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布鲁氏菌BMEII0988基因的克隆、原核表达及免疫原性分析
1
作者
印双红
张俊波
+5 位作者
易德武
唐红
李志强
李默
郭飞
陈创夫
《生物技术》
北大核心
2017年第2期129-134,197,共7页
[目的]检测布鲁氏菌BMEII0988基因的原核表达情况并对其免疫原性进行分析。[方法]以热灭活的布鲁氏菌16M标准株为模板,根据Gen Bank中公布的羊种布鲁氏菌16M的BMEII0988基因序列分别设计引物,用PCR方法扩增BMEII0988基因的编码序列,连接...
[目的]检测布鲁氏菌BMEII0988基因的原核表达情况并对其免疫原性进行分析。[方法]以热灭活的布鲁氏菌16M标准株为模板,根据Gen Bank中公布的羊种布鲁氏菌16M的BMEII0988基因序列分别设计引物,用PCR方法扩增BMEII0988基因的编码序列,连接到T载体测序,将测序正确的基因序列克隆到原核表达载体p ET-32a上,转化入大肠杆菌DE3感受态细胞中诱导表达,将获得的目标蛋白用AKTAxpress智能多维纯化系统进行纯化,并用Western Blot分析其反应原性。[结果]BMEII0988基因长度为1 131 bp,编码377个氨基酸,SDS-PAGE表明BMEII 0988融合蛋白在大约66 k Da处出现条带,纯化后条带单一,BMEII 0988蛋白(NCBI标准序列号:WP_002966326.1)具有较好的反应原性。[结论]该研究为下一步建立相应蛋白标记的诊断方法和疫苗的研发奠定了基础。
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关键词
布鲁氏菌
bmeii0988基因
原核表达
原文传递
题名
布鲁氏菌BMEII0988基因的克隆、原核表达及免疫原性分析
1
作者
印双红
张俊波
易德武
唐红
李志强
李默
郭飞
陈创夫
机构
铜仁学院大健康学院
铜仁学院农林工程与规划学院(铜仁市文化科技产业创新研究中心)
浙江大学动物科技学院
石河子大学动物科技学院
商丘师范学院生物与食品学院
邢台市第二医院肝病二科
石河子大学医学院
出处
《生物技术》
北大核心
2017年第2期129-134,197,共7页
基金
国家自然科学基金项目("E2泛素结合酶关键分子调控胞内布鲁氏菌存活的分子机制研究"
No.31502067
+9 种基金
"布鲁氏菌转录因子GntR调控细胞凋亡的分子机制研究"
No.31602080)
铜仁学院博士科研启动基金项目("布鲁氏菌感染巨噬细胞后PI3K/Akt通路调控凋亡的分子机制研究"
No.trxy DH1504)
贵州省教育厅自然科学研究重点项目("Toll样受体信号通路在绵羊肺炎支原体感染宿主细胞中的作用机理研究"
黔教合KY字(2015)411号)
贵州省科技合作计划项目("TLR2/6-NF-κB信号通路在丝状支原体山羊亚种感染中的机制研究"
黔科合LH字[2015]7238)
贵州省科技合作计划项目("JAK/STAT信号通路在单核细胞增生李斯特菌侵染脑微血管内皮细胞中的作用机制研究"
黔科合LH字[2015]7236号)
文摘
[目的]检测布鲁氏菌BMEII0988基因的原核表达情况并对其免疫原性进行分析。[方法]以热灭活的布鲁氏菌16M标准株为模板,根据Gen Bank中公布的羊种布鲁氏菌16M的BMEII0988基因序列分别设计引物,用PCR方法扩增BMEII0988基因的编码序列,连接到T载体测序,将测序正确的基因序列克隆到原核表达载体p ET-32a上,转化入大肠杆菌DE3感受态细胞中诱导表达,将获得的目标蛋白用AKTAxpress智能多维纯化系统进行纯化,并用Western Blot分析其反应原性。[结果]BMEII0988基因长度为1 131 bp,编码377个氨基酸,SDS-PAGE表明BMEII 0988融合蛋白在大约66 k Da处出现条带,纯化后条带单一,BMEII 0988蛋白(NCBI标准序列号:WP_002966326.1)具有较好的反应原性。[结论]该研究为下一步建立相应蛋白标记的诊断方法和疫苗的研发奠定了基础。
关键词
布鲁氏菌
bmeii0988基因
原核表达
Keywords
Brucella,
bmeii
0988
gene, prokaryotic expression
分类号
Q784 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
布鲁氏菌BMEII0988基因的克隆、原核表达及免疫原性分析
印双红
张俊波
易德武
唐红
李志强
李默
郭飞
陈创夫
《生物技术》
北大核心
2017
0
原文传递
已选择
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参考文献
引证文献
统计分析
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