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BKI1通过其22个氨基酸区域与BRI1的互作来调控油菜素甾醇信号 被引量:3
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作者 关钰 王海娇 王学路 《复旦学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期320-327,F0002,共9页
油菜素甾醇(Brassinosteroids,BRs)是一种广泛存在于植物中的类固醇激素,在植物的生长发育过程中起重要作用.植物通过位于细胞膜上的富含丝/苏氨酸的类受体蛋白激酶BRI1感知BR信号.当感受到BR信号后,BRI1的负调控蛋白BKI1就会从细胞膜... 油菜素甾醇(Brassinosteroids,BRs)是一种广泛存在于植物中的类固醇激素,在植物的生长发育过程中起重要作用.植物通过位于细胞膜上的富含丝/苏氨酸的类受体蛋白激酶BRI1感知BR信号.当感受到BR信号后,BRI1的负调控蛋白BKI1就会从细胞膜上解离,解除对BRI1的抑制,使BR信号向下传递.但是BKI1是如何与BRI1结合从而发挥负调节作用的生化机制目前未知.首先以BKI1-RNAi转基因植物为材料,从表型、内源BKI1的mRNA水平和下胚轴长度等方面证明了内源BKI1的减少可以增强BR信号的输出.之后的同源比对发现BKI1 C末端有2个氨基酸保守区域,并且在二级结构预测中发现其中的一个22个氨基酸保守区域是C末端唯一的α螺旋结构.同时通过酵母双杂交实验证明该保守区域是BKI1和BRI1互作不可缺少的区域.最后我们发现这22个保守氨基酸缺失后BKI1的定位发生了改变,由原来的细胞膜和细胞质定位变成了细胞膜、细胞质和细胞核定位.从而确定了BKI1与BRI1互作的最小区域位于304-325. 展开更多
关键词 油菜素甾醇 bki1 BRI1 酵母双杂交 信号转导
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油菜素甾醇信号通路中BKI1互作蛋白ERD7的筛选与鉴定 被引量:1
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作者 程鳞 张弛 +2 位作者 蒋建军 苏伟 王学路 《复旦学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期313-320,共8页
油菜素甾醇(Brassinosteroid,BR)是一类重要的调控植物生长发育的激素,BKI1在BR信号转导通路中具有正负调控的双重功能.为了深入研究BK11正/负调控BR信号通路的分子机制,本研究使用BKI1作为诱饵蛋白对拟南芥cDNA文库进行酵母双杂交筛选... 油菜素甾醇(Brassinosteroid,BR)是一类重要的调控植物生长发育的激素,BKI1在BR信号转导通路中具有正负调控的双重功能.为了深入研究BK11正/负调控BR信号通路的分子机制,本研究使用BKI1作为诱饵蛋白对拟南芥cDNA文库进行酵母双杂交筛选,获得了一段新的与BR信号通路组分BKI1相互作用的肽段,BLAST搜索显示该肽段与拟南芥ERD7的N端序列一致.生物信息学分析表明ERD7是一个植物特异表达基因,在单子叶、双子叶、以及低等植物中保持很高的一致性.酵母双杂交方法证实全长ERD7与BKI1能够相互作用,Pull-down分析证实这两个基因在植物体内直接相互作用,烟草细胞瞬时表达显示ERD7和BKI1能够共定位于细胞质和细胞膜.BKI1和ERD7相互作用的发现为进一步研究BKI1的调控机制奠定了基础. 展开更多
关键词 bki1 ERD7 酵母双杂交 油菜素甾醇信号通路
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油菜素甾醇信号通路中BKI1互作蛋白Hsp70的筛选与鉴定 被引量:1
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作者 杨秦 张弛 +1 位作者 蒋建军 王学路 《复旦学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期734-741,751,F0002,共10页
植物激素油菜素甾醇(Brassinosteroids,BRs)在植物生长发育过程中起着重要作用.BKI1和14-3-3蛋白都具有正负调控BR信号通路的双重功能.为了进一步研究BKI1调控BR信号通路的分子机制,本研究用BKI1的过表达植株35S∶∶BKI1-FLAG进行液相色... 植物激素油菜素甾醇(Brassinosteroids,BRs)在植物生长发育过程中起着重要作用.BKI1和14-3-3蛋白都具有正负调控BR信号通路的双重功能.为了进一步研究BKI1调控BR信号通路的分子机制,本研究用BKI1的过表达植株35S∶∶BKI1-FLAG进行液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)分析BKI1复合体组分,发现BKI1复合体中含有分子伴侣Hsp70.BKI1与Hsp70共定位在细胞膜和细胞质上.FoldIndex工具预测发现BKI1存在内在无序区域(Intrinsically Disordered Regions,IDR),表明在细胞中BKI1可能需要Hsp70帮助其正确折叠.半体内pull-down和双分子荧光互补实验(BiFC)表明BKI1可以与Hsp70在植物体内互作.同时,截短实验结果表明BKI1与Hsp70的底物结合结构域相互作用,是Hsp70的底物. 展开更多
关键词 bki1 HSP70 油菜素甾醇信号通路
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BKI1 Regulates Plant Architecture through Coordinated Inhibition of the Brassinosteroid and ERECTA Signaling Pathways in Arabidopsis 被引量:6
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作者 Dongxu Wang Cangjing Yang +7 位作者 Haijiao Wang Zhihua Wu Jianjun Jiang Jingjing Liu Zhuona He Fang Chang Hong Ma Xuelu Wang 《Molecular Plant》 SCIE CAS CSCD 2017年第2期297-308,共12页
Hundreds of leucine-rich repeat receptor-like kinases (LRR-RLKs) play indispensable roles in a wide range of plant developmental and physiological processes. The mechanisms controlling LRR-RLKs at a basal and inacti... Hundreds of leucine-rich repeat receptor-like kinases (LRR-RLKs) play indispensable roles in a wide range of plant developmental and physiological processes. The mechanisms controlling LRR-RLKs at a basal and inactive status are essential but rarely studied. BKI1 is the only reported inhibitor of receptor kinases in Arabidopsis, which negatively regulates BRI1 in the brassinosteroid pathway. In this study, we found that BKI1 can also interact with another important LRR-RLK, ERECTA (ER). Phenotypic analysis showed that BKI1 and ER together regulate plant architecture, including pedicel orientation, which is a newly reported phenotype in the BR- and ER-mediated developmental processes. Gene expression analysis revealed that BKI1 regulates a subset of ER-responsive genes. Kinase assays demonstrated that BKI1 inhibits ER kinase activity. In addition, the release of BKI1 inhibition on ER signaling relies largely on BRI1 activation. Our data provide significant insights into the regulation and activation of RLKs and suggest that BKI1 functions as a common suppressor of the BRI1 and ER signaling pathways. 展开更多
关键词 bki1 receptor-like kinase ERECTA kinase inhibitor pedicel orientation CROSSTALK
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