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Hepal-6 RNA脉冲BMDCs瘤苗抗小鼠HCC免疫效应的研究
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作者 李日伦 周爽 +3 位作者 秦杰 张浩如 梁春敏 罗国容 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2013年第4期277-281,共5页
目的观察Hepal-6RNA脉冲BMDCs瘤苗能否激发有效的机体抗肿瘤免疫反应。方法用Hepal-6RNA脉冲骨髓分离培养5d的BMDCs,瘤苗的抗肿瘤效应通过C57BL/6J小鼠肝细胞癌(HCC)模型验证,即C57BL/6J小鼠皮下接种Hepal-6细胞8d后,成瘤小鼠分为2组:... 目的观察Hepal-6RNA脉冲BMDCs瘤苗能否激发有效的机体抗肿瘤免疫反应。方法用Hepal-6RNA脉冲骨髓分离培养5d的BMDCs,瘤苗的抗肿瘤效应通过C57BL/6J小鼠肝细胞癌(HCC)模型验证,即C57BL/6J小鼠皮下接种Hepal-6细胞8d后,成瘤小鼠分为2组:对照组(注射无血清RPMI-1640)和实验组(足垫部注射Hepal-6RNA脉冲BMDCs瘤苗),30d后处死小鼠并取淋巴结、脾和瘤体冰冻切片,进行CD4、CD8、CD25和Foxp3免疫组织化学染色。结果免疫组织化学检测显示,淋巴结、脾、肿瘤内有大量CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD25+T细胞和Foxp3+Tregs细胞浸润。与对照组小鼠比较,足垫部注射Hepal-6RNA脉冲BMDCs瘤苗的实验组小鼠淋巴结、脾、瘤内CD4+T细胞和CD8+T细胞浸润显著增加,CD25+T细胞和Foxp3+Tregs浸润明显减少。结论 Hepal-6RNA脉冲BMDCs瘤苗能下调小鼠HCC瘤内CD25+T细胞和Foxp3+Tregs浸润,促进CD4+T细胞和CD8+T细胞的增殖和活化,增强D4+T细胞、CD8+T细胞归巢至淋巴结和脾,具有抗瘤免疫效应。 展开更多
关键词 Hepal-6 RNA bmdcs 脉冲 瘤苗
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Recombinant E.coli LLO/OVA Induces Murine BMDCs Maturation via TLR4 and NOD1 Receptor and Promotes Specific Cytotoxic T Cell Immunity
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作者 MAN XU MING-SHEN DAI 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2010年第5期350-356,共7页
Objective To explore the immune stimulation effect of recombinant E.coli LLO/OVA on mice bone marrow-derived dendritic cells (BMDCs) and T lymphocytes in vitro.Methods After BMDCs stimulated by E.coli LLO/OVA,their ... Objective To explore the immune stimulation effect of recombinant E.coli LLO/OVA on mice bone marrow-derived dendritic cells (BMDCs) and T lymphocytes in vitro.Methods After BMDCs stimulated by E.coli LLO/OVA,their Toll-like receptor (TLR) and nucleotide-binding oligomerization domain (NOD) receptor signalling pathway were examined by superarray hybridization;and the priming effect of the vaccine activated BMDCs on CD4+T and CD8+T was determined by [3H]thymidine uptake and ELISA,the tumor cytotoxic effect of activated CD8+T cells was determined by cytotoxic assay.Results After BMDCs were activated by E.coli LLO/OVA via TLR4,NOD1 receptor and NF-κB signalling pathway,the expression of their surface molecules including MHC class Ⅰ,MHC class Ⅱ,CD40,CD80 and CD86 significantly up-regulated;the secretion of IL-12 and IFN-? increased also.The mature BMDCs stimulated the allergic CD4+T and CD8+T cells proliferation and their IL-2 and IFN-γ secretion,and the activated CD8+T cells effectively killed B16-OVA melanoma cells and RMA-S/OVA lymphoma cells in vitro.Conclusion E.coli LLO/OVA is effective in inducing BMDCs maturation via activating TLR4 and NOD1 receptor signalling pathway and promoting specific anti-tumor T cell immunity in vitro. 展开更多
关键词 Bone marrow-derived dendritic cells bmdcs Recombinant Escherichia coli Toll-like receptor (TLR) Nucleotide-binding oligomerization domain (NOD) CD8+T cells
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Study on mechanism of increased allergenicity induced by Ara h 3 from roasted peanut using bone marrow-derived dendritic cells 被引量:1
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作者 Minjia Wang Shuo Wang +3 位作者 Xiaodong Sun Zhirui Deng Bing Niu Qin Chen 《Food Science and Human Wellness》 SCIE CSCD 2023年第3期755-764,共10页
Little information was so far available about allergenic mechanism of the roasted peanut allergens during initial stages of allergy.The purpose of this study was to determine the influence of roasting(150℃,20 min)on ... Little information was so far available about allergenic mechanism of the roasted peanut allergens during initial stages of allergy.The purpose of this study was to determine the influence of roasting(150℃,20 min)on biochemical and biological properties of Ara h 3,a major peanut allergen.Allergenicity of roasted peanut emulsion to mice,differences in uptakes between Ara h 3 purified from raw peanuts(named as Ara h 3-Raw)and that purified from roasted peanuts(named as Ara h 3-Roasted)by bone marrow-derived dendritic cells(BMDCs)and the implication of cell surface receptors involving in uptake,and changes in glycosylation and structure of Ara h 3 after roasting were analyzed in this study.This study suggested that roasting increased allergenicity of peanut to BALB/c mice.Maillard reaction and structural changes of Ara h 3 induced by roasting significantly altered the uptake of Ara h 3-Roasted by BMDCs,and modified Ara h 3 fate in processes involved in immunogenicity and hyper allergenicity,indicating that food processing pattern can change food allergenicity. 展开更多
关键词 Roasted peanut Ara h 3 Bone marrow-derived dendritic cells(bmdcs) ALLERGENICITY Maillard reactions
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组蛋白H2A去泛素化酶MYSM1抑制骨髓来源树突状细胞的抗原提呈功能及炎性细胞因子的分泌 被引量:2
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作者 霍毅 陈功金 +5 位作者 申彦彦 李柄毅 李玉芳 席文锦 杨安钢 王涛 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1654-1657,共4页
目的研究组蛋白H2A去泛素化酶Myb样SWIRM和MPN结构域1(MYSM1)对骨髓来源树突状细胞(BMDC)吞噬、抗原提呈、炎性细胞因子mRNA水平的影响。方法分离小鼠的骨髓细胞,在体外联合粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素4(IL-4)诱导... 目的研究组蛋白H2A去泛素化酶Myb样SWIRM和MPN结构域1(MYSM1)对骨髓来源树突状细胞(BMDC)吞噬、抗原提呈、炎性细胞因子mRNA水平的影响。方法分离小鼠的骨髓细胞,在体外联合粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素4(IL-4)诱导骨髓细胞分化为DC,利用小干涉RNA(siRNA)下调MYSM1的表达,采用免疫荧光微球实验检测BMDC的吞噬功能、流式细胞术检测BMDC的抗原提呈功能、实时定量PCR检测BMDC的IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的mRNA表达变化,探讨MYSM1下调后DC在固有免疫应答中的作用。结果下调MYSM1的表达后,BMDC的吞噬功能无显著变化,抗原提呈功能增强,IL-6、TNF-α的表达增强。结论 MYSM1在固有免疫应答中可以抑制BMDC的抗原提呈功能及炎性细胞因子分泌能力。 展开更多
关键词 组蛋白H2A去泛素化酶 Myb样SWIRM和MPN结构域1(MYSM1) 骨髓来源树突状细胞(BMDC) 固有免疫应答
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The role of bone marrow-derived cells in the origin of liver cancer revealed by single-cell sequencing 被引量:4
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作者 Lu Chen Xianfu Yi +10 位作者 Piao Guo Hua Guo Ziye Chen Chunyu Hou Lisha Qi Yongrong Wang Chengwen Li Peng Liu Yucun Liu Yuanfu Xu Ning Zhang 《Cancer Biology & Medicine》 SCIE CAS CSCD 2020年第1期142-153,共12页
Objective:Epithelial cancers often originate from progenitor cells,while the origin of hepatocellular carcinoma(HCC)is still controversial.HCC,one of the deadliest cancers,is closely linked with liver injuries and chr... Objective:Epithelial cancers often originate from progenitor cells,while the origin of hepatocellular carcinoma(HCC)is still controversial.HCC,one of the deadliest cancers,is closely linked with liver injuries and chronic inflammation,which trigger massive infiltration of bone marrow-derived cells(BMDCs)during liver repair.Methods:To address the possible roles of BMDCs in HCC origination,we established a diethylnitrosamine(DEN)-induced HCC model in bone marrow transplanted mice.Immunohistochemistry and frozen tissue immunofluorescence were used to verify DENinduced HCC in the pathology of the disease.The cellular origin of DEN-induced HCC was further studied by single cell sequencing,single-cell nested PCR,and immunofluorescence-fluorescence in situ hybridization.Results:Studies by using single cell sequencing and biochemical analysis revealed that HCC cells in these mice were coming from donor mice BMDCs,and not from recipient mice.Furthermore,the copy numbers of mouse orthologs of several HCC-related genes previously reported in human HCC were also altered in our mouse model.DEN-induced HCCs exhibited a similar histological phenotype and genomic profile as human HCCs.Conclusions:These results suggested that BMDCs are an important origin of HCC,which provide important clues to HCC prevention,detection,and treatments. 展开更多
关键词 Hepatocellular carcinoma bone marrow-derived cells(bmdcs) ORIGINATION genome sequencing copy number alteration
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流产布鲁菌变异株S2308△rfbE感染促进小鼠髓源性树突状细胞(BMDC)成熟和细胞因子释放 被引量:2
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作者 谭婧玉 韩先干 +1 位作者 张敏 刘海文 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期967-970,共4页
目的研究流产布鲁菌变异株S2308△rfbE感染对小鼠髓源性树突状细胞(BMDC)成熟和免疫应答功能的影响。方法采用流式细胞术检测S2308△rfbE感染小鼠BMDC后主要组织相容性抗原复合体Ⅰ(MHCⅠ)、MHCⅡ、CD40、CD86的表达变化,ELISA检测BMDC... 目的研究流产布鲁菌变异株S2308△rfbE感染对小鼠髓源性树突状细胞(BMDC)成熟和免疫应答功能的影响。方法采用流式细胞术检测S2308△rfbE感染小鼠BMDC后主要组织相容性抗原复合体Ⅰ(MHCⅠ)、MHCⅡ、CD40、CD86的表达变化,ELISA检测BMDC的肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和IL-10的分泌量。结果S2308△rfbE感染BMDC后,细胞表达MHCⅠ、MHCⅡ、CD40、CD86明显增强,TNF-α、IL-6和IL-10分泌量升高。结论布鲁菌变异株S2308△rfbE促进BMDC成熟和细胞因子分泌。 展开更多
关键词 牛型布鲁菌 小鼠髓源性树突状细胞(BMDC) 毒力基因 免疫应答
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CD11b激动剂leukadherin-1通过阻断NF-κB p65通路抑制小鼠骨髓来源树突状细胞TLR7和TLR9活化 被引量:1
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作者 翟伟伟 邹孟君 +6 位作者 孙明慧 梁玥 董知临 张馨元 杨永红 董冠军 司传平 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期1-7,共7页
目的研究整合素CD11b激动剂白细胞黏附素1(LA1)对小鼠骨髓来源的树突状细胞(BMDC)中Toll样受体7(TLR7)和TLR9通路活化的影响,并探索其调控机制。方法成功诱导BMDC,用CCK-8法和异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI... 目的研究整合素CD11b激动剂白细胞黏附素1(LA1)对小鼠骨髓来源的树突状细胞(BMDC)中Toll样受体7(TLR7)和TLR9通路活化的影响,并探索其调控机制。方法成功诱导BMDC,用CCK-8法和异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双染法筛选出对BMDC活性和凋亡都无影响的LA1浓度。LA1预处理BMDC 2 h后,用TLR7激动剂R837和TLR9激动剂CpG1826刺激BMDC,收集细胞用流式细胞术检测BMDC表面标志CD40、CD86和主要组织相容性复合体Ⅱ(MHC-Ⅱ)的表达;收集细胞培养上清,用ELISA检测白细胞介素6(IL-6)、IL-12p40和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量;用Western blot法检测BMDC中核因子κB p65(NF-κB p65)的磷酸化水平。结果LA1浓度低于20μmol/L时对BMDC活力和凋亡无影响;LA1预处理显著抑制BMDC中R837和CpG1826诱导的CD40、CD86和MHC-Ⅱ的表达;LA1预处理显著抑制BMDC培养上清中R837和CpG1826诱导的IL-6、IL-12p40和TNF-α的含量;进一步研究发现,LA1预处理显著抑制BMDC中R837和CpG1826激活的NF-κB p65磷酸化水平。结论CD11b激动剂LA1可显著抑制BMDC中TLR7和TLR9通路的活化,且通过NF-κB p65信号通路发挥作用。 展开更多
关键词 骨髓来源树突状细胞(BMDC) Toll样受体(TLR) 整合素CD11b 白细胞黏附素1(LA1)
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DA大鼠骨髓来源的树突状细胞的培养和鉴定 被引量:3
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作者 李志文 李立强 +1 位作者 张武 李明皓 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期577-582,共6页
目的分离DA大鼠骨髓来源的树突状细胞(BMDC),并进行体外培养及鉴定。方法取出DA大鼠的股骨、胫骨之间骨髓腔的骨髓细胞,并联合应用重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)20 ng/mL和10 ng/mL重组小鼠白细胞介素4(rmIL-4),体外培... 目的分离DA大鼠骨髓来源的树突状细胞(BMDC),并进行体外培养及鉴定。方法取出DA大鼠的股骨、胫骨之间骨髓腔的骨髓细胞,并联合应用重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)20 ng/mL和10 ng/mL重组小鼠白细胞介素4(rmIL-4),体外培养7 d,诱导DA大鼠骨髓细胞分化为树突状细胞(DC);ELISA检测未成熟树突状细胞(imDC)培养上清液IL-12水平,倒置显微镜观察BMDC增殖情况以及形态变化,扫描电子显微镜观察DC的形态,流式细胞术分析imDC表面特异性标志物OX62/CD103、CD40、CD80、CD86、主要组织相容性复合体Ⅱ(MHCⅡ)的表达;混合淋巴细胞反应检测imDC诱导T淋巴细胞的增殖能力。结果DA大鼠骨髓细胞经体外培养可获得大量imDC;imDC高表达OX62,低表达CD40、CD80、CD86、MHC-Ⅱ;rmIL-10处理的imDC上清液IL-12含量随着培养时间的延长不断降低,rmIL-4处理组则相反;imDC诱导T淋巴细胞增殖的能力较弱。结论成功建立简易分离培养高纯度的DA大鼠imDC的方法。 展开更多
关键词 DA大鼠 骨髓来源的树突状细胞(BMDC) 未成熟树突状细胞(imDC)
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DEN2感染对MyD88沉默的小鼠树突状细胞相关膜分子表达及炎症因子分泌的影响
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作者 尹科 左丽 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期451-457,473,共8页
目的:探讨髓样分化因子88(MyD88)在DEN2感染BMDC后对其成熟及相关炎症因子分泌的影响。方法:利用rmIL-4、rmGM-CSF联合诱导培养BMDC;针对BMDC MyD88基因,设计并合成3对MyD88 siRNA,脂质体法转染BMDC;通过Western blot筛选一对高沉默效率... 目的:探讨髓样分化因子88(MyD88)在DEN2感染BMDC后对其成熟及相关炎症因子分泌的影响。方法:利用rmIL-4、rmGM-CSF联合诱导培养BMDC;针对BMDC MyD88基因,设计并合成3对MyD88 siRNA,脂质体法转染BMDC;通过Western blot筛选一对高沉默效率的MyD88 siRNA;常规方法增殖及鉴定DEN2;直接免疫荧光及RT-PCR鉴定DEN2吸附BMDC;流式细胞术分析对照组、感染组、RNAi组、感染RNAi组、无义RNAi组BMDC膜表面分子CD86、MHCⅡ的表达,双抗体夹心ELISA法检测上清液中IP-10、TNF-α及IFN-α的分泌水平。结果:经细胞因子诱导培养后可获得CD11c表达为70.85%±2.66%的相对未成熟的BMDC;与空白对照组相比,序列1~3组的MyD88蛋白质表达率分别降低28.36%±14.26%、54.20%±22.93%、73.14%±11.80%,其中序列3的沉默效率最高,具有显著统计学意义(P<0.01);DEN2可吸附BMDC。与对照组比较,DEN2感染组DC膜表面分子CD86表达降低,MHCⅡ增高,感染RNAi组的MHCⅡ、CD86表达无明显变化;与对照组比较,DEN2感染组分泌TNF-α、IFN-α及IP-10的水平均增高,而感染RNAi组分泌的IP-10、IFN-α、TNF-α则无明显变化。结论:DEN2可吸附BMDC,并促使其成熟及细胞因子分泌;siRNA可沉默MyD88,有效阻断DEN2感染BMDC的胞内信号传导及其所引起的成熟及炎症因子分泌。 展开更多
关键词 DEN2 BMDC MYD88 RNA干扰
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MRP8、MRP14及MRP8/14促进体外培养的小鼠骨髓来源树突状细胞的表型成熟 被引量:1
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作者 杨小芹 李杏 +1 位作者 白永坤 孙尔维 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期627-631,共5页
目的探讨髓样相关蛋白8(MRP8)、MRP14及其异二聚体MRP8/14对小鼠骨髓源性树突状细胞(BMDC)表型成熟的影响。方法体外培养及纯化小鼠BMDC,分为对照组、1μg/m L MRP14处理组、1μg/m L MRP8处理组、1μg/m L MRP8/14处理组。采用流式细... 目的探讨髓样相关蛋白8(MRP8)、MRP14及其异二聚体MRP8/14对小鼠骨髓源性树突状细胞(BMDC)表型成熟的影响。方法体外培养及纯化小鼠BMDC,分为对照组、1μg/m L MRP14处理组、1μg/m L MRP8处理组、1μg/m L MRP8/14处理组。采用流式细胞术检测刺激后BMDC表面共刺激分子CD40、CD80、CD86、主要组织相容性复合体Ⅱ(MHCⅡ)的表达情况。结果 MRP14、MRP8及MRP8/14均能促进BMDC表面共刺激分子CD40、CD80、CD86表达,MRP14、MRP8均能促进BMDC表面共刺激分子MHCⅡ表达,且MRP14和MRP8/14促进BMDC表达CD80、CD86的能力强于MRP8。结论 MRP14、MRP8及MRP8/14通过增加BMDC表面共刺激分子的表达而促进BMDC的表型成熟,且MRP8、MRP14及MRP8/14三者促进DC表达各种共刺激分子的能力不同。 展开更多
关键词 髓样相关蛋白8(MRP8) 髓样相关蛋白14(MRP14) 髓样相关蛋白8/14(MRP8/14) 骨髓来源树突状细胞(BMDC) 表型成熟 小鼠
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