BMP12基因和间充质干细胞修复兔跟腱缺损的形态学研究

目的 观察用BMP12基因和间充质干细胞修复兔跟腱缺损的形态学变化。方法 模拟微重力条件下构建两种组织工程化肌腱。 2 4只新西兰白兔分为 4组 :①单纯人发角蛋白 (HHK对照组 )组 ;②骨髓间充质干细胞 (MSCs) /HHK组织工程化肌腱组 ;③骨形态发生蛋白 12 (BMP12 )基因诱导的腱细胞 /HHK组织工程化肌腱组 ;④pTARGET BMP12质粒 /HHK组。采用光电镜、免疫组织化学和RT PCR方法观察术后不同时期损伤肌腱的修复情况。结果 MSCs/HHK组织工程化肌腱组和基因诱导的腱细胞 /HHK组织工程化肌腱组的缺损肌腱的再生修复效果均优于单纯HHK组 ,尤以基因诱导的腱细胞 /HHK组织工程化肌腱组的修复效果最佳 ,且伴随有Ⅰ型胶原mRNA表达的增高。结论 BMP12基因和MSCs通过促进内源性愈合参与了缺损肌腱的再生修复。

BMP12诱导恒河猴骨髓间充质干细胞定向分化为腱细胞

目的:研究骨髓间充质干细胞定向分化为腱细胞的可能性。方法:通过电穿孔法将外源基因BMP12导入骨髓间充质干细胞中,诱导骨髓间充质干细胞定向分化为腱细胞;在形态学和分子生物学水平上对诱导后的细胞加以鉴定。结果:光镜下,诱导后的细胞形态发生明显改变;RT-PCR结果表明,诱导后的细胞有BMP12和CollagenⅠ的mRNA的表达,而没有CollagenⅢ的mRNA表达;诱导后细胞呈CD44+为98.39%,HLA-DR-。结论:BMP12能够诱导骨髓间充质干细胞定向分化为腱细胞,间充质干细胞有可能成为肌腱组织工程种子细胞来源之一。

BMP12转染骨髓间充质干细胞的瞬时表达

目的 以骨形态发生蛋白 1 2 (BMP1 2 )基因转染骨髓间充质干细胞 ,探讨骨髓间充质干细胞定向分化为肌腱细胞的可行性。方法 将携带有BMP1 2基因的质粒pEGFP C1 ,采用电穿法转染骨髓间充质干细胞 ,转染后于荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白 (GFP)表达情况。结果 转染后 6h可见细胞内有GFP表达 ,1 2h后达高峰 ,持续约 3天 ,其后有些细胞荧光开始减退。结论 BMP1 2基因转染骨髓间充质干细胞后 ,骨髓间充质干细胞内有GFP表达 ,提示细胞转染成功 。

骨髓间充质干细胞向腱细胞的定向诱导分化

本实验将pTARGETFM-hBMP12真核细胞表达载体转染骨髓间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells，MSCs)，使其长期稳定表达这一腱形态发生中重要的调节因子，诱导其分化为腱细胞，并从形态学、分子生物学水平加以鉴定，同时检测诱导分化来的腱细胞的生长特性。形态学的观察结果显示，转染的细胞胞质均质透亮，细胞两极突起更为细长，首尾相接呈线形，有的相互连接成网。