补阳还五汤对血瘀证大鼠血管内皮细胞黏附分子表达的影响

目的研究补阳还五汤对血瘀证大鼠血管内皮细胞黏附分子表达的影响。方法采用免疫组织化学和RT-PCR方法观察补阳还五汤不同剂量对血瘀证大鼠血管内皮细胞细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、血小板-内皮细胞黏附分子-1(PECAM-1)和诱生型一氧化氮合酶(iNO S)表达的影响。结果模型组ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1、iNO S高表达,补阳还五汤能减少造模动物ICAM-1、VCAM-1、PECAM-1、iNO S的表达,而且随着药物剂量的减少,各分子表达呈递增趋势,具有明显的量效关系。结论补阳还五汤能显著降低血瘀证大鼠血管内皮细胞黏附分子高表达,且量效关系明显。

补阳还五汤对急性脑缺血大鼠血清CD63和CD62P因子表达的影响

目的探讨补阳还五汤(黄芪,当归尾,赤芍,地龙、桃仁、红花、川芎)对急性脑缺血大鼠血清溶酶体颗粒糖蛋白63(CD63)和血小板α颗粒膜糖蛋白140(CD62P)细胞因子的影响。方法采用大脑中动脉线栓法建立大鼠急性局灶性脑缺血模型。将SPF级SD雄性大鼠100只随机均分为假手术组和模型组(生理盐水),氯吡格雷组[6.75 mg/(kg·d)],补阳还五汤高[26 g/(kg·d)]、低剂量组[6.5 g/(kg·d)]。连续给药14 d后观察和比较各组大鼠神经功能评分、脑梗死面积和血清CD63和CD62P水平变化情况。结果与模型组相比,氯吡格雷组、补阳还五汤高剂量组均能显著降低动物的神经功能评分(P<0.01)、增加体质量(P<0.05,P<0.01)和减少脑梗死面积(P<0.01和P<0.05)。酶联免疫法结果显示,模型组大鼠血清CD63、CD62P均较假手术组升高,补阳还五汤高、低剂量组与模型组比较,均能降低CD63和CD62P水平,差异有显著性(P<0.01和P<0.05),尤以高剂量组较为明显。结论补阳还五汤可能下调CD63、CD62P因子表达,减轻急性脑缺血模型大鼠的神经功能损伤和减少脑梗死面积。

补阳还五汤及其有效部位对大鼠脑缺血再灌注后caspase表达的影响

目的研究补阳还五汤及其有效部位生物碱、苷对大鼠脑缺血再灌注后脑组织caspase-1、3、8表达的影响。方法采用颈内动脉线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞(M CAO)再灌注模型,以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定缺血脑组织中caspase-1、3、8 mRNA的表达。结果脑缺血2 h再灌注22 h后,模型组caspase-1、3、8表达较假手术组均显著增强(P<0.05)。生物碱组、苷组caspase-1表达显著低于模型组(P<0.05);补阳还五汤组、生物碱组、苷组、三七总皂苷组caspase-3与模型组比较均显著降低(P<0.05);生物碱组caspase-8表达较模型组显著降低(P<0.05)。三七总皂苷组caspase-8表达较假手术组显著增强(P<0.05)。结论补阳还五汤及其有效部位通过抑制缺血后脑组织caspase-1、3、8的表达,从而有可能对抗脑缺血再灌注后神经细胞凋亡,保护缺血脑组织。

补阳还五汤有效组分对血管内皮细胞抗血栓功能及蛋白激酶C的影响

目的探讨补阳还五汤及其有效组分生物碱、苷对凝血酶诱导的血管内皮细胞抗血栓功能改变及蛋白激酶C(PKC)活化的影响。方法以凝血酶(10 U/mL)作用于培养的人脐静脉内皮细胞(ECV304),同时加入药物,24 h后测定上清液中组织型纤溶酶原激活物(tPA)和纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)水平、细胞组织因子(TF)、组织因子途径抑制物(TFPI)、凝血酶调节蛋白(TM)mRNA表达及PKCα蛋白表达。结果凝血酶作用内皮细胞后,tPA释放增加(P<0.01),TF、TFPI mRNA表达增强(P<0.05),而PAI-1释放及TM mRNA表达无显著性变化(P>0.05);PKCα表达增强(P<0.05)。补阳还五汤可抑制凝血酶诱导的tPA释放增加(P<0.01),生物碱对tPA释放增加无显著影响(P>0.05);苷(1.25 mg/mL)可使凝血酶诱导的tPA分泌增加(P<0.05);原方、生物碱(2 mg/mL)和苷(5 mg/mL)均可抑制内皮细胞分泌PAI-1(P<0.01)。原方、生物碱(1,2 mg/mL)和苷均可抑制凝血酶诱导的TF mRNA表达增强;生物碱(0.5和1 mg/mL)可抑制TFPI mRNA表达(P<0.05);各药对TM mRNA表达无显著影响;原方、生物碱和苷均可抑制凝血酶诱导的内皮细胞PKCα表达的增强(P<0.01)。PKC激活剂佛波酯(PMA)刺激内皮细胞后,PKCα被激活(P<0.01);PKC抑制剂H7作用于PMA刺激的内皮细胞后,PKCα表达增强不明显,PAR-1受体抑制剂CATG作用于凝血酶刺激的ECV304细胞后,PKCα表达显著抑制(P<0.05)。结论凝血酶可诱导内皮细胞抗血栓性发生变化。补阳还五汤原方、生物碱和苷对凝血酶诱导的血管内皮细胞抗凝、纤溶功能的改变具有调节作用,使血管内皮细胞的抗凝、纤溶作用趋于正常,其作用可能主要是通过抑制凝血酶诱导的PKCα的激活而介导的。生物碱和苷类有效组分可能为该方抗血栓作用的药效物质基础。

补阳还五汤联合西药防治冠脉支架植入后再狭窄的临床研究

目的探讨补阳还五汤联合西药防治冠脉支架植入术后再狭窄的临床疗效。方法将50例患者随机分为治疗组和对照组各25例,治疗组以补阳还五汤联合常规西药治疗,对照组常规西药治疗,以6个月为1个疗程.观察两组中医证候疗效及支架植入治疗后血管再狭窄的发生情况。结果中医证候疗效比较治疗组总有效率为92.0%,对照组总有效率为60.0%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组冠脉再狭窄率为8.0%,对照组为32.0%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论补阳还五汤联合西药对冠脉支架植入术后再狭窄具有一定防治作用,并可减轻中医症候,在临床应用中尚未发现明显副作用。

补阳还五汤中生物碱类化合物的分离与结构鉴定

目的研究补阳还五汤的抗血栓有效部位及其活性成分.方法用多种色谱、核磁共振波谱和单晶X-衍射方法对补阳还五汤水煎液的生物碱类化合物进行了系统的分离和结构鉴定.结果分离并鉴定了4个生物碱类化合物,分别为N-(3′-马来酰亚胺)-5-羟甲基-2-吡咯甲醛(Ⅰ)、4-氨甲酰基-2-吡咯甲酸(Ⅱ)、N-(1′-D-去氧木糖醇基)-6,7-二甲基-1,4-二氢-2,3-喹喔啉二酮(Ⅲ)及2,3,4,9-四氢-1H-吡啶骈[3,4-b]吲哚-3-羧酸(Ⅳ).结论以上化合物均首次从补阳还五汤中分离得到且化合物Ⅰ～Ⅲ为新化合物.

喂饲补阳还五汤的大鼠血清中阿魏酸的高效毛细管电泳分析

目的 采用高效毛细管电泳法测定补阳还五汤及给药大鼠血清中阿魏酸的含量。方法 以毛细管区带电泳分离分析待测样品中的阿魏酸 ,内标法定量 ,紫外检测 ,缓冲液为 2 5 m mol/ L 硼砂 -甲醇 (85∶ 15 ) ,未涂层融硅毛细管 (5 2 cm× 5 0μm,有效长度 30 cm ) ,分离电压 2 0 k V,压力进样 3s,检测波长 32 0 nm ,温度 30℃。结果 在上述条件下 ,阿魏酸在 6 min内得到很好的分离 ,血清中阿魏酸的加样回收率为 97.2 0 % ,补阳还五汤中阿魏酸的回收率为 10 3.2 8% ,RSD分别为 3.73%和 0 .91% (n=3)。结论 该方法可为血清样品及复方制剂中阿魏酸的含量测定提供参考。

补阳还五汤合大秦艽汤加减治疗中风后遗症

脑血管意外俗称中风，临床分为出血性、缺血性、混合性三类，是一组以脑部缺血及出血性损伤为主要临床表现的疾病。本文就中风进行了详细阐述，并运用补阳还五汤合大秦艽汤加减治疗中风后遗症，疗效显著。

补阳还五汤合牵正散治疗周围性面瘫150例

目的：观察补气活血、祛风通络类中药治疗周围性面瘫的临床疗效。方法：对我院中医针灸科收治的门诊面瘫（周围性面瘫）病人均采用补阳还五汤（黄芪，当归尾，赤芍，川芎，地龙，桃仁，红花）配合牵正散（白附子，僵蚕，全蝎）按中医辨证分型。随证加减治疗患者150例，一周为一疗程并观察其疗效。结果：150例中147例治愈，2例显效（属于年老体弱），1例有效（因车祸外伤引起），无效0例，总有效率为100％。结论：本方法通过补气活血、祛风通络治疗周围性面瘫疗效显著。值得临床推广使用。

针药结合治疗中风的效果分析

目的：观察针药结合治疗中风的疗效。方法：将我院110例中风患者随机分为治疗组及对照组，对照组患者均予西医常规治疗，治疗组在对照组基础上加用补阳还五汤和针刺治疗。结果：经过治疗，治疗组总有效率为91．9％，显著高于对照组的74．5％，治疗组患者的神经功能缺损程度评分显著低于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。两组患者均未见明显不良反应。结论：针药结合治疗中风可互补其短，内外兼治，有助于患者肢体及语言的恢复，提高患者的生活质量。

补阳还五汤含药血浆和血清对缺氧损伤大鼠BMECs纤溶系统和黏附分子表达影响及与体内实验的比较研究

目的:比较补阳还五汤含药血清和含药血浆对缺氧培养的大鼠脑微血管内皮细胞(BMECs)纤溶系统和黏附分子的表达与体内实验真实值的接近程度,为半体内实验选择含药血浆还是含药血清提供参考依据。方法:用颈内动脉线栓法建立局灶性脑缺血模型,缺氧培养箱孵育BMECs,采用ELISA法测定PAI-1、t PA的表达,RT-PCR法检测ICAM-1、VCAM-1 mRNA的含量,Western Blot法测定ICAM-1、VCAM-1蛋白的含量。结果:补阳还五汤含药血浆较含药血清更显著降低缺氧损伤大鼠BMECs PAI-1、增强t PA水平,含药血浆和含药血清均能明显降低ICAM-1、VCAM-1、ICAM-1 mRNA及VCAM-1 mRNA含量,与空白血浆、空白血清比较,差异显著(P<0.05);半体内实验的含药血浆与体内实验真实值各指标相关系数均高于含药血清。结论:含药血浆比含药血清更接近体内真实情况,在进行半体内实验研究中药复方对纤溶系统和黏附分子蛋白及mRNA表达的影响时,特别是研究纤溶系统PAI-1和t PA指标的表达时,建议优先选择血浆药理学方法。

补阳还五汤联合BMSCs对心肌缺血再灌注损伤模型大鼠心肌的防护作用

目的研究补阳还五汤联合骨髓间充质干细胞(BMSCs)对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠心肌的防护作用及BMSCs迁移的的影响。方法 60只Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、干细胞组、补阳还五汤+干细胞组,结扎冠状动脉左前降支(LAD)方法复制MIRI大鼠模型,分别采用生理盐水和补阳还五汤灌胃14 d。生化法检测血清肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)及乳酸脱氢酶(LDH)水平,血清抗氧化因子丙二醛(MDA)浓度,血清超氧化物歧化酶(SOD)活性情况及一氧化氮(NO)含量。超声心动图检测大鼠心功能,HE染色检测心肌组织病理形态,小动物活体成像系统观察荧光GFP蛋白标记的BMSCs在体内移行分布情况,免疫荧光检测心肌组织BMSCs含量。结果与干细胞组比较,补阳还五汤+干细胞组大鼠左室舒张末经(LVIDd)和左室收缩末经(LVIDs)显著减小、而射血分数(EF)增加(P<0.05);血清cTnI、LDH、CK-MB水平均明显降低(P<0.05);血清SOD活性、NO含量均升高,MDA含量均降低(P<0.05)。HE染色结果显示,补阳还五汤+干细胞组大鼠心肌细胞结构恢复正常,肌纤维排列整齐,细胞间质有少量水肿,有少量的炎症细胞浸润,但细胞界限清楚。小动物活体成像系统显示,假手术组和模型组无明显GFP蛋白BMSCs移行分布,补阳还五汤+干细胞组GFP表达强度明显的强于干细胞组,且心脏部位BMSCs的浓度显著高于干细胞组(P<0.05)。免疫荧光检测结果显示,补阳还五汤+干细胞组大鼠心肌组织BMSCs含量明显高于干细胞组(P<0.05)。结论补阳还五汤能减轻移植BMSCs大鼠心肌缺血再灌注后损伤,对心肌具有保护作用,其机制与减轻细胞膜脂质过氧化反应,防护再灌注期心肌细胞的氧化应激损伤有关,同时补阳还五汤能够促进BMSCs向MIRI模型大鼠心肌组织迁移,提高BMSCs的归巢效率。