子宫内膜癌患者血清miR-425-5p与miR-155表达水平

目的 分析子宫内膜癌(endometrial cancer, EC)血清中微小RNA(micro RNA,miR)-425-5p与miR-155表达意义及对近期疗效的预测价值。方法 选取100例EC患者,设为疾病组。另选取98例健康女性,设为健康组。比较2组研究参与者血清miR-425-5p、miR-155水平;根据疗效将疾病组分为有效组(28例)、无效组(72例),比较2组血清miR-425-5p、miR-155及可能影响因素差异;采用logistic回归分析法分析疾病组近期疗效影响因素;绘制受试者操作特征(ROC)曲线,分析血清miR-425-5p、miR-155对EC近期疗效预测价值。结果 疾病组血清miR-425-5p、miR-155相对表达量均高于健康组,差异有统计学意义(P<0.05);无效组血清miR-425-5p、miR-155相对表达量均大于有效组,差异有统计学意义(P<0.05),经logistic回归分析血清miR-425-5p、miR-155是EC近期疗效的影响因素;ROC曲线结果显示,血清miR-425-5p、miR-155单独及联合预测疾病组无效的曲线下面积(AUC)分别为0.815、0.792、0.846。结论 miR-425-5p与miR-155在EC血清中异常高表达,两者联合可作为预测该病近期疗效的有效参考依据。

miR-425-5p靶向TGF-β1/Smad2信号通路减少小鼠增生性瘢痕组织胶原纤维沉积

目的探究miR-425-5p在增生性瘢痕(HS)形成中的作用及机制。方法通过RT-qPCR和Western blot检测了16对HS组织和正常皮肤组织中miR-425-5p、转化生长因子-β1(TGF-β1)和SMAD家庭成员2(Smad2)的水平。将成纤维细胞分为9组:对照组(control组)、miR-425-5p-mimic组、NC-mimic组、miR-425-5p-inhibitor组、NC-inhibitor组、TGF-β1-pcDNA3.1组、NC-pcDNA3.1组、miR-425-5p-mimic+NC-pcDNA3.1组和miR-425-5p-mimic+TGF-β1-pcDNA3.1组,并采用Lipofectamine 2000对细胞进行转染处理。通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-425-5p和TGF-β1的靶向关系。通过博莱霉素(BLM)诱导小鼠增生性瘢痕,然后将小鼠随机分为3组,对照组(NC-agomir)、模型组(NC-agomir+BLM)和转染miR-425-5p干预模型组(miR-425-5p-agomir+BLM),小鼠均治疗21 d。通过Masson三色染色检测HS组织的胶原纤维沉积。通过RT-qPCR和Western blot检测组织和细胞中miR-425-5p、Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、TGF-β1和Smad2的表达水平。结果与正常组相比,HS组的miR-425-5p表达水平降低(t=4.242,P<0.001),而TGF-β1 mRNA和蛋白表达水平均升高(P<0.001)。与对照组相比,miR-425-5p-mimic组的Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、α-SMA、TGF-β1和Smad2的mRNA和蛋白表达水平均降低(P<0.05)。与control组相比,miR-425-5p-inhibitor组的Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、α-SMA、TGF-β1和Smad2的mRNA和蛋白表达水平均升高(P<0.05)。与miR-425-5p-mimic共转染后,TGF-β1-3′-UTR-WT组的相对荧光素酶活性比TGF-β1-3′-UTR-MUT组降低(P<0.05)。与miR-425-5p-mimic+NC-pcDNA3.1组相比,miR-425-5p-mimic+TGF-β1-pcDNA3.1组的Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、α-SMA、TGF-β1和Smad2的mRNA和蛋白表达水平均升高(P<0.05)。与NC-agomir+BLM组相比,miR-425-5p-agomir+BLM组的相对胶原蛋白含量降低(P<0.05),miR-425-5p表达水平升高,而TGF-β1的mRNA和蛋白表达水平均降低(P<0.05)。结论miR-425-5p在HS组织中表达下调,上调miR-425-5p通过抑制TGF-β1/Smad2信号通路抑制胶原沉积和HS形成。

miR-425-5p通过靶向HSPB8表达介导心肌缺血再灌注损伤

目的:探讨miR-425-5p及其下游靶点HSPB8对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的影响及相关机制。方法:将AC16细胞随机分为control组,H/R组,H/R+miR-NC组,H/R+miR-425-5p inhibitor组,H/R+miR-425-5p mimic组,H/R+OE-NC组,H/R+OEHSPB8组,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法测定AC16的增殖能力;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹法(western blotting)分别检测凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax、Bcl-2的mRNA和蛋白表达情况,荧光素酶报告基因检测验证miR-425-5p及HSPB8间的靶向关系。结果:miR-425-5p在MIRI患者中表达显著高于正常人群;HSPB8在MIRI患者中表达低于正常人群;与control组相比,H/R组、H/R+miR-NC组、H/R+miR-425-5p mimic组、H/R+OE-NC组细胞活力降低(P<0.01),凋亡、炎症及氧化应激水平上升(P<0.01);与control组相比,H/R+miR-425-5p inhibitor组和H/R+OE-HSPB8组细胞活力显著增强(P<0.01),凋亡、炎症及氧化应激水平下降(P<0.01);与H/R+OE-NC组相比,H/R+OE-HSPB8组凋亡、炎症和氧化应激水平显著降低(P<0.01);靶向关系结果显示,miR-425-5p和HSPB8之间存在靶向作用关系。结论:miR-425-5p可以靶向HSPB8介导MIRI,抑制miR-425-5p可通过上调HSPB8来减轻MIRI。

艳椒425高产高效栽培技术要点

为探讨适宜当地发展的辣椒品种及其栽培管理方式,丰富富川供应粤港澳蔬菜种类,提高蔬菜产业效益和抗市场风险能力,近年来富川开展了艳椒425品种的种植示范,推广面积达到350 hm2,取得了较好的示范效果。简述了艳椒425的特征特性;总结了育苗、整地、移栽、田间生产管理、病虫害防治等艳椒425高效栽培管理技术;介绍了艳椒425的采收加工。

家用液体洗涤产品防腐剂使用趋势及新型防腐剂BIOBAN^(TM)425

介绍了家用洗涤产品中防腐剂的使用趋势,同时说明了新型防腐剂BIOBANTM425的特点和使用方式。

环状RNA circ-TAGLN在卵巢癌细胞中的表达及对卵巢癌细胞增殖和侵袭的影响

目的:探讨环状RNA(circRNA)circ-TAGLN在卵巢癌细胞中的表达情况和过表达circ-TAGLN对卵巢癌细胞增殖和侵袭的影响及分子机制。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)技术分析circ-TAGLN在卵巢癌细胞系SK-OV-3、OC3、Caov-3、A2780、HO-8910和正常卵巢上皮细胞IOSE80中的表达差异。分别转染pcDNA3.1对照质粒(NC组)和pcDNA3.1-circ-TAGLN质粒(circ-TAGLN组)至SK-OV-3细胞。利用平板克隆实验和Transwell实验检测卵巢癌SK-OV-3细胞的增殖和侵袭能力。双荧光素酶报告实验验证circ-TAGLN与miR-425-5p的靶向关系。利用RT-qPCR技术分析过表达circ-TAGLN对SK-OV-3细胞中miR-425-5p表达的影响。Western blot检测过表达circ-TAGLN对SK-OV-3细胞中PI3K/AKT信号通路蛋白p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、VEGF、eNOS表达的影响。结果:与IOSE80细胞相比,circ-TAGLN在卵巢癌细胞系SK-OV-3、OC3、Caov-3、A2780、HO-8910中低表达(均P<0.05)。NC组与circ-TAGLN组中circ-TAGLN相对表达分别为(1.01±0.34)和(7.56±1.07),circ-TAGLN组SK-OV-3细胞中circ-TAGLN表达高于NC组(P<0.01)。在SK-OV-3细胞中,过表达circ-TAGLN后细胞增殖能力和侵袭能力均下降(均P<0.01)。circ-TAGLN靶向结合miR-425-5p(P<0.01)。NC组与circ-TAGLN组SK-OV-3细胞中miR-425-5p表达分别为(5.57±0.91)和(1.01±0.17),与NC组相比,过表达circ-TAGLN后SK-OV-3细胞中miR-425-5p表达被抑制(P<0.01)。在SK-OV-3细胞中,过表达circ-TAGLN后细胞中PI3K/AKT信号通路蛋白p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、VEGF、eNOS表达下降(均P<0.01)。结论:circ-TAGLN在卵巢癌细胞中低表达,并能通过靶向降低miR-425-5p表达抑制卵巢癌细胞的增殖和侵袭,circ-TAGLN可作为卵巢癌潜在的分子治疗靶点。

单生朝天椒新品种艳椒425的选育

对培育的朝天类型辣椒自交系进行早期配合力测定,经过5年试验,育成朝天、单生加工型辣椒杂一代新品种艳椒425。该品种中熟,生长势强,株高91.8 cm、株幅84.5 cm,果实小尖椒型,果长8.9 cm、果宽1.1 cm、果肉厚0.14 cm,青椒果绿色,老熟果大红色,抗病强,丰产性好,辣椒素、辣红素含量高,品质优良,风味上佳,一般产量30.0 t/hm2。适宜在中国西南各省市及湖北、湖南等地推广种植。

活化剂HYP协同“425”制剂抗日本血吸虫卵肉芽肿病变的效果

目的:了解活化剂HYP能否增强“425”制剂抗日本血吸虫卵肉芽肿病变的效果。方法:采用皮肤感染日本血吸虫尾蚴制成BALB/c肝内虫卵肉芽肿病变模型,通过检测和计算肝内肉芽肿平均直径、面积和体积观察“425"制剂的治疗作用,以及活化剂HYP的协同增效作用。结果:用药2周与对照组相比,其肝内虫卵肉芽肿平均直径下降率42.12％,平均面积下降65.71％,平均体积下降80.4％,用药3～4周时平均直径、面积和体积下降率分别为31.61％～47.48％,55.14％～73.19％和71.15％～75.86％。单用“425”制剂2～3周,肝内肉芽肿大小与感染对照鼠无显著性差异,应用4周时其平均面积和体积分别下降14.15％和7.76％。结论:活化剂HYP具有明显的协同增强抗宿主肝内日本血吸虫卵肉芽肿病变的效果。

miR-425-5p通过调控靶基因HGF促进急性心肌梗死诱导心肌纤维化的分析

目的探讨miR-425-5p与肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)的相关性,并分析两者的调控作用影响急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)进程诱导心肌纤维化(myocardial fibrosis,MF)的发生。方法采用qRT-PCR检测miR-425-5p在AMI患者及AMI小鼠中的表达水平;荧光素酶报告基因法分析HGF及Western blot检测HGF与miR-425-5p的相关性;应用CCK8和流式细胞法分别检测miR-425-5p转染后对心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)增殖能力的影响;通过心脏超声心动图检测AMI小鼠心肌注射miR-425-5p mimics慢病毒4周后的左室射血分数(left ventricular ejection fractions,LVEF);采用qRT-PCR检测心肌注射miR-425-5p mimics慢病毒的AMI小鼠中Nppa mRNA的表达量;通过Masson’s trichrome染色法检测小鼠4周后左心室纤维化;应用CD31抗体对小鼠左室切片进行免疫组化分析; ELISA检测AMI小鼠心脏中miR-425-5p与HGF的蛋白表达量。结果 miR-425-5p与AMI存在相关调控机制; miR-425-5p可下调HGF的mRNA和蛋白表达,而miR-425-5p inhibitor可抑制该下调; miR-425-5p可抑制细胞的增殖;与心肌注射miR-425-5p mimics慢病毒的AMI小鼠相比,AMI小鼠的左心室纤维化增加; miR-425-5p可促进心肌梗死的发展; miR-425-5p过表达的AMI小鼠心脏中CD31阳性毛细血管的数量明显低于AMI小鼠; miR-425-5p能通过抑制HGF的表达导致AMI小鼠心脏中血管的生成受到抑制,导致心功能降低。结论 miR-425-5p通过抑制HGF的表达,显著促进AMI诱导MF的病理进程。

microRNA-425-5p对3T3-L1前体脂肪细胞增殖、分化的影响

为了探究miR-425-5p对小鼠3T3-L1前体脂肪细胞增殖、分化的影响效应,本试验采用实时荧光定量PCR检测miR-425-5p组织和细胞表达水平;运用CCK8、EdU、油红染色、甘油三酯含量分析等分别检测miR-425-5p对前体脂肪细胞增殖、分化的影响;利用生物信息学软件和双荧光素酶报告试验分别预测、验证miR-425-5p调控前体脂肪细胞分化的靶基因。结果表明,miR-425-5p在肥胖小鼠脂肪组织中低表达,在前体脂肪细胞增殖、分化过程中动态表达;与阴性对照相比,过表达miR-425-5p可促进前体脂肪细胞增殖,抑制脂肪细胞分化标志基因(PPARγ、C/EBPα、FAS等)表达,减少脂滴和甘油三酯积累;抑制miR-425-5p表达可抑制前体脂肪细胞增殖,阻止前体脂肪细胞诱导分化。在前体脂肪细胞分化过程中,过表达或抑制miR-425-5p可分别抑制或促进IGF1基因表达;与阴性对照相比,过表达miR-425-5p可抑制IGF1基因3′-UTR荧光活性,而突变miR-425-5p种子序列与IGF1基因3′-UTR的绑定位点可解除该抑制效果。综上所述,miR-425-5p可促进3T3-L1前体脂肪细胞增殖,并可直接靶向IGF1负向调控其分化。

人类miR-425靶基因预测及生物信息学特征分析

目的采用生物信息学工具分析人类miR-425(has-miR-425)的转录调控、靶基因功能和蛋白-蛋白互作,为研究其在细胞调控过程中的作用提供理论依据。方法应用miRBase、UCSC Genome Browser等数据库,分析has-miR-425在不同物种的序列情况,以及在基因组上下游10kb以内的Cp G岛分布情况、转录起始位置(TSS)、转录因子结合位置(TFBS)等;选择Target Scan、Pic Tar、MiRanda三种计算方法预测has-miR-425的靶基因,取三个预测结果的交集靶基因分别进行注释描述和富集分析。采用STRING软件对交集靶基因进行蛋白与蛋白互作网络分析。结果has-miR-425序列在人、大鼠、猕猴、黑猩猩之间呈现高度保守性;has-miR-425可能具有独立的启动子。共预测到319个潜在的靶基因,这些靶基因主要参与蛋白去磷酸化、细胞氮化合物反应、氮化合物反应等生物学过程;主要分子功能为酶结合、转移酶活性、金属离子结合等;主要细胞组成为:膜结合细胞器、细胞内膜有界细胞器、细胞核等。蛋白-蛋白互作分析显示靶基因中PAFAH1B1与DYNC1I2、MAP2K6与ZAK之间的关联度最高。结论通过对has-miR-425转录调控元件、靶基因的分析,为has-miR-425在细胞调控中的功能与调控机制提供了重要的理论依据。

miR-425-5p靶向ZNF423基因调控Notch信号通路促进胃癌细胞侵袭转移

目的探究miR-425-5p靶向ZNF423基因通过Notch信号通路对胃癌细胞侵袭转移的影响和机制。方法qRT-PCR和Western blot检测人胃上皮细胞GES-1和3种胃癌细胞(AGS、SGC-7901和BGC-823)中miR-425-5p和ZNF423的表达水平。以SGC-7901细胞为研究对象,构建抑制miR-425-5p表达的细胞株,qRT-PCR检测miR-425-5p的表达水平,Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力,Western blot检测迁移侵袭和Notch信号通路相关蛋白的表达水平。双荧光素酶报告基因实验和Western blot验证miR-425-5p和ZNF423的靶向调控关系。结果与GES-1细胞相比,3种胃癌细胞中miR-425-5p的表达显著上调,ZNF423的表达显著下调。稳定抑制miR-425-5p表达的细胞株构建成功。抑制miR-425-5p可显著抑制MMP-2、MMP-9、Notch1、Hes5和Hey1蛋白的表达,抑制SGC-7901细胞的迁移和侵袭。沉默ZNF423可逆转抑制miR-425-5p表达对胃癌细胞迁移和侵袭的抑制作用。沉默ZNF423还可逆转抑制miR-452-5p表达对胃癌细胞中Notch信号通路的抑制作用。结论miR-425-5p通过下调ZNF423表达激活Notch信号通路,进而促进胃癌细胞的侵袭和转移。

SIMOTION D425在接箍上下料机械手上的应用

为了提高加工过程中的生产效率及定位精度,介绍了西门子新一代运动控制系统—SIMOTION D425在接箍车丝机专用上下料机械手中的应用。具体阐述了该系统的工艺流程、电气结构和软件设计方法。该设备已投入实际生产,实践应用结果表明,该系统运行稳定可靠,符合生产要求。

基于SIMOTION D425运动控制系统的CAM曲线

介绍了CAM曲线在西门子SIMOTION D425自动化系统中的应用。为达到伺服电机能运行任意给定曲线的目的,采用CAM曲线方法,即运用Scout软件仿真从轴跟随主轴的响应运动并得到相应仿真曲线,从而可以直观地看出配置曲线和仿真曲线之间的关系。实践证明,CAM曲线功能不但可以实现这一目的,而且使得主轴与从轴的关系更加灵活。

杂交香稻新组合川香优425的选育与栽培技术

川香优425是四川省农业科学院作物研究所用川香28A与成恢425配组育成的三系杂交香稻新组合,具有株叶型好、抗性强、产量较高、品质较优、熟期早等特点,适宜在南方稻作区作一季中稻种植,2007年通过四川省农作物品种审定委员会审定。

抗病中早熟水稻恢复系成恢425的选育及应用

成恢425是四川省农科院作物研究所以绵恢502/Lemont的后代20832作母本,辐恢838作父本进行杂交,并经多代选育而成的籼型三系恢复系,具有早熟、抗病、配合力强、制种产量高等特点;与不同类型不育系配组,均表现出较强的杂种优势,其中,川香9号、川香优425、瑞优425分别于2004年、2007年和2010年通过四川农作物品种审定委员会审定。

CD44、CD133耦连miR-425装载纳米脂质体对结直肠癌干细胞PDL-1表达的下调作用

目的探究CD44、CD133耦连miR-425装载纳米脂质体对结直肠癌干细胞PDL-1表达的下调作用。方法选择结直肠癌细胞系HCT116分选出CD44、CD133/1+细胞,进行miR-425装载纳米脂质体转染,分为对照组(转染control载体)、实验组(转染miR-425慢病毒载体),空白组以纳米脂质体代替,测定干细胞生长状态,检测PDL-1表达水平。结果分选的CD 133/1+细胞呈圆形,12 h后开始贴壁生长,状态良好。qRT-PCR检测显示实验组的miR-425的相对表达水平为(182.44±22.19),对照组与空白组分别为(1.84±1.11)和(1.67±0.98),实验组明显高于对照组与空白组(P<0.05)。MTT检测结果表明,与空白组(0.78±0.22)、对照组(0.81±0.17)比较,实验组(0.24±0.15)的HCT116细胞生长速度明显减慢(P<0.05)。空白组与对照组的细胞增殖率分别为(0.48±0.14)与(0.51±0.18),都明显高于实验组的(0.30±0.11)。Western blot检测分析显示实验组、对照组、空白组的PDL-1相对表达量分别为(0.33±0.13)、(0.76±0.21)和(0.82±0.15),实验组明显低于对照组与空白组(P<0.05)。结论 CD44、CD133耦连miR-425装载纳米脂质体能抑制结直肠癌干细胞PDL-1的表达,从而显著抑制干细胞的生长、增殖能力。

姜黄素通过调控miR-425表达对炎症性肠病大鼠炎性反应的影响研究

目的研究姜黄素通过调控miR-425表达水平对炎症性肠病(IBD)大鼠炎性反应的影响。方法选取30只成年雄性SD大鼠作为研究对象,随机分为对照组、IBD组和IBD+姜黄素组,每组10只。采用三硝基苯磺酸(TNBS)灌胃的方法构建IBD模型,对照组给予等量15%乙醇溶液灌胃。建模后,IBD+姜黄素组每日给予姜黄素(100 mg/kg)灌胃,IBD组每日给予蒸馏水(100 mg/kg)灌胃。连续灌胃7 d后,采集各组的静脉血,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测miR-425表达水平,采用流式细胞术(FCM)检测辅助性T细胞17(Th17细胞)和调节性T细胞(Treg细胞)的百分比,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测促炎因子白细胞介素-6(IL-6)、IL-17和抑炎因子转化生长因子-β(TGF-β)的表达水平。喂养期间观察各组的体质量、粪便性状和隐血情况,并比较各组疾病活动度指数(DAI)的差异。结果与对照组相比,IBD组静脉血中miR-425表达水平升高(P=0.002),Th17细胞百分比升高(P<0.001)、Treg细胞百分比降低(P=0.008),IL-6、IL-17表达水平升高(P<0.001)、TGF-β表达水平降低(P<0.001),DAI评分升高(P=0.004)。与IBD组相比,IBD+姜黄素组miR-425表达水平降低(P=0.002),Th17细胞百分比降低(P<0.001)、Treg细胞百分比升高(P=0.008),IL-6、IL-17表达水平降低(P=0.002,P<0.001)、TGF-β表达水平升高(P<0.001),DAI评分降低(P=0.004)。结论姜黄素可通过下调miR-425表达水平来减轻IBD大鼠的炎性反应和改善病情。

免疫增强剂“425”对日本血吸虫感染小鼠虫卵肉芽肿病变作用的研究

应用免疫增强剂当归根提取液,其化学成分主要含有阿魏酸,VitB_(12)和聚乙炔类化合物(代号为“425”),ip 25mg/d·14,至小鼠感染日本血吸虫后14—34d,肝组织内特异性抗体(IgG)为362.67±162.21—480.00±289.45,显著高于对照组的66.67±39.68—245.33±101.50(P<0.01或0.05)。虫卵肉芽肿病变则明显减弱,小鼠虫卵肉芽肿反应增长比为5.24±1.04—3.95±0.77,对照组为6.69±1.19—5.29±0.94。而且还使肝组织内虫卵抗原水平降低。结果表明,免疫增强剂“425”可诱发宿主产生免疫调节作用,控制虫卵肉芽肿病变。

中药“425”对血吸虫卵肉芽肿病变免疫调节作用的机理研究

本文试验结果发现，应用“４２５”制剂可明显增强宿主脾细胞在体外自发性的及在ＬＰＳ刺激下的增生反应，明显抑制其在ＰＨＡ刺激下的增生反应，而用药后宿主脾细胞在特异性抗原刺激下的增生反应未见明显改变；虽然用药组感染鼠的脾脏明显小于对照组，但血清及虫卵肉芽肿培养上清中特异性抗体ＩｇＧ水平未见明显改变。研究结果表明，“４２５”制剂具有双重非特异性免疫调节作用。该制剂抑制宿主肝组织内虫卵肉芽肿病变的机理除了在于其能非特异地增强宿主Ｂ细胞介导的体液免疫应答外，该制剂对宿主体内Ｔ细胞介导的细胞免疫应答的非特异性抑制作用可能起了更重要的作用。