微孔板法测定乳粉中叶酸含量的不确定度分析

目的:对微孔板法测定乳粉中叶酸含量的不确定度进行分析评估。方法:按GB 5009.211—2022中微孔板法测定婴儿配方乳粉中叶酸含量,依据JJF 1059.1—2012、CNAS-CL01-G003:2021和CNAS-GL05:2011等不确定度评定方法和指南对影响检测结果的各种试验因素进行分析、计算,得到合成标准不确定度及扩展不确定度。结果:扩展不确定度U 95=22.08μg/100 g(k=2),样品中叶酸含量为(282.33±22.08)μg/100 g。不确定度主要来源于接种微孔板过程、标准曲线拟合和测量重复性。结论:移液器的准确度和微生物因素对试验结果影响较大,需保证仪器质量并严格按照标准化流程操作以降低不确定度。

微孔板式微生物法测定婴幼儿配方乳粉中叶酸、泛酸和生物素含量

目的建立微孔板式微生物法测定婴幼儿配方乳粉中的叶酸、泛酸和生物素含量的方法。方法按照国标方法分别提取婴幼儿配方乳粉中的叶酸、泛酸和生物素,在96孔微孔板中接种含有相应测试菌悬液的培养基,再分别加入标准系列溶液和试样提取液,培养后用酶标仪测定吸光度,根据标准曲线分别计算试样中的叶酸、泛酸和生物素含量,并考察测定方法的检出限、精密度和加标回收率。结果叶酸、泛酸和生物素标准曲线的相关系数均大于0.999,检出限分别为0.10μg/100 g、0.013 mg/100 g、0.57μg/100 g,相对标准偏差(relative standard deviations,RSDs)分别为1.02%、0.94%、1.08%,加标回收率分别为94.6%~100.0%、95.3%~103.3%、94.5%~100.1%。结论该微孔板方法操作简单、成本较低,结果准确性和重现性良好,适用于婴幼儿配方乳粉中叶酸、泛酸和生物素含量的大批量检测。

分枝杆菌液体培养与微孔板法分枝杆菌药敏试验对结核感染的检测效果分析

目的:分枝杆菌液体培养与微孔板法分枝杆菌药敏试验对结核感染的检测效果。方法:选取2022年5月—2023年5月贵阳市公共卫生救治中心收治的结核感染患者痰标本52例为观察对象,对所有标本均采取分枝杆菌液体培养与传统固体罗氏培养法,采用微孔板法完成分枝杆菌药敏试验,分析微孔板法药敏结果检测效能。结果:微孔板法药敏法对乙胺丁醇特异性高于传统比例法药敏法,差异有统计学意义(P=0.022);两种药敏试验方法对利福平、异烟肼及链霉素的敏感性、特异性、准确性,对乙胺丁醇的敏感性、准确性比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:微孔板法分枝杆菌药敏试验可为多种药物进行药敏试验,为临床药物疗效提供重要参考依据,有助于结核病防控。

预包被微孔板式微生物法测定饮料中维生素B_(12)的方法研究

目的:针对目前国标法未涉及微生物法测定饮料中维生素B_(12)的情况,通过验证预包被微孔板式微生物法测定饮料中维生素B_(12)的可行性和可靠性,为实验室开展该项目和创立新方法提供有力支持。方法:利用德氏乳杆菌生长依赖维生素B_(12)的特性,根据德氏乳杆菌生长状况与维生素B_(12)含量呈正相关关系,通过测定样品吸光度值与标准曲线进行比对得出维生素B_(12)的含量。结果:此方法操作简便、线性良好,R^(2)可达0.998 3,回收率在95.5%~104.6%,重复实验10次,品牌1、2的RSD值分别为1.367%和0.597%,试剂盒质量稳定性较好。结论:此方法适用于饮料中维生素B_(12)的测定,为实验室开展该项目和新方法的研究奠定了基础。

微孔板法检测番茄灰霉病菌对杀菌剂的敏感性

【目的】利用酶标仪建立番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)对杀菌剂敏感性的快速、高效测定方法。【方法】以OD增加值作为评价指标,确立微孔板法检测灰霉病菌敏感性的测试条件,并对啶酰菌胺、嘧菌酯、乙霉威、甲基硫菌灵、异菌脲、苯醚甲环唑6种常用杀菌剂对灰霉病菌孢子萌发和菌丝生长的抑制效果进行评价,将结果与孢子萌发法和菌丝生长速率法所得结论进行比对。【结果】微孔板法测定条件为:酶标仪测定波长为630nm,测试培养基为灰霉分生孢子萌发刺激液(PDE),孢子悬浮液浓度为8×105—1.6×106个/mL,培养条件为21℃黑暗条件下振荡(150 r/min),孔中加入孢子悬浮液与药剂培养24 h作为药剂对孢子萌发抑制作用的测试时间,孔中孢子悬浮液培养12 h后再加入药剂培养12—24 h为药剂对菌丝生长抑制作用的测试时间。测试结果与孢子萌发法和菌丝生长速率法所得结论基本一致。用该方法测得啶酰菌胺对山东省3个地区57株灰霉病菌分生孢子萌发及菌丝生长的EC50均值分别为1.9311和5.6488μg.mL-1。【结论】微孔板法综合了孢子萌发法和菌丝生长速率法的优势,测试速度快、结果准确、重现性好,具有良好的实用性。

微孔板试剂盒法检测婴幼儿配方奶粉中叶酸质量分数

研究如何提高微生物法测定叶酸的准确性和稳定性。对微生物法测定叶酸的关键控制点、主要影响因素进行探讨分析。采用IFP微孔板试剂盒检测婴幼儿配方奶粉中叶酸质量分数,相对传统微生物方法具有操作方法简便、结果准确、重复性好的特点。

用微孔板改良凝聚胺法交叉配血试验的效果评价

目的建立一种简便、快速的无须离心的微孔板凝聚胺法(以下简称微孔板法)进行交叉配血。方法将传统的凝聚胺法改进,采用自制的微孔板替代传统的试管,省去离心进行输血前交叉配血。结果将微孔板法同手工凝聚胺法灵敏度进行比较,两者检测抗-D、抗-E结果无差异,抗-C手工凝聚胺法稍高于微孔板法(1∶512对1∶256),交叉配血结果两者没有差异。结论微孔板法是一种可行的交叉配血方法。该方法无须试管及离心设备,具有简便快速、经济有效的特点。

微孔板杂交法测定椰毒假单胞酵米面亚种的DNA-DNA同源性

采用一种新的DNA DNA杂交方法—微孔板法对椰毒假单胞菌酵米面亚种及伯克霍尔德氏菌属中 1 1个种的DNA DNA同源性进行测定。结果发现椰毒假单胞菌酵米面亚种与唐菖蒲伯克霍尔德氏菌及椰毒伯克霍尔德氏菌的DNA DNA同源性均大于 75% ,建议这 3个种应合并为同一个种 ,命名为唐菖蒲伯克霍尔德氏菌 (Burkholderiagladioli)。

激光共聚焦显微镜和改良微孔板法观察细菌生物膜形成

目的利用激光共聚焦显微镜(CLSM)和改良微孔板法观察细菌生物膜形成,探索细菌生物膜检测的有效手段。方法烧伤患者植入性导管分离的金葡菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌,经体外分别培育24、48、72h和5d后,先后用CLSM和改良微孔板法,观察细菌生物膜形成和黏附的过程与特点。结果鲍曼不动杆菌、金葡菌、铜绿假单胞菌形成生物膜的时间、生物膜的形态与特点都有显著的差异。结论 CLSM和改良微孔板法是观察和检测细菌生物膜形成过程的有效手段。

端粒重复序列扩增法结合微孔板杂交法定量检测端粒酶活性

目的探讨定量检测端粒酶活性的非放射性检测方法。方法将端粒重复序列扩增测定法（ＴＲＡＰ）与微孔板杂交 相结合建立了非放射性检测方法，对３例正常肝组织和４例肝癌患者治疗前后的肝癌组织、瘤旁组织、肝癌凋亡组织 进行检测。结果肝癌组织具有比较高的端粒酶活性，而正常肝组织和瘤旁组织无此酶活性，肝癌凋亡组织端粒酶活性 显著降低。结论 该定量分析方法简单、灵敏、特异性强，可以比较准确地反映组织的端粒酶活性状态。

微孔板杂交法检测结核分枝杆菌的初步临床应用

目的 :对 PCR-微孔板杂交法的临床应用进行评价。方法 :取临床标本 2 6 8份分别进行抗酸染色、培养、PCR扩增产物电泳、PCR微孔板杂交四种方法的比较。结果 :在 2 16份临床高度怀疑有结核分枝杆菌感染的患者标本中 ,PCR-微孔板杂交法检出阳性为 98例 ,其检出率高于 PCR-电泳法 (91/ 2 18)、培养法 (81/ 2 18)和抗酸染色法(5 6 / 2 18)。5 0份临床证实无结核分枝杆菌感染的病人标本 ,四种方法均未能检出结核分枝杆菌。结论 :PCR-微孔板杂交法是高度敏感。

利用响应面法研究微孔处理杨木单板的胶合性能

利用响应面法分析研究了经微孔处理后的杨木单板的胶合性能。通过对杨木单板进行微孔处理,可使胶黏剂通过微孔渗入单板体内,增加杨木单板的本体强度,同时也可使相邻胶层透过微孔形成一体而增加单板的胶合强度等,以期制造出一种高性能的地板基材。结果表明:在试验范围内,随微孔孔径增大,孔距减小和施胶量的增加,其胶合强度增加;随热压压力增加,胶合强度先增强,当压力超过0.8 MPa,胶合强度反而降低。

PCR-微孔板杂交-ELISA法检测巨细胞病毒感染

建立PCR-微孔板杂交-ELISA法检测人血清标本中巨细胞病毒DNA。将5’端标记生物素的PCR扩增产物与5’端标记地高辛的探针呈液相混合,90℃ 2min,55℃,1min杂交。杂交后产物被链霉亲和素酶标板固定,经酶标记抗地高辛标记抗体结合显色。本试剂检测灵敏度为2.5×104 copies/mL,比传统PCR和ELISA敏度性高,特异性强,与单纯疱疹病毒Ⅰ型和Ⅱ型,风疹病毒、EB病毒、腺病毒核酸无交叉反应,批内CV为8.9%,批间CV为10.5%。该法可用于定性和定量检测HCMV DNA。

自动加样快速微孔板法在疑难配血中的应用

目的 在疑难配血中建立一种自动化、快速、准确的供血者标本血型抗原筛查方法.方法 使用自动加样快速微孔板法对188个供血者全血标本进行C、e、M、Fya、Jka抗原检测,同时使用手工试管法进行平行实验;记录并对比上述两种方法筛查总过程使用的时间,筛查出的供者标本数.用微板法和试管法对抗-C、抗-e、抗-M、抗-Fya、抗-Jka试剂进行抗体效价测定.结果 微孔板法、试管法均筛查出相同血型抗原阴性供者,微孔板筛查所需要的总时间较短.效价测定显示微板法灵敏度与手工试管法相同.结论 微孔板法在疑难配血中筛查特定抗原阴性的供者,具有快速、准确的效果.

微孔板杂交法检测肺癌端粒酶活性的研究

目的 :研究肺癌端粒酶活性及其临床应用价值。方法 :采用端粒重复序列扩增—微孔板杂交法 ,对 10 0例切除肺癌标本 ,分别取癌中央组织、癌旁 1cm、远癌组织 3块组织 ,进行端粒酶活性分析 ,同时送病理检查。结果 :端粒酶在肺癌组织中央部位的阳性检出率为 10 0 % ,癌旁 1cm为 84% ,远癌组织为 8% ,不同病理类型的肺癌端粒酶活性水平 ( A/mg蛋白 )分别为 :鳞癌 2 8例 0 .12 2 ,腺癌 6 8例 0 .12 5 ,小细胞癌 4例 0 .12 7,无显著性差异。结论 :端粒酶活性在切除肺癌标本中的测定 。

微孔板速率法在丙氨酸氨基转移酶检测中的应用

目的研究微孔板速率法在丙氨酸氨基转移酶检测中的可行性和应用价值。方法取体检和筛查合格的8 327例无偿献血者血清标本和135例ALT异常献血者血清标本,用全自动生化分析仪法,微孔板速率法分别测定ALT活性。结果全自动生化分析仪法,微孔板速率法对8327例无偿献血者血清标本的检测,有显著相关性(r=0.945 1),结果无显著性差异(P>0.05)。两种方法检测135例阳性血样,微孔板速率法有漏检现象,但无统计学意义,结果差异无显著性,变异系数为6.32%,符合要求。结论微孔板速率法是一种理想的检测ALT活性的方法,与全自动生化分析仪法联合应用或除全自动生化分析仪外,首选微孔板速率法,可提高检测的准确性,减少输血传染病的风险。

微孔板试剂盒检测婴幼儿配方奶粉中维生素B_(12)方法探讨

研究如何提高微生物法测定维生素B12的准确性和稳定性。对微生物法测定维生素B12的关键控制点、主要影响因素进行探讨分析。采用IFP微孔板试剂盒检测婴幼儿配方奶粉中维生素B12含量,相对传统方法具有操作方法简便、结果准确、重复性好的特点。

聚合酶链反应-微孔板杂交法检测结核杆菌的临床应用及其评价

目的 对聚合酶链反应 ( PCR) -微孔板杂交法检测结核杆菌的临床适用性和可行性进行评价。方法 收集 1130份临床标本 ,分别用抗酸染色、培养、PCR电泳及 PCR微孔板杂交法进行结核杆菌检测 ,并结合临床诊断和疗效观察对实验结果进行分析。结果 10 0份临床证实无结核病的体液标本经抗酸染色和 PCR电泳 ,分别有 1例和 2例假阳性 ,但经培养和 PCR微孔板杂交法未查出阳性 ;其余 10 30份高度怀疑含有结核杆菌的体液标本的检测结果 ,以 PCR微孔板杂交阳性检出例数最高 ( 481/ 10 30 ) ,其次为 PCR电泳 ( 40 6 / 10 30 )、培养 ( 36 5 /10 30 )以及抗酸染色 ( 2 5 6 / 10 30 ) ;χ2 检验结果显示 ,PCR微孔板杂交的结核杆菌阳性检出例数与其它三种方法比较均呈显著或极显著性差异 ( P<0 .0 0 83及 P<0 .0 0 17)。结论 PCR-微孔板杂交方法是特异、灵敏、准确、快速的结核杆菌检测方法 。