见炎性细胞浸润,黏膜下纤维组织增生明显、平滑肌层显著增厚;与模型组相比,芍药甘草汤组豚鼠Oddi括约肌组织中纤维排列紊乱、炎性细胞浸润及黏膜下纤维组织增生明显改善。(3)与正常组相比,模型组豚鼠Oddi括约肌中c-Kit的mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01,P<0.05),自噬相关Beclin1和LC3-B的mRNA和蛋白表达明显增加(P<0.01,P<0.05);与模型组相比,芍药甘草汤组c-Kit的mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.01),Beclin1和LC3-B的mRNA和蛋白表达则显著减少(P<0.01)。结论芍药甘草汤可有效治疗吗啡诱导的豚鼠Oddi括约肌功能障碍,其作用机制可能是与减少细胞过度自噬、提升Cajal细胞活性有关。

Beclin1和PTEN蛋白在结直肠癌中的表达及预后价值

目的研究Beclin1和PTEN蛋白在结直肠癌组织和癌旁组织中表达的差异及其与结直肠癌预后的相关性。方法收集2007~2017年在解放军第九四医院就诊并手术的结直肠癌患者127例的结直肠癌癌灶组织和相对应的癌旁组织及每个患者的临床资料,行免疫组化检测癌组织和癌旁组织的Beclin1、PTEN的定位,并检测两个基因的表达阳性率,用实时PCR方法检测组织中Beclin1、PTEN mRNA表达,用Western印迹检测其中Beclin1、PTEN的蛋白表达,并比较2个基因在癌组织和癌旁组织中的表达差异。对Beclin1和PTEN的蛋白表达进行相关性分析,判断两个基因之间是否存在可能的调控关系。并对患者的临床资料进行生存分析,了解Beclin1、PTEN与结直肠癌患者预后间的关系。结果Beclin1、PTEN均主要定位于结直肠细胞的胞质中,胞核中有少量表达;Beclin1在癌灶组织中的基因和蛋白表达显著高于癌旁组织,而PTEN在癌组织中的mRNA和蛋白表达显著低于癌旁组织(P<0.01)。双变量直线分析结果显示,在癌和癌旁组织中Beclin1和PTEN的蛋白表达呈负相关(P<0.01,r=-0.47,R^(2)=0.223);Beclin1和PTEN的阳性表达率分别与腺癌分化程度、浸润深度、是否淋巴转移、TNM分期均有关,Beclin1和PTEN蛋白表达阳性患者的5年生存率显著高于阴性患者(P<0.05);患者生存期单因素分析中,肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期,Beclin1和PTEN蛋白的表达均与患者的生存期相关。Cox回归多因素分析提示,远处转移、淋巴结转移及Beclin1和PTEN蛋白的表达均是判断结直肠癌患者生存期的独立因素,Beclin1和PTEN蛋白为保护因子。两蛋白均呈阳性表达患者的存活率显著高于双阴性患者(P<0.05)。结论Beclin1和PTEN可能共同参与结直肠癌发病的病理过程,并对其预后可能存在一定的预测作用。

miR-873-5p通过靶向自噬相关基因Beclin1抑制肺癌细胞进展和抗血管生成的机制

目的 探讨微小RNA(miRNA)-873-5p通过靶向自噬相关基因Beclin1抑制肺腺细胞进展和抗血管生成的机制研究。方法 通过双荧光素酶报告验证miR-873-5p靶向Beclin1。将人肺癌细胞系A549随机分为4组:对照组、Mimic组、Mimic+Beclin1组和Beclin1组。通过质粒转染技术过表达miR-873-5p以及Beclin1。实时荧光定量PCR(q PCR)和Western blot检测RNA或蛋白的表达水平。分别通过CCK-8、克隆形成实验和流式细胞术检测细胞活力、增殖和凋亡,细胞划痕实验、Transwell实验和管生成实验检测各组的细胞迁移、侵袭和血管生成能力。结果 MiR-873-5p直接靶向Beclin1。过表达miR-873-5p抑制Beclin1 mRNA和蛋白的表达水平,过表达Beclin1显著逆转miR-873-5p对Beclin1的抑制作用。Mimic组的细胞活力和细胞增殖能力显著低于对照组,凋亡率高于对照组(P<0.05),Beclin1组的细胞活力和细胞增殖能力显著高于对照组,细胞凋亡率低于对照组(P<0.05),并且Mimic+Beclin1组的细胞活力和细胞增殖能力显著高于Mimic组,细胞凋亡率低于mimc组(P<0.05)。Mimic组的细胞迁移和侵袭能力显著低于对照组(P<0.05),Beclin1组的细胞迁移和侵袭能力显著高于对照组(P<0.05),并且Mimic+Beclin1组的细胞迁移和侵袭能力显著高于Mimic组(P<0.05);Mimic组的血管生成能力显著低于对照组(P<0.05),Beclin1组的血管生成能力显著高于对照组(P<0.05),并且Mimic+Beclin1组的血管生成能力显著高于Mimic组(P<0.05)。结论 MiR-837-5p可通过靶向抑制Beclin1的水平抑制肺癌细胞的生长、侵袭和血管生成,从而发挥抑制肺癌转移的作用。

QDPR通过调控Beclin1改善UUO诱导的大鼠肾间质纤维化

目的探讨醌型二氢生物喋呤还原酶(QDPR)在单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型肾间质纤维化中的作用及对Beclin1的影响。方法通过单侧输尿管结扎的方法构建UUO模型,Masson、COLⅠ染色和Western blot技术分析纤维化进展及QDPR和Beclin1的表达情况。慢病毒输尿管逆行注射构建过表达QDPR基因和空载对照UUO模型,评估慢病毒感染效率和QDPR表达情况,并检测QDPR过表达对纤维化进展和Beclin1表达的影响。结果UUO模型组较假手术组的胶原纤维表达水平增高(P<0.05),QDPR表达水平降低(P<0.05),Beclin1表达增高(P<0.05)。通过输尿管逆行注射慢病毒,成功感染肾脏,并能增加肾脏QDPR表达。过表达QDPR后,胶原纤维表达水平降低(P<0.05),且Beclin1表达水平下降(P<0.05)。结论过表达QDPR抑制了Beclin1的表达水平,改善了纤维化的进展,提示过表达QDPR可能通过抑制Beclin1进而抑制肾间质纤维化。

自噬相关蛋白Beclin1在食管鳞癌中表达特点及临床意义的meta分析

目的对自噬相关蛋白Beclin1在食管鳞癌(ESCC)中表达特点及临床意义进行系统评价。方法计算机检索建库至2021年12月Pub Med、Web of Science、中国知网、万方数据库、维普网中有关Beclin1在ESCC中表达特点及其与临床病理特征关系的文献,采用Rev Man 5.4进行meta分析。结果共纳入13项研究,包括ESCC患者1080例。meta分析结果显示,ESCC组Beclin1表达低于对照组(OR=0.09,95%CI:0.05~0.17,P<0.00001);高、中分化ESCC患者Beclin1表达高于低分化患者(OR=2.01,95%CI:1.49~2.72,P<0.00001);TNM分期Ⅰ~Ⅱ期ESCC患者Beclin1表达高于Ⅲ~Ⅳ期患者(OR=2.78,95%CI:1.76~4.41,P<0.0001);浸润深度为T_(1)~T_(2)期ESCC患者Beclin1表达高于T_(3)~T_(4)期患者(OR=2.16,95%CI:1.58~2.97,P<0.00001);无淋巴结转移ESCC患者Beclin1表达高于发生淋巴结转移的患者(OR=0.26,95%CI:0.14~0.49,P<0.0001)。结论Beclin1表达与ESCC临床病理特征密切相关,Beclin1可能是参与ESCC发生发展过程中的重要靶点。

HSF1与Beclin1在胰腺癌组织中相关性表达及其与患者预后的关系

目的 探讨热休克转录因子(HSF)1和Beclin1在胰腺癌组织中相关性表达及其与患者预后的关系。方法 观察新鲜及石蜡标本胰腺癌及癌旁组织HSF1和Beclin1 mRNA和蛋白表达情况,分析HSF1及Beclin1表达的相关性及两者对预测胰腺癌生存率的差异。结果 与癌旁组织和正常组织相比,癌组织中HSF1、Beclin1 mRNA和蛋白表达均显著升高(P<0.05)。磷酸化HSF1在胰腺癌中表达较多,在癌旁组织和正常组织中表达极少。石蜡标本胰腺癌组织中,总HSF1蛋白在癌组织中细胞质和细胞核均有表达,主要表达在细胞质,部分表达在细胞核,磷酸化HSF1部分表达在细胞质,有较多表达在细胞核。在石蜡标本癌旁组织和正常组织中,总HSF1主要表达在细胞质,而细胞核中表达较少,细胞质和细胞核中磷酸化HSF1表达极少。HSF1、Beclin1蛋白水平在不同分化程度的癌组织中表达趋势为高分化组<中分化组<低分化组,在不同TNM分期癌组织中表达趋势为Ⅰ期<Ⅱ期<Ⅲ期<Ⅳ期。HSF1与Beclin1蛋白水平与分化级别、TNM分期、是否远处转移及淋巴结转移明显相关(P<0.05)。HSF1与Beclin1表达呈正相关(P<0.05),均是预后独立风险因素。结论 HSF1与Beclin1在胰腺癌组织中高表达,两者之间呈正相关,能独立或协同影响胰腺癌病程进展。

2型糖尿病患者血清Beclin1水平变化及临床意义

目的:探讨2型糖尿病患者血清Beclin1水平变化及临床意义。方法:选取2021年11月至2022年6月青岛市市立医院内分泌科收入院2型糖尿病患者164例为糖尿病组,同期体检的36例健康人作对照组。收集相关资料,利用Elisa方法检测血清Beclin1水平。采用相关性分析糖尿病组中Beclin1与各因素的关系。结果:与对照组比较,糖尿病组血清Beclin1水平显著下降、左室舒张功能指标间隔e’、侧壁e’较低,而平均E/e’比值更高(P均<0.05)。在糖尿病组中,与高水平相比,低水平组糖尿病病程更长(P < 0.05);侧壁e’更低、平均E/e’比值更高,经单因素相关性分析、多元线性回归分析发现,糖尿病病程与血清beclin1呈独立负相关。结论:Becline1作为自噬的关键调节因子,其水平下降提示自噬可能是2型糖尿病发生发展的重要机制,且随着糖尿病病程的延长,自噬不足加重。

血清Beclin1水平联合PNI对乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭患者预后的预测价值

目的探讨血清Beclin1水平联合预后营养指数(PNI)对乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)患者预后的预测价值。方法选择HBV-ACLF患者184例(观察组),经规范治疗临床好转出院,随访90天,其中预后不良65例、预后良好119例,同期选择体检健康的志愿者57例(对照组)。采集两组外周静脉血,检测血清Beclin1、白蛋白以及全血淋巴细胞计数,计算PNI。收集HBV-ACLF患者临床资料,采用多因素Logistic回归模型分析HBV-ACLF患者预后不良的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清Beclin1水平和PNI对HBVACLF患者预后不良的预测效能。结果观察组血清Beclin1水平高于对照组,PNI低于对照组(t/U分别为8.576、-9.785,P均<0.01)。HBV-ACLF患者预后不良者血清Beclin1水平高于预后良好者,PNI低于预后良好者(t/U分别为7.817、-6.491,P均<0.01)。多因素Logistic回归分析显示,乙型肝炎表面抗原定量(OR=1.185,95%CI:1.009~1.391)、Beclin1(OR=1.717,95%CI:1.378~2.139)升高为HBV-ACLF患者预后不良的独立危险因素,甲胎蛋白(OR=0.982,95%CI:0.965~0.998)、PNI(OR=0.771,95%CI:0.693~0.859)升高则为其独立保护因素(P均<0.05)。ROC曲线分析显示,血清Beclin1水平和PNI单独与联合预测HBV-ACLF患者预后不良的曲线下面积分别为0.789、0.790、0.886,血清Beclin1水平联合PNI预测HBV-ACLF患者预后不良的曲线下面积高于二者单独(Z分别为3.744、3.630,P均<0.01)。结论血清Beclin1水平升高、PNI降低与HBV-ACLF患者预后不良密切相关;血清Beclin1水平和PNI对HBV-ACLF患者预后不良均有一定预测价值,二者联合时预测价值更高。