热疗对膀胱癌细胞BIU-87/HCPT耐药相关基因的影响

目的观察热疗对耐羟基喜树碱膀胱癌细胞株BIU-87/HCPT多药耐药的逆转作用,并探讨其逆转肿瘤多药耐药的机制。方法不同温度条件下热疗、化疗、热疗联合化疗处理耐药膀胱癌细胞株BIU-87/HCPT后,用MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡、P-gp、多药耐药相关蛋白1(MRP1)、谷胱甘肽硫-转移酶π(GST-π)和survivin表达的变化。结果热疗对BIU-87/HCPT细胞具有抑制作用,呈温度依赖性且在43℃时最强。热疗可显著增加羟基喜树碱对BIU-87/HCPT细胞的抑制率,作用呈温度依赖性,热疗明显增加化疗的作用。热疗联合化疗明显减少P-gp、MRP1、GST-π和survivin的表达并呈温度依赖性。结论热疗可促进膀胱癌细胞株BIU-87/HCPT凋亡,增强化疗药物作用,部分逆转膀胱癌细胞的耐药性,减少P-gp、MRP1、GST-π和survivin的表达。

联合化疗对膀胱癌细胞株BIU-87及其耐药亚株联合抑制作用的体外实验研究

实验采用微量细胞培养噻唑蓝显色法观察阿霉素 (ADM)、足叶乙甙 (VP- 16 )、丝裂霉素 C(MMC)和羟基喜树碱 (HCPT)等药物联合应用于膀胱癌细胞株 BIU- 87及其耐药亚株 BIU- 87/ A、BIU- 87/ V,结果显示 :HCPT与MMC、 ADM联合应用对亲本及耐药细胞株都能取得较好抑制作用。联合用药能增强化疗药物对 BIU- 87细胞的毒性作用 。

坎地沙坦对膀胱癌细胞株BIU-87侵袭力和黏附力的影响

目的探讨血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)拮抗剂坎地沙坦对膀胱癌BIU-87细胞株的侵袭力和黏附力的影响。方法采用免疫组化SABC法检测膀胱癌BIU-87细胞株AT1R的表达,用Transwell法检测细胞侵袭力,用细胞同质黏附实验检测细胞黏附力。结果 AT1R拮抗剂坎地沙坦能降低BIU-87细胞株的侵袭能力和黏附能力。结论 AT1R拮抗剂有可能通过降低肿瘤细胞的侵袭、黏附能力和抑制血管生成而达到抗癌作用,AT1R拮抗剂将来可能会成为一种抗癌治疗的新方法。

光动力作用对人膀胱癌细胞株BIU-87增殖代谢活性的影响

目的 :研究光动力抑癌作用机制。方法 :采用MTT法检测光动力作用后人膀胱癌细胞株BIU -87增殖代谢活性。结果 :光动力实验组吸光密度值 (0 .1683± 0 .0 3 3 7)显著低于实验对照组 (0 .5 12 8± 0 .0 3 82、0 .7775± 0 .0 93 2、0 .72 2 3± 0 .0 3 5 5、0 .72 10± 0 .0 3 69) (P <0 .0 1)。结论 :光动力作用降低了人膀胱癌细胞株BIU -87的增殖代谢活性 ,这可能是其抑癌作用机制之一。

激光激活BPD-MA光动力作用对人膀胱癌细胞株BIU-87DNA合成的影响

目的 :研究光动力抑癌作用机制。方法 :采用3H -TdR掺入法检测激光光敏化BPD -MA后人膀胱癌细胞株BIU -87细胞DNA的合成。结果 :实验前对照组的CPM值为 482 3 .5± 5 4.2 6,激光激活BPD -MA光动力显著抑制人膀胱癌细胞株BIU -87细胞DNA的合成 (12 63 .7± 2 0 6.84VS 482 3 .5± 5 4.2 6,P <0 .0 5 )。而单纯光敏剂BPD -MA和假照射处理对人膀胱癌细胞株BIU -87细胞DNA合成无明显影响 (P >0 .0 5 )。结论 :激光激活BPD -MA光动力抑制人膀胱癌细胞株BIU -87细胞DNA的合成可能是其抑癌作用机制之一。

三氧化二砷对膀胱癌细胞BIU-87耐药相关基因的影响

目的:探讨三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)对耐羟基喜树碱的膀胱癌细胞株BIU-87/HCPT耐药性逆转的机制。方法:用As2O3与羟基喜树碱联合处理BIU-87/HCPT细胞后,用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡、P-gp、MRP1、GST-π和生存素(survivin)表达的变化。结果:As2O3与羟基喜树碱联合处理耐药膀胱移行细胞癌株BIU-87/HCPT细胞后,细胞生长受到明显抑制。单独应用As2O3的凋亡率为11.07%,As2O3联合羟基喜树碱后的凋亡率为18.23%,凋亡细胞百分比较对照组明显增多,As2O3明显增加羟基喜树碱的作用(P<0.05)。As2O3使P-gp、MRP 1、GST-π和sur-vivin的表达明显减少,且均具有浓度依赖性(P<0.05)。结论:As2 O3可减少耐药相关基因的表达,部分逆转膀胱癌细胞的耐药性,促进凋亡,且呈现浓度依赖性。

白藜芦醇对膀胱癌耐药细胞株BIU-87/ADM自噬影响的实验研究

目的:探讨白藜芦醇对膀胱癌耐药细胞株BIU-87/ADM自噬的影响。方法:分别建立浓度为12.5μmol/L、25.0μmol/L、50.0μmol/L与100μmol/L的白藜芦醇制备品,并以未加药人膀胱癌BIU-87/ADM细胞作为对照。通过CCK-8法检测对照组及不同浓度梯度白藜芦醇对膀胱癌耐药细胞株BIU-87/ADM增殖的影响,应用RT-PCR法测定白藜芦醇处理前后膀胱癌耐药细胞株BIU-87/ADM LC-3和Beclin 1 mRNA的表达水平,并以Wester blot检测白藜芦醇作用后LC-3Ⅱ蛋白的表达水平。结果:加入白藜芦醇试验组BIU-87/ADM细胞24h与48h生长抑制率均明显高于对照组,其48h生长抑制率明显高于24h生长抑制率,具有统计学意义(P<0.05),白藜芦醇浓度越高其细胞生长抑制率越高。加入白藜芦醇试验组BIU-87/ADM细胞的细胞凋亡率明显高于对照组,具有统计学意义(P<0.05),白藜芦醇浓度越高其细胞凋亡率越高。白藜芦醇干预后LC3-Ⅱ与Beclin 1 mRNA表达明显减弱,而白藜芦醇浓度越高其表达减弱程度越明显。结论:白藜芦醇能够明显减少耐药细胞株BIU-87/ADM保护性自噬,抑制膀胱癌耐药细胞增殖,促进耐药细胞凋亡。

热疗对膀胱癌细胞BIU-87HCPT耐药相关基因的影响

目的探究热疗对膀胱癌细胞BIU-87HCPT耐药相关基因表达的影响。方法培养试验用对羟基喜树碱耐药的膀胱癌细胞株BIU-87HCPT,待其处于生长对数期时取出待用。将对照组与实验组均放置于37～43℃不同的温度的恒温箱中化疗,72 h后用酶标仪测量其吸光度。结果单独热疗可以抑制BIU-87/HCPT癌细胞,且抑制效果与温度呈正相关。热疗联合化疗比单独热疗或者单独化疗效果好。热疗可抑制BIU-87/HCPT癌细胞繁殖。热疗可抑制P-gp、MRP1、GST-π和survivin的表达,且抑制效果与温度呈正相关。结论热疗可以很好的抑制膀胱BIU-87/HCPT肿瘤细胞的生长繁殖,抑制其表达耐药相关蛋白从而降低其耐药性以提高疗效。

三氧化二砷对膀胱癌BIU-87细胞增殖及生存素表达的影响

目的:探讨三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)对膀胱癌BIU-87细胞增殖及生存素表达的影响。方法:用As2O3处理膀胱移行细胞癌株BIU-87后,用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测细胞增殖;用细胞流式仪检测细胞周期及凋亡,生存素(Survivin)表达的变化。结果:三氧化二砷作用BIU-87细胞后,细胞生长受到明显的抑制,Survivin的表达明显减少,凋亡细胞百分比较对照组明显增多,且均具有浓度依赖性。结论:As2O3对人膀胱癌细胞株BIU-87有抑制其生长、增殖和诱导凋亡的作用,且呈现浓度依赖性。

热疗对膀胱癌BIU-87细胞凋亡和生存素表达的影响

目的探讨热疗对膀胱癌BIU-87细胞凋亡和生存素(survivin)表达的影响。方法不同温度条件下热疗作用膀胱癌细胞株BIU-87后,用MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡和survivin表达的变化。结果热疗可以抑制BIU-87细胞增殖,减少survivin表达,诱导BIU-87凋亡,SubG0/G1期细胞百分比增多,并均呈温度依赖性(P<0.05)。结论热疗可诱导BIU-87细胞凋亡,下调survivin表达,且呈温度依赖性。

热疗对膀胱癌细胞耐药性的影响

目的探讨热疗对膀胱癌细胞耐药性的影响。方法不同温度条件下热疗与化疗联合作用耐药膀胱癌细胞株BIU-87后,用MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡和survivin表达的变化。结果热疗可显著增强羟基喜树碱对BIU-87的抑制作用,并可减少survivin的表达。热疗可以诱导BIU-87的凋亡,并呈温度依赖性。结论热疗可增强化疗药物作用,部分逆转膀胱癌细胞的耐药性,并促进凋亡。

卡介苗与细胞因子或化疗药物联合应用对膀胱癌细胞株BIU-87抑制作用

目的探讨卡介苗(BCG)与细胞因子或化疗药物联合应用对人膀胱癌细胞株BIU-87的抑制作用。方法在离体条件下,采用MTT染色法,研究BCG与肿瘤坏死因子、白细胞介素II、干扰素等细胞因子及丝裂霉素C、阿霉素、噻替派和羟基喜树碱等化疗药物联合应用对膀胱癌细胞株BIU-87的抑制作用。结果细胞因子或化疗药物与BLG联合应用能明显增加BCG对BIU-87细胞的毒性作用(P<0.05)。结论BCG与细胞因子或化疗药物联合应用对膀胧癌细胞株BIU-87有协同细胞毒作用。

真核始动因子4E反义寡核苷酸对人膀胱癌BIU-87细胞中elF4E和肝素酶表达的影响

目的探讨真核始动因子4E（eIF4E）反义寡核苷酸（ASODN）对人膀胱癌BIU．87细胞株中elF4E及肝素酶（HPA）蛋白、mRNA表达的影响。方法采用脂质体介导方法分别将2．5、5．0及7．5μg／mleIF4EASODN转染膀胱癌BIU-87细胞，并设立细胞对照组（不转染）、空白对照组（转染空脂质体）及无关对照组（转染无关对照ASODN），分别转染24、48及72h，采用原位杂交、免疫细胞化学方法分别检测各组BIU-87细胞中eIF4E及HPA蛋白、mRNA表达。结果elF4EASODN各转染组细胞中eIF4E蛋白及mRNA表达量均较对照组降低（蛋白：2．5μg／ml组分别为3．55±0．52、3．52±0．51、3．22±0．44；5．0μg／ml组分别为3．43±0．47、3．41±0．46、3．19±0．41；7．5μg／ml组分别为2．36±0．39、2．33±0．37、2．05±0．30。mRNA：2．5μg／ml组分别为3．19±0．41、3．13±0．39、2．90±0．38；5．0μg／ml组分别为3．07±0．39、2．94±0．38、2．27±0．37；7．5μg／ml组分别为2．22±0．37、2．06±0．30、1．95±0．29），与细胞对照组、空白对照组和无关对照组相应时间段、相应浓度组两两比较差异均有统计学意义（P〈0．05），且具有时间和浓度依赖性。elF4EASODN各转染组细胞中HPA蛋白及mRNA表达量均较对照组降低（蛋白：2．5μg／ml组分别为4．44±0．55、4．40±0．54、3．99±0．52；5．0μg／ml组分别为4．41±0．55、4．21±0．53、3．77±0．50；7．5μg／ml组分别为4．02±0．52、3．98±0．52、2．32±0．37。mRNA：2．5μg／ml组分另0为4．12±0．51、3．75±0．50、3．63±0．45；5．0μg／ml组分别为4．00±0．51、3．71±0．50、3．5±0．44；7．5μg／ml组分别为3．87±0．52、3．61±0．49、2．08±0．30），与细胞对照组、空白对照组和无关对照组两两比较差异均有统计学意义（P〈0．05），且具有时间和浓度依赖性。eIF4EASODN对HPA蛋白、mRNA表达的抑制效应和对eIF4E蛋白、mRNA表达的抑制效应呈正相关关系（HPA蛋白r=9．23，mRNAr=9．59，P值均〈0．01）。结论eIF4EASODN可下调膀胱癌BIU-87细胞中e[F4E、HPA蛋白及mRNA的表达，抑制肿瘤细胞的生长、浸润及转移。

磷酸酶基因上调BIU-87细胞中p53蛋白表达水平并增强其对化疗药物的敏感性

张力蛋白同源、第10号染色体丢失的磷酸酶基因（PTEN）失活是否参与了化疗耐药的形成，目前报道尚少。本研究通过脂质体介导法将野生型PTEN基因（WT-PTEN）与两种突变型PTEN基因：G129E-PTEN（无脂质磷酸酶活性而保留蛋白磷酸酶活性）、C124A-PTEN（无磷酸酶活性）分别导入携带野生型p53基因的人膀胱癌细胞株BIU-87，研究PTEN在膀胱癌细胞中的作用。

AT1R拮抗剂对膀胱癌细胞株生物学行为的影响及其机制研究

探讨血管紧张素Ⅱ,型受体(ATIR)拮抗剂坎地沙坦对膀胱癌BIU-87细胞株的生物学行为的影响。方法:采用免疫组织化学SABC法检测膀胱癌BIU-87细胞株ATIR的表达,用MMT法检测用坎地沙坦处理后的BIU 87细胞株的生长情况,同时检测BIU-87细胞株的侵袭能力和黏附能力,用ELISA法检测血管内皮细胞生长因子和白细胞介素-8的表达水平。结果:ATIR拮抗剂坎地沙坦不影响BIU-87细胞株的生长,但能降低其侵袭能力和黏附能力,也能抑制血管内皮细胞生长因子和白细胞介素-8的表达。结论:ATIR拮抗剂通过降低肿瘤细胞的侵袭黏附能力和抑制血管生成而达到抗癌作用,AT、IR拮抗剂将来可能会成为一种抗癌治疗的新方法。