肾癌组织中BHD、RASSF1A、SPINT2基因启动子的甲基化研究

目的:检测肾癌组织中伯特-霍格-杜贝(BHD)、Ras相关结构域家族(RASSF)1A、丝氨酸蛋白酶抑制剂(SPINT)2基因启动子的甲基化状态,探讨其在肾癌发病中的可能作用。方法:收集肾肿瘤组织标本24份,其中透明细胞癌19份、错构瘤2份、癌旁组织3份,应用甲基化特异性聚合酶链反应法分别检测其BHD、RASSF1A、SPINT2基因启动子区CpG岛甲基化状态。结果:19例透明细胞癌同时检出3种抑癌基因甲基化3例,2种抑癌基因甲基化9例,1种抑癌基因甲基化7例。2例错构瘤中检出1种抑癌基因甲基化1例,3例癌旁组织中检出2种抑癌基因甲基化1例。检出BHD基因甲基化9例,均为透明细胞癌。检出RASSF1A基因甲基化8例,其中透明细胞癌7例,癌旁组织1例。检出SPINT2基因甲基化20例,其中透明细胞癌18例,错构瘤1例,癌旁组织1例。结论:肾癌组织中BHD、RASSF1A、SPINT2基因启动子区存在甲基化状态,抑癌基因甲基化可能在肾癌的发病机制中起重要作用。

BHD基因在人肺腺癌A549细胞的表达及其对A549细胞转移能力的影响

目的了解BHD基因在肺癌细胞中的表达部位及其在影响肺癌细胞转移、运动方面的作用。方法制备BHD真核表达质粒，转染肺腺癌细胞，用免疫荧光法检测Folliculin蛋白在肺癌细胞中的表达位置；筛选sRNAi片段，选取有效抑制片段转入肺癌细胞，与转入BHD质粒的肺癌细胞对比，用Transwell实验了解BHD基因对肺癌细胞运动方面的影响。结果转入BHD质粒后，A549细胞质内出现明显的Folliculin蛋白表达，Transwell实验显示，转入BHD质粒能抑制A549细胞的侵袭能力，而转入BHDsiRNA片段的A549细胞运动迁移能力升高。结论BHD表达产物Folliculin蛋白在肺癌细胞的胞质内表达，BHD可能是肺癌转移抑制基因。