心肌微环境中Wnt11与BMP2协同作用促大鼠BM—MSCs分化为心肌样细胞的实验研究

目的探讨在心肌微环境的旁分泌作用中，Wnt11与BMP2对促进大鼠骨髓间充质干细胞（bone marrow—mesenchymal stem cells，BM—MSCs）分化为心肌样细胞的协同作用。方法建立Transwell共培养模型，将心肌细胞及转染Wnt11质粒的3T3细胞置于上层、BM—MSCs置于下层培养，前3天应用含50μg/L Noggin（BMP抑制剂）培养液、第4天换用含0．5μg/L BMP2的培养基诱导培养至第14天。根据不同诱导条件，培养细胞分为7组：阳性对照组（Heart组）、CM组、CM＋BMP2组、CM＋Wnt11组、Wnt11＋BMP2组、CM＋Wnt11＋BMP2组、阴性对照组（BM—MSCs组）。诱导培养结束后，采用RT—PCR方法，检测心肌特异性转录因子（Nkx2．5、GATA4、Mef2c）和成熟心肌细胞特异性基因（cTnI、ANP、d—MHC、B—MHC）mRNA表达水平。结果RT—PCR结果显示，在心肌细胞旁分泌微环境下，Wnt11与BMP2协同作用组（CM＋Wnt11＋BMP2组）心肌特异性转录因子和成熟心肌细胞特异性基因的表达明显高于阴性对照组和其他共培养对照组，低于阳性对照组（P〈0．05）。结论在心肌细胞旁分泌微环境中，Wnt11协同BMP2表达可提高BM—MSCs向心肌样细胞分化的效率。

甲醛对鼠BM-MSCs细胞系的遗传毒性影响

目的研究甲醛对BM—MSCs的遗传毒性，从而为甲醛导致白血病的发作提供生物学依据。方法采用噻唑篮比色（Mrrr）法检测BM—MSCs的增殖活性；用彗星、KCI—SDS沉淀、姐妹染色单体互换（SCE）和微核（MN）柃测甲醛对BM—MSCs的遗传毒忡效应。结果75～200μmol／L。甲醛可呈剂量依赖抑制BM—MSCs的增殖（P〈0．01），诱导BM—MSCsDNA断裂效应呈现先增高后降低趋势，在125μmol/L时，达到峰值，其中75～150μmol／L甲醛作用较对照组显著升高（P〈0．01）；甲醛在≥125μmol／L，时可以明显引起BM—MSCsDNA-蛋白交联（DPCs）、SCE和MN的形成，较对照组显著升高（P〈0．01）。结论甲醛可抑制BM—MSCs的增殖活性，并且对BM—MSCs具有一定的遗传毒性效应。