粤西卷羽鸡BMP6基因多态性与生长性状及屠宰性状的关联分析

[目的]探讨BMP6基因多态性对粤西卷羽鸡生长性状及屠宰性状的影响。[方法]以120只粤西卷羽鸡为试验材料,对BMP6基因外显子设计特异性扩增引物,采取PCR产物直接测序法分析SNP位点,利用单因素方差分析对SNP位点基因型与生长性状及屠宰性状进行关联分析。[结果]在BMP6基因外显子区域共检测到7个SNP位点,其中,g.64185950 T>C、g.64195411 G>A和g.64195613 C>T处于编码区,均为同义突变。HardyWeinberg平衡检验结果显示,g.64195833 T>A在粤西卷羽鸡群体中显著偏离Hardy-Weinberg平衡(P<0.05)。基因型与生长性状关联分析结果表明:在公鸡中,g.64195613 C>T位点CC基因型胫长显著高于TT基因型(P<0.05);在母鸡中,g.64195411 G>A位点AA基因型龙骨长显著高于AG基因型(P<0.05),g.64196373 T>C位点CC基因型胫长极显著高于CT基因型(P<0.01),g.64196735 T>C位点CT基因型胫长显著高于TT基因型(P<0.05)。基因型与屠宰性状关联分析结果表明:在公鸡中,g.64196735 T>C位点CC基因型活体质量显著高于CT基因型(P<0.05);在母鸡中,g.64195613 C>T位点CC基因型腹脂率显著高于CT基因型(P<0.05),g.64196373 T>C位点CC基因型半净膛率显著高于CT基因型(P<0.05)。[结论]BMP6基因多态性与粤西卷羽鸡的部分生长性状及屠宰性状相关,可作为粤西卷羽鸡标记辅助选择的候选基因。

BMP6基因在单、双羔蒙古羊不同生理时期卵巢组织中的差异表达及分析

为了进一步探讨经SSH筛选的蒙古羊繁殖差异基因BMP6对蒙古羊双羔性状的影响及作用机制,利用实时荧光定量PCR技术(RT-qPCR)检测了单、双羔蒙古羊发情第0、5、10、15天时卵巢组织中BMP6基因的表达水平,比较了BMP6基因在蒙古羊单、双羔群体中的差异表达情况。结果表明,在一个发情周期中,单羔组和双羔组蒙古羊卵巢组织中BMP6基因的mRNA表达水平变化趋势相似:发情第0天表达量最低,发情第10天时表达量最高,且显著高于其他时期(P<0.05);双羔组发情第0天和第10天的BMP6基因mRNA表达量分别显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)高于相应时期的单羔组。综上提示,BMP6基因是影响蒙古羊双羔性状的候选基因。

利用同源重组构建BMP6基因真核表达载体及在成纤维细胞中表达量的研究

本研究旨在利用同源重组技术构建敖汉细毛羊BMP6基因表达载体及转染成纤维细胞后基因的表达量变化。实验以敖汉细毛羊为研究对象,采集40日龄的胎羊。首先,提取RNA并反转录成c DNA,参照Gen Bank中BMP6基因序列信息及pc DNA3.1载体序列设计1对含有同源臂的引物,通过PCR扩增获得BMP6基因片段、利用So So试剂盒将目的片段连接到pc DNA3.1真核表达载体上。鉴定pc DNA3.1-BMP6表达载体构建成功后,转化大肠杆菌(E.coli)DH5α感受态细胞;其次对敖汉细毛羊的成纤维细胞进行分离培养,并将构建的pc DNA3.1-BMP6表达载体转染成纤维细胞,利用实时荧光定量PCR技术和Western Blot技术检测BMP6基因在成纤维细胞中表达量的变化。结果表明:经酶切、测序鉴定pc DNA3.1-BMP6表达载体构建成功,并且转染成纤维细胞后BMP6基因的m RNA、蛋白表达量均明显升高,且转染组的表达量极显著高于对照组(P<0.01)。在本实验条件下,利用同源重组技术成功构建了敖汉细毛羊BMP6基因表达载体,并且成功转染成纤维细胞,基因在细胞中过表达,为进一步研究其功能奠定基础。

金寨黑鸡BBMMPP6基因多态性及其对生长性能的影响

研究采用DNA检测,研究其对金寨黑鸡0～14周龄生长性能的影响。结果显示:金寨黑鸡BMP6基因外显子1上存在A76150G一个突变位点,并导致了His→Arg的氨基酸改变,该位点PIC值为0.37,属于中度多态,基因型分布处于Hardy-Weinberg多态性有着显著关联(P<0.05),体重差异在各日龄间有着一致性;母鸡各基因型各日龄体重差异均不显著(P>0.05);对金寨黑鸡胫长影响差异不显著(P>0.05)。研究表明:BMP6基因A76150G位点可用于6周龄金寨黑鸡公鸡生长性状选育的参考分子标记。