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NSE BLyS APRIL在病毒性脑炎患者中的表达及与预后的相关性
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作者 邵艳敏 武文娟 《中国实用神经疾病杂志》 2024年第6期680-684,共5页
目的研究神经特异性烯醇化酶(NSE)、B淋巴细胞刺激因子(BLyS)、增殖诱导配体(APRIL)在病毒性脑炎患者中的表达及与预后的相关性。方法选取2015—2023年河南科技大学第一附属医院收治的118例病毒性脑炎患者,另选取同期体检、经临床生化... 目的研究神经特异性烯醇化酶(NSE)、B淋巴细胞刺激因子(BLyS)、增殖诱导配体(APRIL)在病毒性脑炎患者中的表达及与预后的相关性。方法选取2015—2023年河南科技大学第一附属医院收治的118例病毒性脑炎患者,另选取同期体检、经临床生化和脑脊髓穿刺等常规检查确认健康正常的对照组48例。比较不同病情的病毒性脑炎患者血清NSE、BLyS、APRIL水平,不同预后病毒性脑炎患者的相关资料。采用多因素Logistic分析病毒性脑炎预后不良的影响因素,并采取受试者工作特征(ROC)曲线分析血清NSE、BLyS、APRIL单独及联合检测在病毒性脑炎预后评价中的价值。结果重症组血清NSE、BLyS、APRIL水平均高于轻症组及对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。预后良好组入院当天及治疗后血清NSE、BLyS、APRIL水平均低于预后不良组,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,年龄、总住院时间、是否进行机械通气、是否存在癫痫发作以及入院当天血清NSE、BLyS、APRIL水平与病毒性脑炎预后不良有关(OR>1,P<0.05)。ROC曲线显示,入院当天血清NSE、BLyS、APRIL联合检测预测预后不良的AUC值(0.895)高于NSE(0.801)、APRIL(0.781)、BLyS(0.776)。结论血清NSE、BLyS、APRIL在病毒性脑炎患者均呈高表达,三者联合检测可较好地预测患者预后。 展开更多
关键词 病毒性脑炎 神经特异性烯醇化酶 b淋巴细胞刺激因子 增殖诱导配体 血清 预后
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慢性免疫性血小板减少症患者BLyS及其受体BAFF-R与血清免疫学指标的相关性
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作者 王婧妍 高大 +2 位作者 赵亚男 陈康 闵亚楠 《西部医学》 2024年第10期1480-1485,共6页
目的探讨慢性免疫性血小板减少症(ITP)患者B淋巴细胞刺激因子(BLyS)及其受体B淋巴细胞刺激因子受体(BAFF-R)与血清免疫学指标的相关性。方法纳入内蒙古医科大学附属医院血液科2020年1月-2022年1月住院的ITP患者50例行回顾性分析,将其设... 目的探讨慢性免疫性血小板减少症(ITP)患者B淋巴细胞刺激因子(BLyS)及其受体B淋巴细胞刺激因子受体(BAFF-R)与血清免疫学指标的相关性。方法纳入内蒙古医科大学附属医院血液科2020年1月-2022年1月住院的ITP患者50例行回顾性分析,将其设为观察组,另选取同期本院体检中心接诊的50例健康体检者,将其设为对照组。检测并比较两组血清BLyS、BAFF-R、免疫学指标。将观察组患者按疾病严重程度分为轻度组(11例)、中度组(29例)、重度组(10例),比较不同严重程度组血清BLyS、BAFF-R、免疫学指标;ITP患者均给予地塞米松、丙种球蛋白、泼尼松等对症治疗,比较预后不良组、预后良好组血清BLyS、BAFF-R、免疫学指标,Pearson分析BLyS、BAFF-R与免疫学指标的相关性,绘制受试者工作曲线(ROC),计算曲线下面积(AUC),分析BLyS、BAFF-R、免疫学指标对ITP患者预后不良的预测效能。结果观察组血清BLyS、BAFF-R、外周血IgG、IgA、IgM均高于对照组(P<0.05)。重度组血清BLyS、BAFF-R、外周血IgG、IgA、IgM均高于中度组、轻度组(P<0.05)。预后不良组血清BLyS、BAFF-R、外周血IgG、IgA、IgM均高于预后良好组(P<0.05)。BLyS、BAFF-R与IgG、IgA、IgM均呈正相关性(P<0.05)(r值=4.034、3.986、4.134、3.964、4.006、4.086)。BLyS、BAFF-R、IgG、IgA、IgM联合检测预测ITP预后不良的AUC是0.801(95%CI:0.734~0.959),灵敏度、特异度分别是93.62%、90.24%,均高于单独检测(P<0.05)。结论ITP患者BLyS及其受体BAFF-R表达量随着疾病的加重会逐渐增高,与血清免疫学指标IgG、IgA、IgM均呈正相关性,联合检测可提高对预后不良的预测灵敏度及特异度,具有一定的参考价值。 展开更多
关键词 慢性免疫性血小板减少症 b淋巴细胞刺激因子 b淋巴细胞刺激因子受体 免疫学指标
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GW3965在Raji细胞中对BLyS表达的影响 被引量:4
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作者 黄艳 黄刚 +5 位作者 胡长江 曾益军 许志臻 陈岺曦 何凤田 宋方洲 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第13期1342-1345,共4页
目的探讨肝X受体(liver X receptors,LXRs)的特异性激动剂GW3965在Raji细胞中对B淋巴细胞刺激因子(B lymphocyte stimulator,BLyS)表达的影响。方法 MTT法检测不同浓度的GW3965(浓度分别为0.5、5、10μmol/L)对Raji细胞活性的影响,观察... 目的探讨肝X受体(liver X receptors,LXRs)的特异性激动剂GW3965在Raji细胞中对B淋巴细胞刺激因子(B lymphocyte stimulator,BLyS)表达的影响。方法 MTT法检测不同浓度的GW3965(浓度分别为0.5、5、10μmol/L)对Raji细胞活性的影响,观察时间为加入GW3965共孵育后24 h。用LXR的特异性激动剂GW3965刺激人B细胞淋巴瘤株Raji细胞,经RT-PCR检测LXR特异性靶基因三磷酸腺苷结合盒A1(ATP-binding cassette,ABCA1)mRNA的表达;经RT-PCR和Western blot检测BLyS的表达。结果对照组1‰DMSO D(492)为(0.632±0.055),0.5、5μmol/L和10μmol/L的GW3965 D(492)为(0.609±0.073)、(0.612±0.052)和(0.628±0.055)。LXR的特异性配体GW3965对细胞活性无影响(P>0.05)。GW3965作用于Raji细胞后,ABCA1 mRNA表达剂量依赖性上调,LXR活化后可在转录和翻译水平剂量依赖性下调抑制BLyS的表达。结论 LXR在Raji细胞中可抑制BLyS的表达。 展开更多
关键词 GW3965 b淋巴细胞刺激因子 RAJI细胞
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基因免疫制备抗人BLyS单克隆抗体及单抗特性分析 被引量:4
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作者 张志方 张春艳 +1 位作者 潘敬运 林学颜 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期625-629,共5页
目的 :基因免疫制备抗人BLyS单克隆抗体并分析其免疫学特性。方法 :将人BLyS基因克隆到真核表达载体pcDNA3,构建重组质粒pcDNA3/hBLyS ,用其免疫BALB/c鼠 ,取鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合 ,用ELISA法筛选阳性克隆 ,用免疫印迹和流式细胞技... 目的 :基因免疫制备抗人BLyS单克隆抗体并分析其免疫学特性。方法 :将人BLyS基因克隆到真核表达载体pcDNA3,构建重组质粒pcDNA3/hBLyS ,用其免疫BALB/c鼠 ,取鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合 ,用ELISA法筛选阳性克隆 ,用免疫印迹和流式细胞技术进一步鉴定抗体的特异性 ,用双向免疫扩散鉴定单克隆抗体的类别。结果 :重组质粒双酶切结果和DNA序列测定结果表明 ,pcDNA3/hBLyS重组质粒含有目的基因 ;ELISA、免疫印迹、流式细胞仪和双向免疫扩散等实验结果表明 ,9c10杂交瘤细胞株产生的单克隆抗体可以特异性结合IFN -γ激活的人T淋巴细胞膜表面BLyS蛋白的膜外区 ,属于IgG1亚类。结论 :获得了能够特异性结合人T淋巴细胞上BLyS蛋白膜外区的单克隆抗体 。 展开更多
关键词 基因免疫制备 b淋巴细胞激活因子 质粒 单克隆抗体 自身免疫性疾病
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计算机辅助设计可溶性BLyS受体,eBCMA-Fc融合蛋白及其在大肠杆菌中的表达(英文) 被引量:2
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作者 孙剑 冯建男 +2 位作者 林周 黎燕 沈倍奋 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期127-133,共7页
B细胞成熟抗原(BCMA)是B淋巴细胞刺激因子(BLyS)的受体之一.它的胞外区与人IgG1Fc的融合蛋白eBCMA-Fc,又称为诱饵受体,具有拮抗BLyS的活性.为了设计新的拮抗肽,基于BCMA和Fc的晶体结构,通过计算机图形学技术、分子模拟方法,建立了eBCMA... B细胞成熟抗原(BCMA)是B淋巴细胞刺激因子(BLyS)的受体之一.它的胞外区与人IgG1Fc的融合蛋白eBCMA-Fc,又称为诱饵受体,具有拮抗BLyS的活性.为了设计新的拮抗肽,基于BCMA和Fc的晶体结构,通过计算机图形学技术、分子模拟方法,建立了eBCMA-Fc融合蛋白的三维理论结构.利用均方根位移(root mean square distance,RMSD)对eBCMA-Fc融合蛋白与单体eBCMA、Fc构象差异进行分析.融合蛋白eBCMA-Fc中的eBCMA段与单体eBCMA的主链碳原子间RMSD值为0.036nm,Fc段与单体Fc的主链碳原子间RMSD值为0.064nm.结果表明,对比单体,融合蛋白eBCMA-Fc并未因eBCMA与Fc直接连接而发生构象的变化.分子对接方法显示,融合蛋白eBCMA-Fc中的BCMA与BLyS作用,而Fc扮演着稳定BCMA构象的支架作用.为进一步验证上述理论分析,构建eBCMA-Fc融合基因,并将载有eBCMA-Fc融合基因的原核表达质粒转化BL21(DE3)菌、在细菌中表达.目的蛋白经蛋白A亲和柱纯化大约为36kD,与理论预测值34kD相近.免疫印迹表明抗人IgG抗体能够识别eBCMA-Fc融合蛋白.ELISA证实,eBCMA-Fc融合蛋白能够结合BLyS.随着eBCMA-Fc融合蛋白增加,结合BLyS的融合蛋白也相应增加.而对照人IgG,即使在高浓度条件下,也不结合BLyS.此外,eBCMA-Fc融合蛋白能够抑制BLyS对B细胞肿瘤Daudi细胞的作用.这些研究为下一步设计和筛选BLyS拮抗肽提供了实验基础. 展开更多
关键词 b淋巴细胞刺激因子(blys) b细胞成熟抗原(bCMA) 计算机辅助同源模建 分子对接 自身免疫性疾病
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黄芩苷在胶原蛋白诱发性关节炎小鼠中抑制BLyS介导的Th17细胞分化和炎症反应 被引量:6
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作者 蔡志波 林艳 陈英虎 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1294-1301,共8页
目的:探讨黄芩苷对胶原蛋白诱发性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)小鼠的辅助性T细胞17(T helper 17 cells,Th17细胞)分化和炎症反应的调控作用及机制。方法:在第1天,SPF级雄性DBA/1小鼠经背部皮下注射鸡源II型胶原蛋白(chick c... 目的:探讨黄芩苷对胶原蛋白诱发性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)小鼠的辅助性T细胞17(T helper 17 cells,Th17细胞)分化和炎症反应的调控作用及机制。方法:在第1天,SPF级雄性DBA/1小鼠经背部皮下注射鸡源II型胶原蛋白(chick collagen type II,CII)+完全弗氏佐剂(complete Freund’s adjuvant,CFA)致敏;在第21天,经尾根部皮下注射CII+不完全弗氏佐剂(incomplete Freund’s adjuvant,IFA)强化免疫;在第28~42天分别灌胃50、100和200 mg·kg^-1·d^-1黄芩苷。关节炎指数(arthritis index,AI)积分评估关节炎的严重程度;HE染色观察膝关节病理学改变;ELISA法检测血清中IL-1β、TNF-α、IgG、IgG2a和IL-17A的水平以及关节组织中IL-17A的水平;流式细胞术分析脾脏和肠系膜淋巴结(mesenteric lymph nodes,MLN)中CD4^+IL-17A^+T细胞比例;Western blot检测关节、脾脏和MLN中B淋巴细胞刺激物(B-lymphocyte stimulator,BLyS)的表达。另外,用2μg/L BLyS和20μmol/L黄芩苷处理CD4^+T细胞群48 h后,流式细胞术分析CD4^+IL-17A^+T细胞比例,ELISA法检测上清液中IL-1β和TNF-α的水平。结果:黄芩苷能剂量依赖性地减轻CIA(P<0. 05)。黄芩苷能剂量依赖性地降低CIA小鼠血清中IL-1β、TNF-α、IgG、IgG2a和IL-17A水平和关节组织中IL-17A水平,减少脾脏和MLN中Th17细胞的比例,抑制关节、脾脏和MLN中BLyS的表达(P<0. 05)。另外,黄芩苷能抑制BLyS诱导的CD4^+T细胞群中Th17细胞的分化及IL-1β和TNF-α的分泌(P<0. 05)。结论:黄芩苷能通过降低BLyS介导的Th17细胞分化和炎症反应来发挥抗CIA效应。 展开更多
关键词 黄芩苷 类风湿关节炎 TH17细胞 b淋巴细胞刺激物
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BLys和TLR-4在系统性红斑狼疮转基因小鼠模型中的作用及可能机制 被引量:5
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作者 黄宁 谢文阁 +2 位作者 柳卫芳 李稳 王伟平 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期749-754,共6页
目的研究Toll样受体-4(Toll-like receptors-4,TLR-4)与B淋巴细胞刺激因子(B lymphocyte stimulator,BLys)在系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)转基因小鼠模型中的作用及可能机制,为SLE的治疗提供新靶点。方法选择SPF... 目的研究Toll样受体-4(Toll-like receptors-4,TLR-4)与B淋巴细胞刺激因子(B lymphocyte stimulator,BLys)在系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)转基因小鼠模型中的作用及可能机制,为SLE的治疗提供新靶点。方法选择SPF级EB病毒膜抗原BLLF1转基因雌性小鼠共30只,随机分成空白对照组、BLys阻断剂组和TLR-4阻断剂组各10只,选择SPF级野生型小鼠为野生对照组。BLys阻断剂组应用抗BR3单克隆抗体500 mg/d,腹腔注射连续10 d,TLR-4阻断剂组应用抗人TLR-4抗体250 mg/d,腹腔注射连续10 d,野生对照组和空白对照组腹腔注射等量生理盐水。继续喂养10 d后无菌取尾静脉血,RT-PCR法检测TLR-4 m RNA水平,ELISA法检测白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-17、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)和IL-2水平,金标免疫斑点法检测抗ds DNA抗体滴度,常规生化法检测补体C3(complement 3)、血沉(erythrocyte sedimentation rate,ESR)和C反应蛋白(C-reaction protein,CRP)水平,对小鼠肾脏进行HE和Masson染色。结果野生对照组和BLys阻断剂组,空白对照组和TLR-4阻断剂组外周血中单个核细胞(PBMC)的BLys无统计学差异(P>0.05);与野生对照组和BLys阻断剂组比,空白对照组和TLR-4阻断剂组PBMC的BLys明显增高(P<0.05)。提示EB病毒膜抗原BLLF1转基因小鼠为SLE模型,BLys阻断剂可阻断PBMC的BLys的表达。野生对照组和空白对照组干预前后的TLR-4 m RNA、IL-6、IL-17、TNF-α、IL-2、抗ds DNA抗体、C3、ESR和CRP表达无明显差异(P>0.05);空白对照组、BLys阻断剂组和TLR-4阻断剂组干预前外周血TLR-4 m RNA、IL-6、IL-17、TNF-α、抗ds DNA抗体、C3、ESR和CRP表达无明显差异(P>0.05)。干预后,BLys阻断剂组和TLR-4阻断剂组的TLR-4 m RNA、IL-6、IL-17、TNF-α、抗ds DNA抗体、C3、ESR和CRP较干预前明显降低(P<0.05),IL-2较干预前明显增高(P<0.05)。与野生对照组比,其余组别的TLR-4 m RNA、IL-6、IL-17、TNF-α、IL-2、C3、ESR和CRP表达干预前后均存在差异(P<0.05)。与空白对照组比,BLys阻断剂和TLR-4阻断剂组HE和Masson染色均有明显改善。结论BLys和TLR-4可能是参与SLE的发生发展,机理可能与调节免疫炎症反应有关。 展开更多
关键词 TOLL样受体-4 b淋巴细胞刺激因子 系统性红斑狼疮
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rhsBLyS及其突变体对小鼠血清免疫球蛋白分泌及B细胞增殖分化的影响 被引量:2
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作者 陈光宇 彭善云 +2 位作者 邹民吉 徐东刚 王嘉玺 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期108-112,共5页
为了进一步研究所构建的人可溶性B淋巴细胞刺激因子 (hsBLyS)及其突变体hsBY A(Cys14 6→Ala14 6 )和hsBY V(Cys14 6→Val14 6 )在体内的生物活性 ,将 3种重组蛋白注射入BALb C小鼠体内 ,进而分析重组蛋白对小鼠血清免疫球蛋白分泌和脾... 为了进一步研究所构建的人可溶性B淋巴细胞刺激因子 (hsBLyS)及其突变体hsBY A(Cys14 6→Ala14 6 )和hsBY V(Cys14 6→Val14 6 )在体内的生物活性 ,将 3种重组蛋白注射入BALb C小鼠体内 ,进而分析重组蛋白对小鼠血清免疫球蛋白分泌和脾脏B细胞增殖分化的影响 ,并对 3种蛋白的体内生物活性进行了比较 .结果表明 ,3种蛋白均能促进小鼠血清总IgG和IgM的分泌明显增加 ,统计学检验显示突变体rhsBY V诱导这 2种免疫球蛋白分泌的能力最强 ;3种蛋白还诱导小鼠脾脏增大、脾脏成熟B细胞的相对数量增加 .该高活性突变体hsBY V的获得提示 ,Cys14 6并非BLyS发挥正常功能所必需 ,将Cys14 6突变成Val14 6有可能提高BLyS的生物活性 . 展开更多
关键词 b淋巴细胞刺激因子 突变体 免疫球蛋白 b细胞增殖
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B淋巴细胞刺激因子(BLyS)研究进展 被引量:2
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作者 吴一凡 张双全 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第5期658-661,共4页
B淋巴细胞刺激因子 (BLyS)是 1999年新发现的一种重要的细胞因子 ,属于肿瘤坏死因子 (TNF)超家族成员 .在体液免疫调控中起重要作用 .它能强烈地刺激B淋巴细胞的增殖和分化并分泌大量免疫球蛋白 (主要为IgM) ;在体外其过量表达能促进多... B淋巴细胞刺激因子 (BLyS)是 1999年新发现的一种重要的细胞因子 ,属于肿瘤坏死因子 (TNF)超家族成员 .在体液免疫调控中起重要作用 .它能强烈地刺激B淋巴细胞的增殖和分化并分泌大量免疫球蛋白 (主要为IgM) ;在体外其过量表达能促进多种B系肿瘤细胞的生长 .BLyS转基因小鼠出现严重的红斑狼疮样症状 .对BLyS的基因和蛋白质结构、免疫调控功能。 展开更多
关键词 b淋巴细胞刺激因子(blys) 细胞增殖 体液免疫 受体 自身免疫性疾病
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过敏性紫癜患者血清中TRANCE和BLys的检测 被引量:1
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作者 刘建东 康国强 +6 位作者 刘建军 张国强 王太山 王华忠 韩克领 刘西斌 高顺强 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2012年第6期490-491,495,共3页
目的了解TRANCE和BLys在过敏性紫癜发病中的作用。方法通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测过敏性紫癜患者血清中TRANCE和BLys的表达水平。结果过敏性紫癜患者血清中TRANCE和BLys的表达水平(2.83±0.96,90.48±2.64)与正常对照组(0... 目的了解TRANCE和BLys在过敏性紫癜发病中的作用。方法通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测过敏性紫癜患者血清中TRANCE和BLys的表达水平。结果过敏性紫癜患者血清中TRANCE和BLys的表达水平(2.83±0.96,90.48±2.64)与正常对照组(0.85±0.35,82.02±4.04)相比均升高(P<0.01),伴有肾脏损害患者血清中TRANCE,BLys的表达水平(4.09±0.45,93.92±2.07)与单纯型患者(2.44±0.70,89.42±1.75)相比显著增高(P<0.01)。患者血清中TRANCE与BLys的表达水平呈显著正相关(r=0.515,P<0.01)。结论过敏性紫癜患者血清中TRANCE,BLys的表达异常增高,可能与其发病有关。 展开更多
关键词 过敏性紫癜 酶联免疫吸附试验 肿瘤坏死因子 肿瘤坏死因子相关激活诱导因子 b淋巴细胞刺激因子
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血清BLyS和APRIL水平与非霍奇金氏病关联性的初步研究 被引量:1
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作者 鞠少卿 倪红兵 +6 位作者 王跃国 张芹 黄一红 周锦红 刘才旺 孔宪涛 仲人前 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期563-566,共4页
目的:研究非霍奇金氏病(NHL)患者血清B淋巴细胞刺激因子(BLyS)和增殖诱导配体(APRIL)蛋白水平,并探讨其与血清乳酸脱氢酶(LDH)的关系。方法:应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测LDH升高患者组(10例)和LDH正常NHL患者组(12例)NHL患者血清B... 目的:研究非霍奇金氏病(NHL)患者血清B淋巴细胞刺激因子(BLyS)和增殖诱导配体(APRIL)蛋白水平,并探讨其与血清乳酸脱氢酶(LDH)的关系。方法:应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测LDH升高患者组(10例)和LDH正常NHL患者组(12例)NHL患者血清BLyS和APRIL水平,以健康志愿者(23例)作为对照;同时将血清BLyS和APRIL水平与患者血清乳酸脱氢酶(LDH)进行相关性分析。结果:NHL患者组血清BLyS水平显著低于健康对照组(P<0.05);NHL患者血清APRIL水平与健康对照组无显著性差异(P>0.05),但LDH升高患者组血清APRIL水平明显高于LDH正常患者组(P<0.05);NHL患者组和LDH升高患者组血清APRIL水平与LDH正相关(r=0.923、0.799,P<0.05)。结论:NHL患者血清BLyS、APRIL水平与健康对照组差异,提示BLyS和APRIL可能与NHL的预后及恶性程度有关。 展开更多
关键词 非霍奇金氏病 b淋巴细胞刺激因子 增殖诱导配体 乳酸脱氢酶
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人BLyS免疫抑制分子的克隆、表达及纯化 被引量:1
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作者 高会广 何凤田 +5 位作者 府伟灵 李蓉芬 陈麟凤 卞爱娜 吉清 戴双双 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期370-373,共4页
目的用异源性T辅助细胞表位修饰人可溶性BLyS突变体(msBLyS),构建和表达BLyS的新型免疫抑制分子。方法经PCR方法构建msBLyScDNA,然后分别与鸡卵清溶菌酶(HEL)或卵清蛋白(OVA)Th表位DNA序列重组,行序列测定后,构建于高效原核表达载体pQE-... 目的用异源性T辅助细胞表位修饰人可溶性BLyS突变体(msBLyS),构建和表达BLyS的新型免疫抑制分子。方法经PCR方法构建msBLyScDNA,然后分别与鸡卵清溶菌酶(HEL)或卵清蛋白(OVA)Th表位DNA序列重组,行序列测定后,构建于高效原核表达载体pQE-80L并转化E.coliDH5α,经IPTG诱导表达,Ni-NTA层析纯化后,通过细胞增殖实验检测融合蛋白的生物学活性。结果DNA测序表明,重组HELmsBLyS和OVAmsBLyS的DNA序列与文献报道的序列完全一致。HELms-BLyS和OVAmsBLyS在大肠杆菌中以可溶性形式高效表达。经Ni-NTA层析纯化后,目的蛋白的纯度可达90%以上。活性检测发现,重组蛋白均不能促进Raji细胞增殖。结论成功构建了BLyS的免疫抑制分子,并获得了高效表达及纯化,纯化产物已丧失了sBLyS所具有的细胞增殖活性,为进一步探讨其治疗作用打下了基础。 展开更多
关键词 b淋巴细胞刺激因子 Th表位DNA序列 免疫抑制分子
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BLyS及其受体BAFF-R在SLE患者中的表达及与SLEDAI和血清IgG的相关性研究 被引量:2
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作者 温斯健 林有坤 +2 位作者 吴玲艳 郑文军 刘慧 《皮肤性病诊疗学杂志》 2014年第4期276-279,共4页
目的:通过在基因和蛋白水平上检测系统性红斑狼疮(SLE)患者BLyS及其受体BAFF-R的表达水平,探讨BLyS及BAFF-R与SLE发病机制的相关性。方法:实时荧光定量聚合酶链反应(Realtime PCR)检测60例SLE患者(其中病情活动期34例,稳定期26例)、50... 目的:通过在基因和蛋白水平上检测系统性红斑狼疮(SLE)患者BLyS及其受体BAFF-R的表达水平,探讨BLyS及BAFF-R与SLE发病机制的相关性。方法:实时荧光定量聚合酶链反应(Realtime PCR)检测60例SLE患者(其中病情活动期34例,稳定期26例)、50例健康人群外周血单个核细胞(PBMC)的BLyS mRNA、BAFF-R mRNA的表达水平,ELISA方法检测其血清BLyS的表达,并分析其与SLE活动指数(SLEDAI)、血清免疫球蛋白IgG的相关性。结果:SLE患者PBMC中BLyS、BAFF-R mRNA及血清中BLyS蛋白表达水平均明显高于健康对照组(t值分别为14.02、14.6、9.56,P值均<0.01);活动期BLyS mRNA及BLyS蛋白表达水平明显高于稳定期(t值分别为2.26、3.96,P值均<0.05),BAFF-R mRNA表达在活动期和稳定期之间没有差别(t=1.49,P>0.05)。SLE患者BLyS mRNA及BLyS蛋白水平均与SLEDAI积分和血清IgG水平呈正相关(P值均<0.01),BAFF-R mRNA水平则与SLEDAI、IgG均无相关性(P值均>0.05)。结论:SLE患者BLyS mRNA、BAFF-R mRNA、BLyS蛋白表达水平升高,BLyS在一定程度上反映了病情的活动,表明BLyS及其受体可能参与SLE的发生和发展,并为监控SLE的病情和治疗效果提供了新的辅助方法。 展开更多
关键词 系统性红斑狼疮 b淋巴细胞激活因子 bAFF-R
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sBLyS突变体酵母表达载体的构建
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作者 黄刚 何凤田 +2 位作者 连继勤 李蓉芬 胡颖 《重庆医学》 CAS CSCD 2006年第7期606-608,共3页
目的构建人BLyS胞外区(soluble BLyS)突变体毕赤酵母分泌型表达载体,为深入探讨BLyS的功能和机制创造条件。方法以构建的人pUC19/sBLyS及其突变体重组质粒为模板,利用PCR扩增出6×his/sBLyS及其突变体的cDNA,克隆入酵母表达载体pPIC... 目的构建人BLyS胞外区(soluble BLyS)突变体毕赤酵母分泌型表达载体,为深入探讨BLyS的功能和机制创造条件。方法以构建的人pUC19/sBLyS及其突变体重组质粒为模板,利用PCR扩增出6×his/sBLyS及其突变体的cDNA,克隆入酵母表达载体pPIC9K;行序列测定后电转化入毕赤酵母GS115,并进行表型筛选和G418抗性筛选;对高拷贝整合的重组酵母表达菌株进行PCR鉴定。结果构建得到酵母融合重组表达载体pPIC9K/6×his/sBLyS及其突变体;经G418浓度梯度筛选及PCR鉴定得到高拷贝整合的重组酵母表达菌株。结论成功构建了人sBLyS及其突变体的真核表达载体,为获得人sBLyS及其突变体蛋白,进一步研究BLyS的生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 b淋巴细胞刺激因子(blys) 毕赤酵母 突变体
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解毒活血滋阴方对系统性红斑狼疮患者血清Blys、IL-10的影响 被引量:3
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作者 卞华 吕芹 +1 位作者 黄显章 陈志国 《南阳理工学院学报》 2010年第6期68-70,共3页
本文旨在探讨解毒活血滋阴方对系统性红斑狼疮(SLE)患者血清B淋巴细胞刺激因子(Blys)、IL-10的影响。将65例SLE患者随机分为2组:西医组(32例)采用强的松、甲氨蝶呤、羟氯喹治疗;中西医结合组(33例)采用解毒活血滋阴方联合强的松、甲氨... 本文旨在探讨解毒活血滋阴方对系统性红斑狼疮(SLE)患者血清B淋巴细胞刺激因子(Blys)、IL-10的影响。将65例SLE患者随机分为2组:西医组(32例)采用强的松、甲氨蝶呤、羟氯喹治疗;中西医结合组(33例)采用解毒活血滋阴方联合强的松、甲氨蝶呤、羟氯喹治疗,均治疗3个月。运用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清Blys、IL-10的含量。结果显示,与治疗前相比,西医组、中西医结合组血清Blys、IL-10含量均明显降低(P<0·01),且中西医结合组Blys、IL-10的改善更加明显(P<0.05,P<0.01)。同时,西医组、中西医结合组均能明显降低SLE患者系统性红斑狼疮狼疮活动指数(SLEDAI)积分(P<0.01),且中西医结合组SLEDAI积分的改善更加明显(P<0.05)。结论:解毒活血滋阴方能明显降低SLE患者血清Blys、IL-10的含量,这可能是其作用机制之一。 展开更多
关键词 解毒活血滋阴方 系统性红斑狼疮 b淋巴细胞刺激因子 IL-10
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人BLyS基因克隆、表达和抗人BLyS单克隆抗体的制备
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作者 张志方 张春艳 +1 位作者 潘敬运 林学颜 《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第3期176-179,207,F003,共6页
【目的】研制抗人BLyS单克隆抗体 ,以进一步探讨人BLyS与自身免疫性疾病的关系。【方法】将人BLyS基因克隆到融合蛋白原核表达载体 pGEX 4T 1中 ,构建重组质粒 pGEX 4T 1/hBLyS ,用此重组质粒转化大肠杆菌BL2 1,加IPTG诱导大肠杆菌表达G... 【目的】研制抗人BLyS单克隆抗体 ,以进一步探讨人BLyS与自身免疫性疾病的关系。【方法】将人BLyS基因克隆到融合蛋白原核表达载体 pGEX 4T 1中 ,构建重组质粒 pGEX 4T 1/hBLyS ,用此重组质粒转化大肠杆菌BL2 1,加IPTG诱导大肠杆菌表达GST hBLyS融合蛋白 ,用此融合蛋白免疫BALB/c鼠 ,取鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合 ,用ELISA法筛选阳性克隆 ,用免疫印迹和流式细胞仪进一步鉴定抗体的特异性。【结果】重组质粒双酶切结果和DNA序列测定以及表达蛋白SDS PAGE电泳结果表明 ,pGEX 4T 1/hBLyS重组质粒可以正确表达GST hBLyS融合蛋白 ;ELISA、免疫印迹和流式细胞仪检测结果表明 ,1c6杂交瘤细胞株产生的单克隆抗体可以特异性结合人T淋巴细胞膜表面BLyS的膜外区 ,属于IgG2b亚类。【结论】所获得的单克隆抗体具有能够结合人T淋巴细胞上的BLyS特异性 。 展开更多
关键词 blys 抗体 单克隆 T淋巴细胞
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Th表位修饰的BLyS突变体的构建及活性分析
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作者 高会广 府伟灵 +4 位作者 李蓉芬 陈麟凤 邢效如 张艳 何凤田 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1-6,共6页
在已克隆可溶性BLyS(sBLyS)cDNA的基础上,经PCR构建了其缺失不同区域的突变体(msBLyS)cDNA,然后将msBLyScDNA与卵清蛋白(ovalbumin,OVA)Th表位DNA序列重组,测序正确后分别克隆于原核表达载体pQE80L,并转化E.coliDH5α,经IPTG诱导后,融... 在已克隆可溶性BLyS(sBLyS)cDNA的基础上,经PCR构建了其缺失不同区域的突变体(msBLyS)cDNA,然后将msBLyScDNA与卵清蛋白(ovalbumin,OVA)Th表位DNA序列重组,测序正确后分别克隆于原核表达载体pQE80L,并转化E.coliDH5α,经IPTG诱导后,融合蛋白以包涵体的形式表达,表达量均在菌体总蛋白的30%以上。包涵体经洗涤、溶解并经Ni-NTA层析纯化后,目的蛋白的纯度均在90%以上。活性检测发现,所获重组蛋白均丧失了sBLyS所具有的生物学功能,这些工作的完成为进一步探讨其治疗作用打下了基础。 展开更多
关键词 Th表位修饰 blys突变体 构建方法 生物学活性 b淋巴细胞刺激因子 肿瘤坏死因子
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外周血单个核细胞Toll样受体4和B淋巴细胞刺激因子表达水平与IgA肾病患者临床指标的关系
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作者 邓曙鹏 《内科》 2023年第6期552-556,共5页
目的 探讨外周血单个核细胞Toll样受体4(TLR4)和B淋巴细胞刺激因子(BLyS)表达水平与免疫球蛋白(Ig)A肾病患者临床指标的关系。方法 回顾性分析122例IgA肾病患者的临床资料,比较不同外周血单个核细胞TLR4和BLyS表达水平患者临床指标,并... 目的 探讨外周血单个核细胞Toll样受体4(TLR4)和B淋巴细胞刺激因子(BLyS)表达水平与免疫球蛋白(Ig)A肾病患者临床指标的关系。方法 回顾性分析122例IgA肾病患者的临床资料,比较不同外周血单个核细胞TLR4和BLyS表达水平患者临床指标,并分析外周血单个核细胞TLR4和BLyS表达水平与临床指标的相关性。结果 低TLR4水平组和高TLR4水平组间、低BLyS水平组和高BLyS水平组间性别、收缩压、高血压史、低密度脂蛋白(LDL)、血尿酸、血肌酐和尿素氮差异均有统计学意义;Pearson相关性分析结果显示,IgA肾病患者外周血单个核细胞TLR4、BLyS表达水平与收缩压、LDL、血尿酸和血肌酐水平均呈正相关(均P<0.05)。结论 外周血单个核细胞TLR4和BLyS表达水平与IgA肾病患者收缩压、LDL、血尿酸和血肌酐水平均呈正相关。 展开更多
关键词 外周血单个核细胞 TOLL样受体4 b淋巴细胞刺激因子 免疫球蛋白A肾病 临床指标
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B淋巴细胞表面分子靶向治疗类风湿关节炎的研究进展 被引量:7
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作者 王迪 常艳 +1 位作者 吴育晶 魏伟 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期175-180,共6页
类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种慢性、系统性的自身免疫性疾病,迄今病因尚不明确,且缺乏针对其安全有效的治疗药物。由于B淋巴细胞在RA致病机制中的重要作用,近年来不断有针对B淋巴细胞上不同靶点的治疗药物推出。这些B... 类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种慢性、系统性的自身免疫性疾病,迄今病因尚不明确,且缺乏针对其安全有效的治疗药物。由于B淋巴细胞在RA致病机制中的重要作用,近年来不断有针对B淋巴细胞上不同靶点的治疗药物推出。这些B淋巴细胞靶向生物制剂包括针对CD20分子的抗CD20单克隆抗体,如rituximab、ocrelizumab和ofatumumab等;针对B淋巴细胞刺激因子(B lymphocyte stimulator,BLyS)及其受体的belimumab和atacicept等以及处于初期研究阶段的抗CD22单克隆抗体和B、T淋巴细胞之间CD40/CD40L共刺激反应阻断剂等。上述靶向制剂的疗效在对RA及其动物模型的治疗中得到了证实,提示将B淋巴细胞作为RA治疗靶点是一项非常有前景的治疗策略。 展开更多
关键词 b淋巴细胞 类风湿关节炎 CD20 b淋巴细胞刺激因子
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多发性骨髓瘤患者B淋巴细胞刺激因子及其受体的表达水平 被引量:10
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作者 王金湖 倪红兵 +3 位作者 王旭东 浦江 杨剑虹 鞠少卿 《现代检验医学杂志》 CAS 2009年第2期39-41,共3页
目的探讨B细胞激活因子(BLyS)及其受体在多发性骨髓瘤(MM)发病中的作用机制.方法用酶联免疫吸附测定法(ELISA)和实时荧光定量聚合酶链反应(RFQ—PCR),对31例MM患者和30名健康人血清BLyS含量、外周血单个核细胞(PBMCs)中BLyS... 目的探讨B细胞激活因子(BLyS)及其受体在多发性骨髓瘤(MM)发病中的作用机制.方法用酶联免疫吸附测定法(ELISA)和实时荧光定量聚合酶链反应(RFQ—PCR),对31例MM患者和30名健康人血清BLyS含量、外周血单个核细胞(PBMCs)中BLyS及其受体mRNA含量进行检测;并比较MM患者血清BLyS含量与外周血PBMCs中BLyS及其受体基因表达水平和β2微球蛋白(β2M)的相关性.结果MM患者血清BLyS含量(6.99±3.28g/L)明显高于健康对照组(2.70±1.09g/L,P〈0.01),并与β2M浓度呈正相关性(r=0.954,P=0.000);77.42%(24/31),93.55%(29/31),90.32%(28/31)的MM患者血清BLyS蛋白和PBMCs中BLyS,B细胞成熟抗原(BCMA)mRNA表达水平较正常人明显增高,并且也与β2M的含量呈正相关;而64.52%(20/31)患者穿膜蛋白活化物(TACI)mRNA表达水平降低.结论MM患者的血清BLyS蛋白浓度和PBMCs中BLyS及其受体基因表达水平有异常改变,说明BLyS及其受体可能参与MM的发病;BLyS及其受体表达水平也许可作为预后的一个指标. 展开更多
关键词 b淋巴细胞刺激因子 多发性骨髓瘤 b2微球蛋白
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