检测HIV-1新近感染的BED捕获酶免疫实验的重复性和稳定性评价

目的对BED捕获酶免疫实验(BED capture enzyme immunoassay,BED-CEIA)的重复性和稳定性进行评价。方法对在国家艾滋病参比实验室(参比室)和A、B两个艾滋病确证中心实验室,使用BED-CEIA方法对新近感染检测的实验数据进行统计。分别对在参比室和A、B两实验室进行检测的59、35和18块酶标板的质控品(NC、CAL、LPC和HPC)OD和OD-n的Mean、SD和C V进行统计。对3个实验室初筛和确认实验结果的一致性进行比较,得出R2值。使用同一考核血清盘,将11位不同实验人员的实验结果与参比室实验员的实验结果进行比较,得出R2值。结果在参比室进行的实验中,对OD-n的统计显示,质控品NC的C V为14.4%,LPC和HPC的C V值约为5%;在A实验室中,LPC和HPC的C V值均控制在10%以内;在B实验室中,LPC和HPC的C V值均控制在12%以内。3个实验室初筛和确认实验结果的R2值均达到了0.90以上。其他实验人员与参比室实验人员的结果实验比较显示,R2为0.9777,不同实验员之间可重复性强。结论BED-CEIA方法的稳定性和重复性均十分突出,可以在我国接受过专项培训的艾滋病确证中心实验室开展该项工作。

BED发病捕获酶联法检测宁夏男男性行为人群HIV新发感染

目的了解宁夏2011年哨点男男性行为人群(MSM)艾滋病病毒(HIV)新发感染情况,计算新发感染率。方法收集哨点监测人群男男性行为400例,应用BED HIV-1发病捕获酶免疫测定法(BED-CEIA)对HIV-1阳性的样本进行新发感染检测,计算新发感染率。结果 HIV-1感染率为3.75%,感染者中新发感染的比例为33.33%,新发感染率为2.48%(95%CI:0.31%～4.66%)。结论 BED-CEIA方法可应用于哨点男男性行为人群及其他人群,对其新近感染率的计算和估计具有实用性,对艾滋病防治政策的制定和调整具有参考作用。

滤纸片干血斑在HIV-1 BED-CEIA新发感染检测方法中的应用

目的探讨在HIV-1 BED-CEIA新发感染检测中应用滤纸片干血斑的价值。方法研究纳入22个艾滋病自愿咨询检测(VCT)中心10226名咨询者血浆及干血斑样本作为目标实施HIV抗体检测,对通过免疫印迹法(WB)明确诊断为350例HIV感染患者的血浆样本及干血斑样本需同时实施BED-CEIA检测,观察滤纸片干血斑在HIV-1 BED-CEIA新发感染检测方法中稳定性、重复性,对两种样本检测结果存在的差异性进行对比。结果在HIV-1 BED-CEIA新发感染检测中应用滤纸片干血斑稳定性、重复性较高,重复性R^(2)值可高达0.9551。350例HIV感染患者样本检测结果中,其中295例患者样本被同时评估为长期感染,53例患者样本被同时评估为新近感染,两种样本对HIV BED-CEIA新发感染评估判定结果呈一致性(R^(2)值=0.95),一致性为99.42%。血浆样本及干血斑样本得到不同结果,样本An值均处于临界值附近(P<0.05)。结论在HIV-1 BED-CEIA新发感染检测中应用滤纸片干血斑的价值较高,检测结果稳定性、重复性较好,虽然部分样本检测结果存在一定的差异,但与血浆样本检测结果两者之间存在较佳的等效性,可广泛应用于临床HIV-1 BED-CEIA新近感染检测中。

比较BED-CEIA法和LAg-Avidity EIA两种方法检测HIV-1新发感染的应用价值

目的探讨BED捕获酶联法(BED-CEIA)和限制性抗原亲和力酶联免疫方法(LAg-Avidity EIA)检测艾滋病病毒-1(HIV-1)新发感染的应用价值。方法选取2019年1月至10月在我院治疗的HIV-1新发感染者130例,抗病毒治疗者100例,均给予BED-CEIA和LAg-Avidity EIA方法检测。结果BED-CEIA和LAg-Avidity EIA判断新发感染正确率分别为77.69%和84.62%,差异比较无统计学意义(P>0.05);不同性别、年龄患者BED-CEIA和LAg-Avidity EIA判断新发感染正确率比较差异无统计学意义(P>0.05);ED-CEIA和LAg-Avidity EIA检查ODn值呈正相关(r=0.420,P<0.05);在抗病毒治疗者中,BED-CEIA和LAg-Avidity EIA误判新发感染率分别为17.00%和13.00%,比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论BED-CEIA法和LAg-Avidity EIA两种方法检测HIV-1新发感染均有较好的价值。

应用捕获酶联免疫测定法估算2010-2012年浙江省重点人群人类免疫缺陷病毒1型新发感染率

目的估计浙江省2010-2012年重点人群人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)新发感染情况及其发展趋势。方法收集浙江省2010-2012年665例HIV哨点监测阳性样本和4030例新报告确证阳性病例样本,应用BED HIV-1捕获酶联免疫测定法(BED HIV-1 capture enzyme immunoassay,BED-CEIA)检测新发感染,利用公式I=[F×(365/W)×R]/[N+F×(365/W)×R/2]×100%估算人群的HIV-1新发感染率,并对同期新报告确证阳性病例计算新发感染比例。结果浙江省2010-2012年HIV监测哨点重点人群的男男性行为人群(men who have sex with men,MSM)HIV-1新发感染率最高,分别为3.52%(2.22%～4.83%)、6.63%(4.65%～7.94%)和6.33%(4.83%～7.84%),其他人群均较低。浙江省2010-2012年报告阳性病例新发感染比例分别为27.08%、26.09%和30.35%,2011年和2012年MSM报告阳性病例新发感染比例分别为40.17%和42.05%。结论浙江省MSM人群HIV-1新发感染率2010-2011年增长较快,2011-2012年稍有下降但仍维持较高水平,其他人群相对较低。报告阳性病例中MSM人群新发感染比例也较高。浙江省MSM人群HIV流行形势仍然非常严峻,应加大对该人群的干预力度。

应用BED—CEIA方法估算陕西省2011年三类高危人群HIV-1新发感染率

目的估计陕西省2011年男男性行为者、吸毒者和性病门诊男性就诊者三类高危人群的艾滋病病毒（HIV）新发感染情况。方法使用酶联免疫试验（ELISA）和蛋白免疫印迹试验（WB）对陕西省2011年4～7月内15个哨点所监测到的800例男男性行为者、2400例吸毒者和2800例性病门诊男性就诊者进行HIV-1抗体筛查和确证，再应用BEDHI、L1捕获酶联免疫测定法（BEDHIV-1 capture enzymeimmunoassay，BED-CEIA）检测出其中的新发感染样品，从而估算其HIV-1新发感染率。结果陕西省2011年男男性行为者、吸毒者和性病门诊男性就诊者的HIV-1新发感染率分别为4．42％（2．19％～6．66％），0和0．39％（O．05％t0．73％）。结论陕西省男男性行为者HIV-1新发感染率较高，吸毒者和性病门诊男性就诊者的HIV1新发感染率相对比较低。

凉山彝族自治州2011—2013年基于BED捕获酶联免疫法估算HIV-1新发感染率

目的 了解凉山彝族自治州HIV感染情况及新发感染率。方法 收集凉山州2011-2013年每年医疗机构HIV监测人数分别为412 608例、393 699例及443 025例，用酶联免疫和蛋白印迹方法检测出HIV抗体阳性样本数量分别为4 480、3 999及4 719份，再应用BED捕获酶联免疫法（BED-CEIA）进一步检测，排除HIV-1既往阳性样本，得出新发感染所占比例，进而估算每年的HIV-1新发感染率。结果 凉山州2011-2013年HIV阳性感染率分别为1.09%、1.02%和1.07%，新发感染率（95% CI）分别为0.34（0.32～0.37）%、0.62（0.58～0.66）%和0.61（0.57～0.65）%。2011-2013年HIV新发感染人群主要集中在男性，分别为64.24%（433/674）、59.22%（504/851）和58.37%（495/848）；彝族分别为84.72%（571/674）、94.59%（805/851）和84.20%（714/848）；已婚人群分别为61.57%（415/674）、61.45%（523/851）和60.50%（513/848），文盲和小学文化程度人群分别为60.24%（406/674）、61.57%（524/851）和60.03%（509/848）。结论 HIV新发感染率比感染率更能反映艾滋病的流行状况，研究结果提示凉山州艾滋病疫情形势仍然严峻，需加大防控力度。

BED捕获酶联免疫方法在宿州市HIV-1新近感染监测分析中的应用

了解宿州市新报告HIV感染病例中新近感染病例特征,为开展有针对性的预防干预工作提供依据。应用BED捕获酶联免疫方法 （BED-CEIA）对2011-2013年宿州市新发现的65例HIV-1报告病例进行新近感染检测。结果显示：23例属于HIV-1新近感染病例,新近感染检出率35.39%;2011-2013年HIV-1新近感染率0.007%（95%CI0.005～0.009）;男性占86.96%（20例）;18～50岁占91.30%（21例）;农民/民工占56.52%（13例）;经性传播感染占95.65%（22例）。新近感染病例以基层劳动的男性、青壮年为主,人群性途径感染形式严峻;应采取有效的针对性干预措施,防止HIV由职业人群向一般人群蔓延。

限制性抗原亲和力与BED捕获酶免法用于HIV-1新发感染检测的比较研究

目的比较限制性抗原亲和力酶免法(简称LAg)与BED捕获酶免法(简称BED)用于人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)新发感染检测的结果,评价2种方法的适用性。方法应用LAg和BED 2种方法同时检测HIV抗体阳性急性感染期、发病期、常规报告病例样品,用Mc Nermar检验2种方法新发感染检出率和一致性。结果 24份HIV抗体阳性急性感染期病例样品,LAg判定新发感染23份(95.83%),BED判定新发感染24份(100.00%)。328份常规报告病例样品,LAg判定长期感染237份(72.26%),BED判定长期感染224份(68.30%)。71份发病期病例样品,LAg判定长期感染49份(69.01%),BED判定长期感染46份(64.79%)。Mc Nermar检验2种方法对常规报告病例、发病期病例样品及不同的CD4+T细胞计数判定新发感染结果一致性差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 LAg新发感染检出率及错判率低于BED,受CD4+T细胞计数影响较BED小,更加真实地反映新发感染情况。

人类免疫缺陷病毒新近感染及其检测技术的研究进展

人类免疫缺陷病毒(HIV)感染使全球面临严重问题,而对HIV新近感染的检测是估算HIV新发感染趋势研究的新方向。HIV核心蛋白p24抗原可早期检出因而用于HIV新近感染的检测,但因其敏感性低,对群体发病率的估计存在局限性;HIV核酸检测用于新近感染的判断敏感性和特异性都较高,尤其是集合核酸技术的应用降低了核酸检测技术本身的高成本;BED(指HIV-1特异的B、E和D亚型)捕获酶联免疫法的数据结果则更能反映出新近感染高危因素以及其他方面的变化规律,对评估HIV新发感染动态趋势起到积极作用。

2008-2009年北京市男男性行为者HIV-1感染率与新发感染率调查

目的了解北京市男男性行为者（MSM）人群HIV-1感染率与新发感染率情况。方法对北京市2008—2009年三轮MSM人群进行横断面调查，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）与蛋白印迹实验（WB）对监测样本进行初筛与确证实验。再对血清学确认为HIV-1阳性的样本进行BEDHⅢ捕获酶联法（BED方法）检测。结果在1833份监测样本中共筛出96份HIV-1阳性样本，其中进行BED方法检测的样本数为68例，判定为新近感染的样本为36例。三轮MSM人群HIV感染率分别为5．9％、5．0％、4．9％；三轮MSM人群新发感染率分别为4．83％（2．36％～7．54％）、4．83％（2．36％～7．54％）、2．65％（0．82％～4．55％）。结论北京市2008～2009年度MSM人群HIV的感染率与新发感染率均达到较高水平。

2011-2013年南京市报告HIV/AIDS患者新发感染状况

目的了解南京市报告HIV/AIDS患者的新发感染状况。方法收集2011-2013年南京市新发HIV/AIDS患者人口学特征、感染途径、样本来源等信息,应用BED HIV IgG捕获酶免疫法进行检测,计算每年新发感染比例并分析影响因素。结果 2011-2013年南京市报告HIV/AIDS患者中,3年的新发感染比例分别为23.89%、28.33%、30.22%,差异无统计学意义（P=0.09）。多因素分析结果显示,汉族人群（OR=2.30,95%CI：1.10~4.80）、检测咨询者（OR=2.01,95%CI：1.31~3.09）、专题调查人群（OR=1.82,95%CI：1.09~3.05）新发感染比例较高。结论南京市HIV/AIDS患者中新发感染比例较高,需加强主动监测和早期管理,减少二代传播者。

两种检测技术对比1990-2011年玉溪市暗娼HIV-1感染态势

目的分析1990-2011年玉溪市暗娼（FSWs）人群HIV-1感染态势，旨在合理估算HIV-1在玉溪市暗娼中的流行态势。方法时1990-2011年玉溪市相关场所的暗娼用HIV-1BED捕获酶免疫测定法（BED-CEIA）和微量HIV-1抗体明胶颗粒凝聚法（ML-PA）进行HIV-1新发感染率检测，并采用ML-PA和BED-CEIA对HIV-1新近感染态势进行估算。结果共计纳入样本20288份，检出HIV-1阳性214份，1990-1996年感染率均为0，1997-2011年为0．61％-1．40％，流行趋势差异有统计学意义（P〈0．05）。HIV-1新发感染率：ML-PA法2006-2011年为0．00～2．31／1000人年，BED-CEIA法2005-2011年为0．00～5．89／1000人年，流行趋势差异无统计学意义（P〉0．05）。结论玉溪市暗娼人群艾滋病流行处于较低水平，且呈下降趋势，两种检测方法的结论-致，但缺乏-致性。

新建HIV-1新发感染快速检测方法与ELISA法的比较研究

目的初步评价艾滋病病毒Ⅰ型(HIV-1)新发感染快速检测方法,在横断面现场调查人群样本中的应用能力,并分析抗病毒治疗对该方法的影响。方法应用该研究前期构建的金标银染免疫渗滤快速检测方法(简称快速检测法),检测2014年江西省国家级哨点新报告的HIV-1感染者和抗病毒治疗者的样本。将新发感染判定的结果与限制性抗原亲和力方法(LAg Avidity EIA,简称LAg法)、BED捕获酶免疫法(BED CEIA,简称BED法)进行一致性和相关性比较,进一步分析三种方法检测抗病毒治疗者样本的差异。结果纳入研究的新发感染者样本共122份,快速检测法与LAg法、BED法判定新发感染结果的一致率分别为94.26%和88.52%。快速检测法检测探针灰度值与LAg法和BED法的ODn值具有较高的相关性。R2分别为0.947 5与0.923 4。经配对卡方检验分析,快速检测法判定新发感染的比例显著低于BED法(P<0.001),而与LAg法差异无统计学意义(P=0.257)。纳入研究的抗病毒治疗者的样本共117份,快速检测法对其误判为近期的比率为16.24%(19/117),而BED方法和LAg方法的误判比率分别为16.24%(19/117)、14.53%(17/117)。另外,快速检测法对所有样本常规HIV抗体检测结果均正确。结论金标银染免疫渗滤快速检测方法检测HIV-1新发感染具有良好的准确性和实际应用性。但抗病毒治疗对快速检测法影响较大,应在横断面人群调查时删除抗病毒治疗样本。

HIV-1新发感染快速检测方法的建立与初步评价

目的建立用于I型艾滋病病毒(HIV-1)新发感染检测的斑点金免疫渗滤快速检测方法,并研究其可行性及适用性。方法以特定浓度的HIV-1多亚型重组gp41抗原作为探针,包被硝酸纤维素膜,胶体金标记的抗人IgG作为显色试剂,建立新发感染的快速检测方法。比较该方法与BED捕获酶联法、限制性抗原亲和力方法的一致性。结果采用已知阳转时间的样本用于快速检测方法的建立,检测5例已知感染时间的样本的结果全部正确。分别用3种方法检测90例样本,快速检测方法与BED方法的符合率为88.9%(80/90),与亲和力方法的符合率为94.4%(85/90),快速检测方法与这两种方法检测结果差异均无统计学意义(P>0.05)。结论斑点金免疫渗滤法检测HIV-1新发感染具有快速、简便、经济、直观的特点,可节省检测时间和成本,提高检测效率,具有良好的适用性。

2020年适用于宫颈癌初筛的人乳头状瘤病毒检测方法清单

采用高危型人乳头状瘤病毒(hrHPV)检测进行宫颈癌筛查可有效降低宫颈癌发病率和死亡率,但只有经过临床验证的人乳头状瘤病毒(HPV)检测方法才能用于宫颈癌筛查。2020年,全球至少有254种不同的HPV检测方法,其中超过90%缺乏监管评估或并未进行临床验证。基于此,该研究以国际验证标准(Meijer-2009)推荐的第二代杂交捕获法(HC2)和以GP5+/6+为引物的PCR-酶免疫测定法(PCR-EIA)为标准对照,对目前的HPV检测方法进行评估,在2015年系统综述的基础上更新符合国际验证标准(Meijer-2009)的hrHPV检测方法清单。

北京市2009-2011年部分新报告HIV病例中新发感染的流行病学分析

目的了解北京市近年新报告HIV病例和HIV-1新发感染病例流行特征及相关影响因素。方法对北京市2009年第一季度、2010年第一季度、2011年第二季度新报告HIV阳性并符合BED捕获酶联免疫法（BED—CEIA）检测标准的血清样本进行检测。根据社会人口学特征对新报告HIV病例及BED阳性病例分组并计算构成比，分析相关影响因素。结果2009年第一季度、2010年第一季度、2011年第二季度北京市新报告HIV并符合BED—CEIA检测标准的病例分别为274、236、356例，BED阳性率分别为35．0％、31．8％、33．7％，各年度新报告病例主要集中在男性（89．1％、88．6％、91．9％）、20～39岁（77．4％、75．8％、82．O％）、汉族（77．7％、88．6％、85．7％）及外地户籍人口（74．1％、80．5％、2011年数据缺失），经性传播病例构成比呈上升趋势（67．5％、76．2％、86．8％），其中男男性行为者（MSM）传播上升明显（44．9％、45．3％、62．6％），注射吸毒出现一定的下降（15.3％、8．1％、9．0％）。各年度BED阳性与阴性新报告HIV病例在性别、传播途径及样本来源构成比方面的差异有统计学意义（P〈0．05），病例年龄及婚姻状况构成比差异无统计学意义（P〉0．05）。结论近年北京市MSM人群在新报告HIV病例及HIV-1新发感染病例中所占比重较大，呈继续上升趋势。MSM人群是北京市HIV感染的高危人群。

南京市2013年MSM的HIV新发感染情况分析

目的 了解南京市男男性行为人群（MSM）艾滋病病毒（HIV）的感染状况,估算HIV在该人群中的新发感染率。方法 通过滚雪球方法 在南京市招募到656例MSM,进行问卷调查和HIV血清学检测;检出的HIV阳性样本,再应用BED HIV IgG捕获酶免疫法（BED-CEIA）检出其中的新发感染样本,进而估算该人群的HIV新发感染率。结果 656名调查对象平均年龄（31.12±10.80）岁（16-78岁）;未婚占67.8%;本省占68.3%;在本地居住时间2年以上占79.4%;大专及以上占57.3%。认同自己为同性恋者占62.5%,认同自己为双性恋者占31.7%。寻找性伴场所最多的为网络/论坛,占52.1%。其次为酒吧/会所,占16.0%。93.3%的调查对象掌握艾滋病预防控制知识;58.5%的调查对象在近6个月内与同性发生过无保护性肛交性行为。656份样本检测出HIV阳性64份,HIV感染率为9.76%。进行BED检测的59份HIV阳性样本中,20份被判定为新发感染,感染者中新发感染比例为33.90%;校正公式计算的HIV新发感染率为6.39%[95%可信区间（CI）：3.03%-9.76%]。HIV阳性病例中,判定为新发感染的病例CD＋4T淋巴细胞计数均值高于判定为长期感染病例,均值差异有统计学意义。结论 南京市MSM的HIV感染率处于较高水平,新发感染情况不容乐观,必须加大综合干预力度,促进该人群改变行为。

2014-2018年山东省MSM哨点HIV-1新发感染研究

目的分析山东省2014-2018年MSM哨点HIV-1新发感染率,全面了解新发感染情况。方法按照全国艾滋病哨点监测实施方案要求,用实验室方法对2014-2018年采集的MSM哨点人群血液样本进行HIV抗体检测和HIV-1新发感染检测,计算HIV抗体阳性率和HIV-1新发感染率等指标。结果2014-2018年山东省8个MSM哨点共监测15820人,HIV抗体阳性656人,总阳性率为4.15%。2014-2018年HIV抗体阳性率分别为4.41%(135/3060)、4.55%(146/3210)、4.57%(151/3307)、3.91%(124/3169)和3.25%(100/3074);HIV-1新发感染率分别为4.16%、3.25%、3.44%、2.77%和3.06%。2014-2018年山东省8个MSM哨点中,HIV抗体阳性率和HIV-1新发感染率排前三位的是烟台、济南和淄博市,抗体阳性率分别是8.84%(179/2024)、6.92%(148/2140)和6.33%(119/1879);HIV-1新发感染率分别为7.42%、6.29%和6.66%,远高于全省总体水平,其他哨点HIV抗体阳性率均低于全省总体水平。结论山东省MSM的HIV感染情况相对严重,不同哨点之间差别明显应继续加强宣传干预等措施。

西安市2013-2015年男男性行为者HIV新发感染情况分析

目的了解西安市男男性行为者（MSM）艾滋病病毒（HIV）感染情况,估算该人群中的HIV新发感染率。方法 2013-2015年通过四轮横断面调查,对2441例MSM进行问卷调查及血清学检测,对HIV阳性的样本,再进行BED HIV-1IgG捕获酶免疫法（BED-CEIA）检测,以此估算该人群的新发感染率。结果 2441例MSM的平均年龄为（28.95±7.52）岁（16～70岁）;未婚占69.8%,汉族占99.2%,陕西省户籍占84.2%,在当地居住时间2年以上占81.3%,文化程度大专及以上占78.1%,认为自己是同性恋的占73.4%,最主要交友场所为网络/交友软件的占83.6%,艾滋病知识知晓率为85.8%。共筛查出HIV阳性179例,筛查阳性率7.33%,接受BED检测的158例样本中,71例为新近感染,四轮调查的新发感染率分别为7.20%[95%可信区间（CI）：3.41%～10.99%]、9.18%（95%CI：5.06%～13.31%）、6.85%（95%CI：3.09%～10.60%）、4.88%（95%CI：1.84%～7.92%）,合计新发感染率为7.00%（95%CI：5.11%～8.90%）。近六个月与临时性伴发生同性性行为是否使用安全套、近六个月是否使用如RUSH的助性剂、近一年是否接受过HIV检测、梅毒检测结果4个因素,对MSM新近感染HIV有统计意义（P〈0.05）。结论西安市艾滋病防治各种干预检测工作对疫情的控制是有效的,但仍需继续加强干预检测力度,遏制艾滋病疫情向一般人群的蔓延。