鸡BLB重组蛋白的原核表达及多抗制备

为分析鸡主要组织相容性复合体(MHC)II类抗原β亚基BLB蛋白在鸡脾脏中的表达情况,本研究采用RT-PCR技术从鸡脾细胞中扩增了BLB基因的保守区第3外显子的部分序列,大小约为380 bp。将其克隆于表达载体pET-30a(+)中。在大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,获得大小约为19 ku以包涵体形式存在的His-BLB重组蛋白。切取含有重组蛋白的SDS-PAGE胶免疫实验兔,获得抗血清。以制备的血清通过western blot在鸡脾脏中检测到MHC II类分子特异性条带,其大小约为28 ku,与BLB天然蛋白的大小相符合。本研究为进一步分析MHC-II类分子在鸡体内的蛋白表达水平提供了依据。