MDV感染B19、B21单倍型SPF鸡外周血淋巴细胞BLec1、BNK及细胞因子基因转录水平比较

本研究旨在揭示BLec1、BNK及细胞因子在B21和B19两种单倍型鸡对马立克病(MD)抗性差异中的可能机制。分别对B21和B19单倍型1日龄鸡腹腔接种马立克病毒(MDV)超强毒株,在攻毒后不同时间检测鸡外周血淋巴细胞中BLec1、BNK及IFN-γ、IL-4、IL-10和IL-18的基因转录水平。结果显示,在第4、7天,两种鸡BNK、BLec1和4种细胞因子水平表现出不同程度的降低。在第10天,B21单倍型鸡中BNK、BLec1、IFN-γ、IL-4和IL-18基因转录量出现不同程度的升高,而B19单倍型鸡中细胞因子转录水平有所下降。在第13天,B21单倍型鸡中BNK、BLec1、IL-18和IL-10基因转录量表现出不同程度的升高,而B19单倍型鸡中则有所下降。以上结果总体表明,MD耐受型鸡在感染沉默期BNK、BLec1和细胞因子转录量高于敏感型,不同遗传基因型鸡对MD的抗性差异与耐受基因及细胞因子的转录情况有着密切的关系。

不同鸡品种BLEC1基因序列比较分析

BLEC1基因(C-type lectin-like receptor 1)编码C型凝集素样受体区域,与CD69家族的激活抗原相关,密切联系于禽类的先天性免疫功能。为了探究BLEC1基因在鸡中的遗传多样性以及不同鸡品种之间的抗病性差异,用苯酚和氯仿法提取26个不同鸡品种的DNA,对其BLEC1基因序列进行目标捕获测序,然后以NCBI上红色原鸡的BLEC1基因序列作为参考序列,序列号为NC_006103. 4,通过MEGA 6软件对26个鸡品种的BLEC1基因序列进行序列比对分析,筛选出不同鸡种BLEC1基因序列上的SNPs位点和Indels位点以及对应氨基酸的变化,并根据基因序列的差异运用邻接法系统聚类分析构建进化树。在26个鸡品种中共检测到14个SNPs位点和12个Indels位点,其中有5个SNPs位点和3个Indels位点在外显子上,外显子上的3个Indels位点在鸡种中广泛存在,且Indel1存在于除黑狼山鸡以外的所有鸡种中,这些SNPs位点和Indels位点导致氨基酸发生极大改变,外显子中氨基酸有3个发生错义突变,其余为同义突变。邻接法系统聚类分析将26个鸡品种分为3大类,其中,安卡鸡、SPF-来航鸡和泰和乌骨鸡聚为一类;萧山鸡单独为一类;其余鸡种聚为一类。综上表明,BLEC1基因在我国地方鸡品种中有着丰富的遗传多样性,且与不同鸡种的先天性免疫功能和抗病性相关。

环孢素A对晶状体上皮细胞的影响

目的 观察环孢素A(CsA)对体外培养的牛晶状体上皮细胞 (BLEC)增殖的影响。方法 对培养牛晶状体上皮细胞采用3 H TdR掺入法及MTT法 ,研究不同质量浓度CsA( 1～ 16 μg/ml)对体外培养的牛晶状体上皮细胞增殖的影响 ,并在光镜、电镜下进行观察。结果 CsA( 1～ 16 μg/ml)作用 2 4h和 72h对牛晶状体上皮细胞增殖有抑制作用 ,且呈剂量依赖性。 2 4h 5 0 %抑制质量浓度 (IC50 )为 10 37μg/ml,72hIC50 为 6 6 1μg/ml。CsA引起细胞形态学改变的主要特点是细胞胞浆内大量空泡形成 ,且随药物剂量增大 ,细胞形态改变越明显。结论 一定剂量的CsA可抑制体外培养的牛晶状体上皮细胞的增殖 ,为预防后囊混浊提供了新途径。

眼氨肽抑制过氧化氢诱发牛晶状体上皮细胞凋亡的实验研究

目的 观察眼氨肽对细胞的促增殖作用及对过氧化氢(H2O2)诱发牛晶状体上皮细胞(BLEC)凋亡的 抑制作用。方法 采用不同成分培养液对BLEC体外培养,观察细胞增殖情况;用DNA缺口末端原位标记法 (TUNEL)检测眼氨肽对H2O2诱发的BLEC凋亡数量的影响,并进行相关比较及统计学分析。结果 眼氨肽能明显 的促细胞增殖,在低浓度H2O2(50μmol/L及125μmol/L)时,能明显抑制细胞凋亡;在高浓度H2O2(250μmol/L)时,对 细胞凋亡的抑制作用不明显。结论 眼氨肽在体外能明显的促进BLEC增殖,并有一定的抗氧化作用。

还原型GSH、卡林-U、内障清对H_2O_2损伤的牛晶状体上皮细胞的影响

目的:观察还原型谷胱甘肽(GSH)、卡林-U、内障清对过氧化氢(H2O2)损伤的牛晶状体上皮细胞(BLEC)的保护作用。方法:通过MTT法,观察GSH、卡林-U或内障清与H2O2同时作用以及先加H2O2后再加GSH、卡林-U或内障清后BLEC生长情况。结果:加50μmol/L或125μmol/LH2O2组培养24,48h时吸光值明显低于阴性对照组(P<0.01);同时作用,除加400μmol/L或2mmol/LGSH组吸光值明显高于单加H2O2组外(P<0.05),其余各组与之比较差别均无统计学意义(P>0.05);先后作用,加各浓度GSH、卡林-U或内障清组吸光值与单加H2O2组比较差别无统计学意义(P>0.05)。结论:400μmol/L和2mmol/LGSH通过对H2O2的抑制保护BLEC。

欧美用户驻地网运营商的现状及展望

美国用户驻地网运营商(BLEC)在经过1996～2000年的繁荣后,从2000年底开始,由于不能在股市上筹措足够的资金和“先布线,后找用户”这种运营模式不再适合等原因,多数BLEC相继陷入运营的困境在欧洲,BLEC的一种衍生模式———建筑服务提供商(BSP)由于一开始就将目标定位于为建筑物内的租户提供质优价廉的宽带服务,而不是圈地,同时BSP与房产所有者紧密合作,使得BSP在欧洲得到很好的生存和发展。

无血清的眼组织对晶状体上皮细胞的培养

目的 从细胞水平探讨后囊混浊形成的机理,及各种眼组织对晶状体上皮细胞的作用。方法 应用 倒置显微镜观察、台盼蓝拒染法、绘制生长曲线、Giemsa染色比色法观察房水、房水添加皮质、房水添加玻璃体对 BLEC增殖的影响。结果 房水能显著抑制BLEC的增殖,皮质、玻璃体均促进BLEC的增殖。结论 晶状体上皮 细胞的增殖是PCO的细胞学基础。无血清刺激下,房水抑制PCO的形成,晶体皮质、玻璃体均促进PCO的形成。