siRNA干扰BIRC6对肾癌786-O细胞凋亡和自噬的影响

目的研究杆状病毒IAP重复序列蛋白6(BIRC6)在肾癌组织中的表达,并探讨BIRC6沉默对786-O细胞凋亡和自噬的影响。方法收集2016年2月~2018年12月梅州市人民医院肾癌手术切除标本20例,通过免疫组化检测BIRC6蛋白在肾癌组织中的表达水平。将肾癌786-O细胞分为两组,对照siRNA组和BIRC6 siRNA组;通过lipofectamine 2000将BIRC6小干扰RNA(BIRC6-siRNA)及其对照siRNA(con-siRNA)转染到肾癌786-O细胞,Western blot检测转染后BIRC6蛋白表达水平,CCK8和流式细胞术分别检测BIRC6-siRNA和5-FU人肾癌786-O细胞活力和凋亡的影响,Western blot检测细胞自噬相关蛋白Beclin和LC3A/B的表达水平。结果免疫组化结果显示BIRC6蛋白在肾癌组织中的表达显着高于正常肾组织,转染BIRC6-siRNA后786-O细胞的BIRC6蛋白表达水平显著降低。12.5、25、50、100和200μg/mL的5-FU诱导786-O细胞后,BIRC6-siRNA组细胞增殖抑制率显著高于con-siRNA组,差异具有统计学意义(P<0.01);流式检测结果显示,BIRC6-siRNA组肾癌786-O细胞凋亡率显著高于con-siRNA组,差异具有统计学意义(P<0.01);BIRC6-siRNA组肾癌786-O细胞Beclin和LC3A/B蛋白表达显著低于con-siRNA组。结论siRNA干扰BIRC6能够抑制肾癌786-O细胞自噬,促进5-FU诱导的细胞凋亡,促进肾癌786-O细胞对5-FU的敏感性。

大肠癌BIRC6表达与预后相关性研究

目的探讨BIRC6的表达率与患者预后的关系。方法收集182例临床预后资料完整的大肠癌的标本，用免疫组化染色BIRC6单克隆抗体，观察BIRC6表达情况。采用X^2和Spearman等级相关检验的统计方法研究大肠癌BIRC6表达率与临床病理特征的关系。通过多因素COX比例风险模型分析各变量对生存期的影响。结果研究发现在肿瘤病变中BIRC6表达率较低，182例大肠癌标本中有86例观察到BIRC6阳性表达，表达率为47．3％。单因素分析显示BIRC6的表达率与肿瘤的TNM分期、分化程度相关（P〈0．05），显示BIRC6高表达的大肠癌患者生存期长于低表达的患者。但多因素分析提示BIRC6作为判断大肠癌预后的预测价值有限。结论本研究显示BIRC6在大肠癌组织表达率较低，BIRC6表达水平作为判断大肠癌预后的预测价值有限。

BIRC6在肝细胞癌中的表达及其对肝癌细胞凋亡的影响

目的:检测baculoviral IAP repeat-containing 6(BIRC6)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织及癌旁组织中的表达情况并探讨其在HCC中的功能。方法:收集40例HCC及对应癌旁组织,运用qRT-PCR及免疫组化染色技术检测BIRC6在HCC及对应癌旁组织中的表达情况;qRT-PCR技术检测人正常肝细胞株LO2、HCC细胞株HepG2和SMMC-7721中BIRC6 mRNA表达;应用BIRC6 siRNA转染人HCC细胞SMMC-7721,通过MTT和流式细胞仪检测转染后细胞活力和细胞凋亡变化。结果:BIRC6在HCC组织中的表达高于对应的癌旁组织(P=0.004),HCC组织中BIRC6蛋白高表达与较大肿瘤体积(>5 cm)和高TNM分期相关(P=0.029;P=0.002);正常肝细胞株LO2中BIRC6 mRNA表达水平明显低于HCC细胞株HepG2和SMMC-7721(P=0.000),下调BIRC6表达导致SMMC-7721细胞活力降低和细胞凋亡增加(P=0.000)。结论:BIRC6高表达与HCC的恶性临床病理特征相关,BIRC6在HCC中可能作为凋亡抑制因子发挥功能。

山羊JAK2和BIRC6基因多态性与产羔性能的关联分析

旨在分析两面神激酶2(Janus kinase 2,JAK2)和杆状病毒IPA重复序列蛋白6(Baculoviral inhibitors of apoptosis repeat-containing 6,BIRC6)基因的多态性与云上黑山羊产羔性能的关联性。利用Sequenom MassARRAY^(■)SNP技术对JAK2和BIRC6的7个候选位点进行分型,探索其在云上黑山羊(n=544)、济宁青山羊(JN,n=133)和辽宁绒山羊(LN,n=91)3个群体中的遗传学特征,并对其与云上黑山羊产羔性能(包括产羔数、初生窝重和断奶窝重)的关联性进行分析。结果表明,JAK2基因的g.39274131C>T和g.39301320T>C位点、BIRC6基因的g.14843779A>G和g.14903534A>G位点在不同繁殖力品种(JN和LN)中的基因型分布存在极显著差异(P<0.01),而BIRC6基因的g.14883749G>C、g.14886515C>G和g.14903556G>C位点在不同繁殖力品种(JN和LN)中的基因型分布无显著差异(P>0.05)。在云上黑山羊中,所有候选位点对产羔数、出生窝重和断奶窝重均无显著性影响(P>0.05)。综上,JAK2基因和BIRC6基因7个位点均不适合作为云上黑山羊产羔性能选育的分子标记。

CircBIRC6调节miR-126-5p/JARID2轴对非小细胞肺癌细胞顺铂耐药性的影响

目的:探讨环状RNA BIRC6(CircBIRC6)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞(A549)顺铂(DDP)耐药性的影响。方法:RT-qPCR法检测DDP耐药及敏感肺癌组织与细胞中CircBIRC6表达,体外培养人NSCLC细胞株A549及DDP耐药细胞A549/DDP,将A549/DDP细胞分为Control组、pcDNA组、pcBIRC6组、si-CircBIRC6组、si-NC组、si-BIRC6+inhibitor NC组,si-BIRC6+miR-126-5p inhibitor组。RT-qPCR检测CircBIRC6、miR-126-5p表达;CCK-8法检测细胞增殖及对DDP的IC_(50)值;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测JARID2、Cyclin D1、P21、P-gp蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验验证CircBIRC6、JARID2与miR-126-5p的靶向关系。结果:与DDP敏感肺癌组织相比,CircBIRC6在DDP耐药肺癌组织中表达水平显著升高,与A549细胞相比,A549/DDP细胞中CircBIRC6表达水平及DDP对A549/DDP细胞的IC_(50)值显著升高(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验证实CircBIRC6、JAR-ID2与miR-126-5p存在靶向关系。与pcDNA组相比,pcBIRC6组A549/DDP细胞增殖、CircBIRC6、JARID2、Cyclin D1与P-gp蛋白表达及IC_(50)值显著升高,细胞凋亡率及miR-126-5p、P21蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与si-NC组相比,si-BIRC6组细胞增殖、CircBIRC6、JARID2、Cyclin D1与P-gp蛋白表达及IC_(50)值显著降低,细胞凋亡率及miR-126-5p、P21蛋白表达水平显著升高(P<0.05);下调miR-126-5p表达可逆转抑制CircBIRC6表达对A549/DDP细胞的增殖抑制作用和凋亡促进作用。结论:CircBIRC6在A549/DDP细胞中高表达,可通过靶向抑制miR-126-5p表达,上调JARID2表达,促进A549/DDP细胞对DDP的耐药性。