小尾寒羊BMPR-ⅠB基因的多态性、效应及连锁分析

骨形态发生蛋白受体ⅠB(BMPR-ⅠB)的Q249R(A746G)突变使Booroola Merino绵羊的繁殖性能提高。该突变在小尾寒羊群体中也有分布。本研究用PCR-SSCP技术对299只小尾寒羊BMPR-ⅠB基因突变位点的多态性进行了检测,BB、B+和++的基因型频率分别为0.541 8,0.364 5和0.093 7,突变等位基因B的基因频率为0.724 1。对2个小尾寒羊羊场的111只有产羔数记录的小尾寒羊BMPR-ⅠB的Q249R突变对产羔数的效应进行了分析,估计出突变等位基因B对小尾寒羊产羔数的效应为:替代效应和显性效应,在第一胎分别为0.46和0.16,在第二胎分别为0.56和0.11;在第一胎和第二胎BB比++分别多产0.77和1.02羔。对BB基因型小尾寒羊和微卫星标记OARJL36的连锁关系进行了分析,发现在BB基因型小尾寒羊,BMPR-ⅠB的B等位基因与OAR-JL36位点之间仍然存在重组。

大白猪BMPR-ⅠB基因多态性及其与繁殖性状的相关性研究

试验旨在研究不同品系大白猪骨形态发生蛋白受体ⅠB(bone morphogenetic protein receptor-ⅠB,BMPR-ⅠB)基因多态性及其与繁殖性状的相关性。采用Hi-SNP中高通量基因分型技术对BMPR-ⅠB基因多态位点进行分型,利用SPSS统计软件,采用最小二乘法将各位点不同基因型与总产仔数、产活仔数、死胎数、畸形头数进行相关性分析。结果显示,不同品系大白猪在BMPR-ⅠB基因746A>G和852G>A位点均未检测到多态性,804G>C位点上均表现为GG基因型为优势基因型,G为优势等位基因;960C>T位点在美系大白猪中以CC基因型频率较高,而在英系大白猪中以TT基因型频率较高,在加系大白猪中CT基因型频率较高,3个不同品系大白猪群体在804G>C和960C>T位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05)。804G>C位点在3个不同品系大白猪中对总产仔数、产活仔数、死胎数、畸形数等繁殖性状均无显著影响(P>0.05)。960C>T位点在美系大白猪群体中TT基因型死胎数极显著低于CC基因型1.027头(P<0.01);英系大白猪群体中TT基因型总产仔数显著高于CC基因型1.976头(P<0.05),极显著高于CT基因型2.118头(P<0.01);加系大白猪中TT基因型产活仔数显著高于CC基因型0.886头(P<0.05),死胎数、畸形头数显著低于CC基因型0.707和0.337头(P<0.05)。960C>T位点中TT基因型可作为3个不同品系大白猪繁殖性状的标记基因型。

贵州地方山羊BMPR-ⅠB基因启动子区多态性及生物信息学分析

为探究骨形态发生蛋白受体ⅠB(bone morphogenetic protein receptorⅠB,BMPR-ⅠB)基因启动子区多态性及其与繁殖性状的相关性,本试验以贵州3个地方山羊品种(黔北麻羊、贵州黑山羊及贵州白山羊)为研究对象,通过构建混合DNA池PCR产物直接测序技术筛选SNPs位点,并采用多种生物信息学软件预测SNPs位点对核心启动子区、CpG岛和转录因子结合位点的影响。结果显示,BMPR-ⅠB基因启动子区存在4个SNPs位点:g.29893005 T>C、g.29893016 C>T、g.29893729 C>G和g.29894370 C>T。生物信息学软件预测得到BMPR-ⅠB基因核心启动子区和CpG岛,SNPs位点导致转录因子结合位点发生改变,g.29893005 T>C和g.29893016 C>T突变使原来的转录因子结合位点Sp1消失;g.29893729 C>G突变使原来转录因子结合位点AP-1消失,从而产生新的转录因子结合位点USF;g.29894370 C>T突变产生新的转录因子结合位点C/EBPalp,使原来的转录因子结合位点Sp1改变为C/EBPalp和Sp1。由此推测,SNPs位点对调控启动子功能元件可能存在重要影响。

藏羊BMPR-ⅠB基因表达、序列特征和多态性及其对产羔性状的影响

为探究藏羊(Ovis aries)BMPR-ⅠB基因的序列特征、表达特征及其多态性对产羔性状的影响,本研究利用RT-qPCR、克隆测序、生物信息学方法和iMLDR技术等检测藏羊BMPR-ⅠB基因的组织表达特性,克隆了藏羊BMPR-ⅠB基因的编码区,分析了BMPR-ⅠB理化性质和蛋白质结构,并检测了其在臧羊群体中的多态性。RT-qPCR结果表明,BMPR-ⅠB基因在下丘脑、垂体、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、卵巢、输卵管、子宫、瘤胃、十二指肠、臂三头肌、半腱肌、股四头肌和背最长肌等16个组织中均有表达,其中在卵巢、输卵管和子宫中的表达量高于其他组织的,在肌肉组织中的表达量最低。生物信息学分析结果表明,藏羊BMPR-ⅠB基因包含1个长为1509 bp的开放阅读框,编码502个氨基酸,其编码区氨基酸序列与绵羊的关系最近;BMPR-ⅠB蛋白的分子式为C_(2511)H_(3986)N_(694)O_(747)S_(33),分子量为56907.45 Da,总原子数为7971,理论等电点为7.78,T_(1/2)为30 h,不稳定指数为54.07,亲水性均值(grand average of hydropa-thicity,GRAVY)为-0.357;BMPR-ⅠB蛋白含信号肽,1个跨膜区,属于跨膜蛋白;存在87个潜在的磷酸化位点、2个N-糖基化修饰位点;α-螺旋、延伸链、β-转角和无规卷曲所占的比例分别为34.86%、13.15%、3.39%和48.61%,属于混合性蛋白。基因分型结果表明,藏羊BMPR-ⅠB基因编码区FecB位点存在A>G突变,且存在3种基因型,分别为野生++型、杂合突变B+型和纯合突变BB型,多态信息含量为0.07,属于低度多态,且该位点处于Hardy-Weinberg平衡状态。藏羊平均产羔数在野生++型和杂合突变+型之间差异显著(P<0.05)。本研究结果为进一步研究BMPR-ⅠB基因对藏羊繁殖性能的调控作用提供参考数据。

小尾寒羊FecB基因型与产羔数相关的研究

[目的]建立小尾寒羊高繁品系,检测BMPR-ⅠB基因的多态性,分析FecB基因基因型频率和产羔数的关系。[方法]选取小尾寒羊为研究对象,运用PCR-RFLP方法,分析BMPR-ⅠB基因突变位点。[结果]样品群中BB、B+和++基因型比例分别为25.45%,54.46%和20.09%;每胎次平均产羔数分别为3.01只、2.81只和2.16只。[结论]FecB基因可以作为小尾寒羊多胎性选育的分子遗传标记,FecB基因能够有效的提高小尾寒羊个体平均产羔数,对产羔数影响呈加性作用。

雌二醇对骨髓基质细胞分化的作用

目的研究骨髓基质细胞在向成骨细胞分化的介质中，17p雌二醇（E2）对其骨形态发生蛋白受体ⅠB（BMPR-ⅠB）及过氧化物酶增殖活化受体γ2（PPAR-γ2）mRNA表达的影响，探讨雌二醇对骨髓基质细胞分化的作用。方法1,25（OH）2D3和地塞米松（DEX）诱导大鼠骨髓基质细胞向成骨细胞分化。应用半定量RT-PCR及Northern blot技术。观察不同浓度E2对骨髓基质细胞分化过程中BMPR-ⅠB及PPAR-γ2 mRNA表达的影响；以α-磷酸簪酚为底物。测定细胞碱性磷酸酶的活性，Van Gieson染色法显示Ⅰ型胶原的含量。结果E2能明显增强骨髓基质细胞分化过程中BMPR-ⅠBmRNA的表达，E2浓度为（0～10^-6）moL／L时。BMPR-ⅠBmRNA的表达随E2浓度增加而增加，从（2．0±0．4）％增至（4．8±1．0）％（P〈0．05）和（17．3±2．2）％（P〈0．01）；E2能明显促进骨髓基质细胞在分化介质中PPAR-γ2mRNA的表达，在上述E2浓度时，PPAR-γ2mRNA的表达从（1．80±0．3）％增至（9.5±2.1）％（P〈0．01）和（19．2±3．0）％（P〈0．01）；Northern blot结果显示随着E2浓度的增加，BMPR-ⅠBmRNA的表达从1．72±0．11增至3．73±0．31（P〈0．01）；PPAR-γ2mRNA的表达量从1．47±0．12增至2．81±0．22（P〈0．01）和4．02±0．36（P〈0．01）。细胞ALP活性明显受E2的抑制，在上述E2浓度时ALP的活性从（42．6±2．5）降至（3．6±0．7）U／g蛋白（P〈0．01）。Ⅰ型胶原含量均随E2浓度增加而降低。结论E2抑制体外培养的骨髓基质细胞向成骨细胞分化而促进其向脂肪细胞分化。