Annexin Ⅰ基因转染对BEP2D细胞生长的影响

目的：研究AnnexinⅠ基因cDNA转染对永生化人支气管细胞系BEP2D生长的影响。方法：pT7T3D质粒经NotⅠ和XhoⅠ双酶切获得人AnnexinⅠ基因cDNA片段，亚克隆至真核表达载体pCI－neo，构建人AnnexinⅠ基因其核表达载体pCI－AXI。通过采用脂质体介导转染技术，将AnnexinⅠ的真核表达重组质粒和空载体质粒分别导入永生化人支气管细胞系BEP2D；合成AnnexinⅠ反义寡核苷酸，观察AnnexinⅠ基因对细胞生长的影响。结果：pCI－AXI转染永生化BEP2D细胞后，AnnexinⅠ的表达比永生化BEP2D细胞和空载体转染细胞提高了1．5倍。pCI－AXI转染细胞倍增时间为27h，较永生化细胞（37h）、空载体转染细胞（33h）明显缩短，流式细胞仪分析表明，AnnexinⅠ表达升高后促进G0／G1期细胞进入S期和G2／M期。永生化细胞、pCI－neo和pCI－AXI转染三种BEP2D细胞的接种效率分别为49．4％，57．87％，82．53％，pCI－AXI转染细胞形成的集落数明显高于其它两种细胞（P＜0．002），并且细胞呈复层生长趋势；pCI－AXI转染细胞在软琼脂中的克隆形成率为0．01％，永生化细胞和空载体转染细胞在软琼脂中不能形成克隆。反义寡核苷酸（50mol／L）能显著抑制BEP2D细胞的生长（P＜0．05）。结论：AnnexinⅠ具有促进BEP2D细胞增殖。