2,4-二硝基氯苯诱导BN大鼠慢性特应性皮炎模型的建立和验证

目的建立2,4-二硝基氯苯诱发的Brown Norway(BN)大鼠特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)模型,并评估验证其在药效试验中的应用。方法BN大鼠随机分为对照组、模型组、他克莫司组。分别于1、3、7、9、12、14、16、19、21、23和25 d对模型组和他克莫司组BN大鼠双耳涂布0.5%2,4-二硝基氯苯(DNCB)溶液,每耳40μL。对照组在相同时间给予等容积的基质溶液。他克莫司组在造模期间给予他克莫司软膏涂抹右耳,连续25 d。试验期间对耳部皮肤进行炎症评分和耳厚度测定;造模26 d后取耳片进行称重;部分耳片组织行苏木素-伊红染色和甲基胺蓝染色,剩余耳片匀浆测定IgE含量。结果模型组自造模9 d起耳厚度明显增加,12 d出现明显的耳组织炎症症状,16~25 d处于高峰阶段;造模26 d,模型组耳重量明显增加,IgE含量明显升高,耳组织呈表皮增厚、表皮内和真皮层炎细胞浸润、肥大细胞浸润等病理改变。他克莫司软膏明显改善上述指标。结论DNCB诱导BN大鼠发展出稳定的AD样症状,适用于药物药效作用评价。

姜黄素抑制BN大鼠脉络膜新生血管的机制研究

目的:探讨姜黄素抑制BN大鼠脉络膜新生血管(CNV)的机制。方法:激光光凝诱导BN大鼠36只建立CNV模型,随机分为6组,每组6只。正常组BN大鼠正常饲养,不做干预;实验组BN大鼠行532nm倍频激光光凝后,根据不同分组分别干预14d:模型组:生理盐水灌胃14d;雷珠单抗组:光凝后第2d玻璃体腔注射雷珠单抗注射液(10mg/mL,0.2mL/支)1次5μL。姜黄素组:低[100mg/(kg·d)]、中[200mg/(kg·d)]、高[400mg/(kg·d)]剂量的姜黄素混悬液分别灌胃14d。光凝14d后进行眼底照相、FFA与ICGA检查。制作BN大鼠CNV眼组织病理学标本,采用HE染色法观察不同组CNV中央厚度。制作BN大鼠CNV眼组织病理学标本,采用免疫组织化学法观察不同组CNV眼组织中AKT/p-AKT/HIF-1α/VEGF信号通路各因子蛋白的表达情况。采用RT-qPCR法检测CNV眼组织中AKT/HIF-1α/VEGF信号通路各因子mRNA的相对表达量。采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测CNV眼组织中AKT/p-AKT/HIF-1α/VEGF信号通路各因子蛋白的相对表达量。结果:模型组,雷珠单抗组,姜黄素低、中、高剂量组CNV生成率分别为78.18%、73.21%、77.19%、75.86%、74.55%,均大于70%;荧光素渗漏平均光密度值分别为182.12±6.59、119.22±8.03、166.45±8.33、164.34±5.69、149.22±6.45;雷珠单抗组较模型组显著降低(P<0.05);姜黄素低、中、高剂量组较雷珠单抗组显著升高(P<0.05),其中姜黄素高剂量组较模型组显著降低(P<0.05)。HE染色结果显示:正常组BN大鼠视网膜组织各层结构清晰、排列整齐。光凝后14d,雷珠单抗组CNV中央厚度较模型组显著减少(P<0.05);姜黄素高剂量组较模型组显著减少(P<0.05),较雷珠单抗组显著增加(P<0.05)。免疫组化结果显示:正常组BN大鼠视网膜组织结构中AKT、p-AKT、HIF-1α、VEGF因子表达呈阴性,未见棕黄色反应物。光凝后14d,模型组AKT、p-AKT、HIF-1α、VEGF因子的表达高于正常组(P<0.05);雷珠单抗组低于模型组(P<0.05);姜黄素高剂量组的表达较模型组显著降低(P<0.05),较雷珠单抗组显著增加(P<0.05)。mRNA结果显示:光凝后14d,模型组AKT、HIF-1α和VEGF mRNA相对表达量均高于正常组(P<0.05);雷珠单抗组均低于模型组(P<0.05);姜黄素高剂量组较模型组显著降低(P<0.05),较雷珠单抗组显著增加(P<0.05)。Western blot结果显示:光凝后14d,AKT蛋白各实验组间比较差异无统计学意义。p-AKT蛋白相对表达量模型组较正常组显著增加(P<0.05);雷珠单抗组较模型组显著降低(P<0.05);姜黄素高剂量组较模型组显著降低(P<0.05)。HIF-1α和VEGF蛋白相对表达量模型组较正常组显著增加(P<0.05),雷珠单抗组较模型组显著降低(P<0.05),HIF-1α蛋白相对表达量姜黄素高剂量组较模型组显著降低(P<0.05),较雷珠单抗组显著增加(P<0.05)。VEGF蛋白相对表达量姜黄素中、高剂量组较模型组显著降低(P<0.05)。结论:400mg/(kg·d)的姜黄素具有抑制BN大鼠实验性CNV的作用。姜黄素抑制BN大鼠实验性CNV的机制可能与降低AKT/p-AKT/HIF-1α/VEGF信号通路的活性密切相关。

BN大鼠和豚鼠对卵清白蛋白致主动过敏反应的免疫学特性比较

目的比较BN大鼠和豚鼠对卵清白蛋白(OVA)致敏前后机体免疫学特性的变化。方法 BN大鼠和豚鼠分别用OVA(每只1 mg)隔日致敏(i.p.),共5次;于末次致敏第10天以OVA(每只2 mg)激发致敏(i.v.);分别设正常对照组和OVA致敏组。于激发致敏后1 h处死动物,分离腹腔肥大细胞、脾脏和骨髓,并制备脾脏和骨髓淋巴细胞。以annexin-V作为标志检测肥大细胞活性,同时以Fluo-3/AM标记胞内钙离子,检测钙离子水平;以PHA和LPS作为有丝分裂原,分别检测脾脏和骨髓T、B淋巴细胞活性。结果①致敏BN大鼠和豚鼠脾脏及骨髓T、B淋巴细胞活性均升高,其中骨髓淋巴细胞活性BN大鼠显著高于豚鼠,脾脏淋巴细胞活性两种属间差异无显著性;②致敏后,腹腔肥大细胞活性两种属间差异无显著性,但BN大鼠致敏后是致敏前的6倍,豚鼠是3倍;③肥大细胞内钙离子水平两种属致敏后均升高,豚鼠致敏前后钙离子水平具有统计学意义。结论 OVA致敏后,BN大鼠骨髓淋巴细胞活性明显高于豚鼠,豚鼠肥大细胞内钙离子较BN大鼠升高明显,肥大细胞活性两者无明显差异。因此,在实验中可以根据两种属在过敏反应中的特点以及具体的实验要求选择动物模型。

激光损伤对BN大鼠视网膜缝隙连接蛋白Cx43分布的影响

目的 探讨细胞间隙连接蛋白(connexin 4 3,Cx4 3)在(BrownNorway ,BN)大鼠视网膜中的分布特点以及氪激光损伤视网膜后Cx4 3分布的变化。方法 应用雄性BN为研究对象,氪红激光眼底光凝(波长6 4 7nm ,能量36 0mW ,光斑直径5 0 μm ,曝光0 .0 5s)。右眼视盘周围10个激光点。光凝后1周开始取材,应用免疫组化方法观察Cx4 3在BN大鼠视网膜中的分布特点。结果 正常视网膜内界膜、视神经纤维层以及神经节细胞层明显表达,神经节细胞表达的主要位置是细胞浆和细胞膜,色素上皮细胞全层表达,内外颗粒层及内外丛状层无表达。激光损伤后的内界膜,视神经纤维层以及神经节细胞层Cx4 3表达明显减少,瘢痕区视网膜色素上皮细胞接近消失,而激光斑周边色素上皮细胞表达不受影响,激光斑部位增殖的成纤维样细胞部分表达。结论 正常视网膜的Cx4 3主要分布在内界膜、神经纤维层、视网膜节细胞层和视网膜色素上皮层,激光损伤后内界膜、视神经纤维层以及神经节细胞层表达减弱,激光斑周围色素上皮细胞中表达无明显变化。

BN大鼠玻璃体内注射曲安奈德抑制脉络膜新生血管生长

目的观察曲安奈德(triamocinlone acetonide,TA)对氪激光诱导的BN大鼠脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)生长的抑制作用。方法 将36只健康BN大鼠随机分为TA组和对照组,每只大鼠随机抽取一眼进行实验。建立BN大鼠CNV动物模型,TA组视网膜光凝后立即玻璃体内注射40g.L-1TA8μL,对照组则注射同等容积的等渗BSS液。在术后2周和4周行FFA检查,FFA检查后摘除BN大鼠眼球制做病理组织切片,光镜下观察CNV情况,并通过免疫组织化学方法检查ICAM-1蛋白在BN大鼠CNV中的表达,采用原位杂交方法检查ICAM-1mRNA在CNV中的转录情况,同时对实验数据进行半定量分析。结果 TA组的ICAM-1蛋白和ICAM-1mRAN阳性着色的IOD值、CNV面积及FFA检测的IOD值明显低于同时期的对照组(均为P<0.05)。结论 TA能够降低ICAM-1mRNA转录和ICAM-1蛋白的表达,有效地抑制了BN大鼠CNV的生长,表明TA是抑制CNV生长的一种很有发展前景的药物。

Lgr5在OVA灌胃致敏的BN大鼠肠道上皮中的表达

目的研究卵清蛋白(OVA)灌胃致敏的BN大鼠其肠道自身干细胞参与修复的情况。方法采用免疫组化观察(leucine-rich repeatcontaining G protein-coupled receptor 5,Lgr5)肠道干细胞标记物和增殖细胞核抗原(PC-NA)的组织定位,观察其增生修复情况。用实时荧光定量PCR检测肠道干细胞标记物Lgr5的表达情况。结果 OVA致敏后的BN大鼠,肠上皮充血、水肿,嗜酸性粒细胞增多。Lgr5主要表达于隐窝基底部,与对照组相比PC-NA和Lgr5表达量都有所增加。结论 OVA致敏后,BN大鼠小肠黏膜细胞中PCNA和Lgr5表达量的增加可能与肠道上皮的损伤修复有关。

BN大鼠β乳球蛋白过敏模型的建立

目的利用BN大鼠建立β乳球蛋白致敏的动物模型。方法采用连续灌胃及腹腔注射致敏蛋白的方式致敏BN大鼠,ELISA测定β乳球蛋白特异性IgE水平。口服给予β乳球蛋白激发过敏反应,苏木素-伊红及甲苯胺蓝染色观察肠粘膜组织病理变化,计数肠浸润肥大细胞数及肥大细胞脱颗粒比例。结果模型组血清特异性IgE水平升高,β乳球蛋白激发后引起肠道炎症反应,肠粘膜肥大细胞浸润增加及肥大细胞脱颗粒比例增加。结论本实验建立的的BN大鼠模型是较理想的食物过敏模型。

BN大鼠脉络膜新生血管动物模型的制作

目的:脉络膜新生血管(CNV)是许多眼病致盲原因,目前无理想治疗方法,深入研究其发病机理及探索其治疗新方法成为必要。制作CNV动物模型是该研究的基础。方法:本研究拟用氩激光诱导BN大鼠CNV动物模型,并用组织病理切片及眼底荧光血管造影进行观察。结果:光凝后7d新生血管形成,21d达高峰,光凝区出现圆盘状的荧光素渗漏。结论:氩激光光凝可以成功制作BN大鼠CNV动物模型,为CNV防治的研究奠定了基础。

532激光光凝诱导BN大鼠脉络膜新生血管生成时间探讨

目的通过实验观察激光术后BN大鼠脉络膜新生血管生成情况。方法取25只BN大鼠,50只眼,全视网膜镜下用半导体激光(波长532 nm)于视乳头下方作视网膜光凝,照射部位位于视乳头及髓线下方,以光凝后有气泡产生为击破Bruch膜的标志,激光参数:功率625~750 mW,时间0.1 s,光斑直径50μm,点数30~40。如果少量激光斑出血,以全网膜镜压迫止血,通过荧光素眼底血管造影术(FFA)观察激光7 d、14 d、21 d、28 d的CNV生成情况。结果 532激光光凝诱导BN大鼠CNV动物模型的发生时间在7 d以内,7~21 d迅速进展,21~28 d达到峰值,CNV模型成模率(74.00%、78.25%),此后CNV达到稳定。结论 532激光诱导BN大鼠CNV具有较高的成模率及较短的成模时间,FFA检查可作为评价次方法的可靠指标。

BN大鼠和RBL-2H3细胞作为茵栀黄注射液过敏反应模型的可行性研究

目的探索建立茵栀黄注射液过敏反应的BN大鼠动物模型和RBL-2H3细胞模型。方法进行主动全身过敏试验(active systemic anaphylaxis,ASA)试验,比较BN大鼠和Hartley豚鼠的过敏反应症状和反应分级,检测血清IgE和组胺水平;检测茵栀黄注射液作用后RBL-2H3细胞上清组胺释放量,并监测细胞内Ca^(2+)荧光强度。结果过敏反应分级比较,两次攻击后BN大鼠高剂量组较阴性组均有显著性差异(P<0.05),Hartley豚鼠各剂量组较阴性组均无显著性差异;BN大鼠各剂量组组胺水平较阴性组均具显著性差异(P分别<0.01、0.05),豚鼠仅高剂量组较阴性组有显著性差异(P<0.05);RBL-2H3细胞上清中,各剂量组组胺释放量与加药浓度正相关,细胞Ca^(2+)荧光强度的对数与加药浓度的对数正相关。结论BN大鼠评价茵栀黄注射液过敏反应较豚鼠更敏感,血清组胺可作为评价指标;RBL-2H3细胞可用于过敏反应检查的体外模型,细胞上清组胺释放量与细胞Ca^(2+)荧光强度可作为评价指标。

BN大鼠和豚鼠评价双黄连注射液的过敏反应

目的为摸索适合评价中药过敏反应的动物,采用BN大鼠和豚鼠评价双黄连注射液过敏的反应。方法BN大鼠和豚鼠分为ip或iv临床等倍剂量组(分别为360及300mg.kg-1)、iv临床2倍剂量组(分别为720及600mg.kg-1)。以双黄连注射液为致敏原,分别对2种动物进行致敏,隔日1次,共3次。同时设生理盐水对照组,观察各组过敏反应症状;采用ELISA法测量血清和组织中组胺含量,HE染色法光镜下观察肺组织和气管病理改变。结果双黄连注射液可以造成BN大鼠及豚鼠发生过敏反应,过敏反应发生率BN大鼠组明显高于豚鼠组,分别为62.86%和36.11%。双黄连注射液可使BN大鼠和豚鼠血清、肺和气管中组胺含量均明显升高,与各相应的对照组比较均具有显著性差异,同时,从数据上看,BN大鼠各组的组胺释放率均高于豚鼠各组。结论双黄连注射液可造成BN大鼠及豚鼠发生过敏反应。BN大鼠的敏感性可能高于豚鼠,但还需进一步研究。

BN大鼠致敏动物模型研究

目的研究BN大鼠作为评价食物蛋白质过敏性动物模型的可行性。方法通过经口和腹腔注射2种途径给予BN大鼠致敏原和非致敏原。(1)30只雌性BN大鼠,随机分为卵清蛋白(OVA)组、马铃薯酸性磷酸酶(PAP)组和阴性对照组,每组10只。OVA组和PAP组分别每日1次经口灌胃给予1mg/mlOVA、PAP1ml,对照组灌同剂量的生理盐水,共42d。(2)40只雌性BN大鼠,随机分为OVA组、OVA+Al(OH)3(佐剂)组、PAP组和阴性对照组,每组10只。OVA组、OVA+Al(OH)3组和PAP组在试验第1、5、10天分别经腹腔注射剂量0.1mg/ml的OVA溶液、含Al(OH)3的OVA溶液(OVA+Al(OH)3=1+1)、PAP溶液1ml,观察42d。对照组腹腔注射同剂量的生理盐水。于第14、28和42天取血分离血清,测定特异性抗体IgG和IgE。于第21和35天取血分离血浆,测定组胺。测定各组动物的血压变化及胃肠道渗透性。结果致敏原OVA可激发BN大鼠的过敏反应,包括部分大鼠血压的暂时性下降、特异性抗体(尤其是特异性IgE)升高、组胺升高和部分大鼠的胃肠道通透性增加,而非致敏原PAP反应阴性。结论BN大鼠致敏动物模型是比较理想的评价食物蛋白质过敏性的动物模型。

改良中药复方Formula-3治疗BN大鼠食物过敏模型的疗效及肠道的病理变化

目的探讨改良中药复方Formula-3治疗卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏BN大鼠食物过敏模型的疗效及肠道的病理变化。方法将24只BN大鼠按随机数字表法分为生理盐水对照组、OVA模型组、中药复方Formula-3治疗组和中药复方Formula-3对照组,每组6只。将OVA模型组6只BN大鼠建立OVA模型,均成功建模。前6周,OVA模型组、中药复方Formula-3治疗组BN大鼠均给予OVA混合液灌胃,生理盐水对照组、中药复方Formula-3对照组BN大鼠均给予生理盐水灌胃。第7周开始,中药复方Formula-3治疗组、中药复方Formula-3对照组BN大鼠均给予中药复方灌胃,生理盐水对照组、OVA模型组BN大鼠均给予生理盐水灌胃,同时第7、9、11、13周,OVA模型组、中药复方Formula-3治疗组BN大鼠均给予OVA混合液灌胃。第13周后用100g·L-1 OVA灌胃激发,24h后给予乙醚注射液麻醉,处死,摘除眼球取血。检测各组BN大鼠血清OVA-免疫球蛋白E(IgE)、IL-4的水平,光学显微镜和透射电镜下观察各组BN大鼠肠道组织的病理变化。结果 OVA模型组、中药复方Formula-3治疗组BN大鼠血清OVA-IgE、IL-4水平均明显高于生理盐水对照组、中药复方Formula-3对照组(均P<0.05)。中药复方Formula-3治疗组BN大鼠血清OVA-IgE、IL-4水平均明显低于OVA模型组(均P<0.05)。光学显微镜下观察显示中药复方Formula-3治疗组的肠道炎症程度、肠绒毛破坏明显减轻。透射电镜下观察显示OVA模型组可见肠道上皮细胞消失,微绒毛排列紊乱,细胞器破坏,肥大细胞脱颗粒严重,细胞核固缩、消失。中药复方Formula-3治疗组的肠道上皮细胞排列整齐,微绒毛轻度肿胀,肥大细胞脱颗粒减少,细胞核结构正常。结论改良中药复方Formula-3能够通过保护肠道黏膜屏障和抑制炎症来治疗食物过敏性疾病。

BN大鼠和豚鼠对清开灵注射液致速发型过敏反应的比较

为建立适合评价中药注射剂速发型过敏反应的动物模型,同时对清开灵注射液致BN大鼠(Brown Norway rats)和豚鼠的速发型过敏反应进行比较,本研究以清开灵注射液为致敏原,直接对BN大鼠和豚鼠进行致敏和攻击后,观察过敏反应症状,采用ELISA法测量血清和组织中的组胺含量,HE染色法光镜下观察肺组织和气管病理改变。结果显示两次攻击总过敏反应发生率BN大鼠组明显高于豚鼠组,分别为52.78%和16.67%;两次攻击总的过敏反应程度BN大鼠组明显高于豚鼠组;BN大鼠和豚鼠各组血清、肺和气管中的组胺含量均明显升高,与正常对照组比较均具有显著性差异,但BN大鼠各组的组胺释放率均高于豚鼠各组;肺组织、气管的病变率和病变程度,BN大鼠组和豚鼠组无明显差异。试验结果说明,BN大鼠在评价清开灵注射液过敏反应中优于豚鼠,BN大鼠可能为评价中药注射剂过敏反应的适宜动物模型。

BN大鼠致敏动物模型研究

目的建立经腹腔注射途经给予造模致敏原的BN大鼠致敏动物模型。方法分别在实验第1、5和10天,经腹腔注射给予不同性别(雌性和雄性)和不同周龄(4周龄和8周龄)的BN大鼠,不同剂量(1.00、0.10和0.01mg)的造模致敏原———卵清蛋白(OVA),观察35天。分别于第28、35天内眦取血分离血清,用ELISA方法检测血清中OVA特异性IgE。结果与阴性对照组相比,雌性8周龄BN大鼠中、高剂量组第28、35天血清中OVA特异性IgE浓度显著升高(P<0.05);雄性8周龄BN大鼠低、中剂量组血清中OVA特异性IgE浓度在第28天显著升高(P<0.05),高剂量组血清中OVA特异性IgE浓度在第35天显著升高(P<0.05);雄性4周龄BN大鼠,高剂量组血清中OVA特异性IgE浓度在第35天显著升高(P<0.05)。结论经腹腔注射途径给予不同性别和周龄的BN大鼠不同剂量的OVA,雌性大鼠比雄性大鼠更敏感;8周龄大鼠比4周龄大鼠更敏感;0.10mg或1.00mg的致敏剂量较适合。因此,选用雌性8周龄BN大鼠,经腹腔注射给予0.10mg或1.00mgOVA,35天后即可建立比较理想的BN大鼠致敏动物模型。

BN大鼠经口致敏动物模型研究

目的建立经口灌胃途经给予造模致敏原的挪威棕色(Brown Norway,BN)大鼠致敏动物模型。方法选用不同周龄(4周龄和8周龄)及不同性别(雄性和雌性)的BN大鼠,每天经口灌胃给予不同剂量(10.0、1.0、0.1mg)的造模致敏原—卵清蛋白(OVA),共35天。在第28和35天分别进行内眦静脉取血并分离血清,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测血清中OVA特异性IgE(OVA sIgE)浓度。结果中剂量组雌性4周龄和8周龄BN大鼠血清中OVA sIgE浓度在第28和35天较阴性对照组差异有统计学意义(P<0.05);低剂量组雄性8周龄BN大鼠血清中OVA sIgE浓度在第28天较阴性对照组差异有统计学意义(P<0.05);各组雄性4周龄BN大鼠血清中OVA sIgE浓度在第28和35天均较阴性对照组差异无统计学意义。结论经口灌胃途径给予不同性别和周龄的BN大鼠不同剂量的OVA,雌性大鼠比雄性大鼠更敏感;周龄对敏感性无影响;1.0 mg的致敏剂量较适合。因此,选用雌性BN大鼠,每天经口灌胃给予1.0 mg OVA,28～35天即可建立比较理想的BN大鼠经口致敏动物模型。

注射用双黄连与生脉注射液对Hartley豚鼠与BN大鼠主动全身过敏反应的影响

目的:研究注射用双黄连、生脉注射液对Hartley豚鼠与棕色挪威(BN)大鼠的主动全身过敏反应(active systemic anaphylaxis,ASA)及其相关指标,为完善中药注射剂过敏性评价提供实验依据。方法:取Hartley豚鼠或BN大鼠随机分为卵蛋白(OVA)组、注射用双黄连(双黄连)组、生脉注射液(生脉)组、正常组。2种动物分别隔日ih受试药物致敏液3次,于致敏后第14天静脉注射相应的激发液,观察激发后30 min动物的全身过敏反应症状,苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理改变。放射免疫法检测BN大鼠在致敏前及激发后血清总免疫球蛋白E(Ig E)水平的变化、致敏激发后血清类胰蛋白酶变化。结果:对Hartley豚鼠或BN大鼠,OVA组、双黄连组动物均呈现过敏反应症状,肺组织病理切片显示均有明显淋巴细胞浸润等炎症病理表现,但双黄连组较轻。生脉组则未见过敏反应症状以及肺组织病理异常。与正常组比较,OVA组、双黄连组、生脉组大鼠激发后血清总Ig E水平显著升高(P<0.05,P<0.01)。与致敏前同组动物血清总Ig E水平比较,激发后OVA组、双黄连组血清总Ig E水平显著升高(P<0.05,P<0.01)。与正常组比较,OVA组、双黄连组大鼠激发后血清类胰蛋白酶水平显著升高(P<0.01,P<0.05),生脉组有升高趋势,但是无显著差异。结论:采用不同品种实验动物及增加相关检测的指标,能更全面评价注射用双黄连、生脉注射液潜在的致敏性。

BN大鼠致敏动物模型研究

目的验证BN大鼠作为评价转基因食物蛋白致敏性动物模型的可行性。方法 48只雌性BN大鼠随机分为对照组(灭菌水)、马铃薯酸性磷酸酶组(PAP)、鸡蛋清粗提蛋白质组(HEWP)、卵清蛋白低剂量组(OVA-L)、卵清蛋白中剂量组(OVA-M)、卵清蛋白高剂量组(OVA-H),每组8只。各组依次分别每天经口灌胃1 ml灭菌水、1 mg/ml PAP、10 mg/ml HEWP、0.1 mg/ml OVA、1 mg/ml OVA、10 mg/ml OVA溶液,持续6周。分别于第14、28和42天取血分离血清,测定特异性抗体IgG和血清总IgE。于第21和35天取血分离血浆,测定组胺。测定各组动物的血压变化及胃肠道渗透性。结果不同浓度致敏原OVA均可激发BN大鼠过敏反应,包括特异性IgG和血清总IgE升高、组胺升高以及血压下降,其中1 mg/ml OVA溶液为致敏最佳剂量。弱致敏原HEWP过敏反应较弱;非致敏原PAP无过敏反应;各组胃肠功能均未发生明显的生理变化。结论 BN大鼠致敏动物模型是评价转基因食物致敏性较为理想的动物模型。

BN大鼠用于评价中药注射液速发型过敏反应模型的建立及适用性评价

以清开灵注射液、双黄连注射液、黄芩苷、绿原酸为受试样本,以豚鼠为对照,通过观察BN大鼠(brown norwayrats)过敏反应的特异性来建立中药注射液速发型过敏反应的动物模型,并对两者在评价中药注射液过敏反应中的适用性进行比较。本研究以中药注射液为致敏原,直接对BN大鼠进行致敏和攻击后,通过观察过敏症状、过敏反应率、过敏反应程度、组胺释放量、靶器官病变率和病变程度的变化,来评价BN大鼠过敏反应动物模型。结果显示中药注射剂致敏后,BN大鼠出现明显的过敏症状、血清和组织中组胺含量明显增加,肺组织和气管出现明显的病理改变,同时以青霉素和天花粉蛋白为阳性对照,也出现速发型过敏反应的表现;BN大鼠的过敏反应发生率、过敏反应程度、靶器官病变率和病变程度均显著高于豚鼠。试验结果说明BN大鼠为评价中药注射液过敏反应的适宜动物模型,且其敏感性高于豚鼠。

注射用益气复脉(冻干)对BN大鼠和比格犬的致敏性研究

目的通过BN大鼠全身主动过敏(ASA)、被动皮肤过敏(PCA)和比格犬类过敏模型考察注射用益气复脉(冻干)(YQFM)的致敏性。方法 ASA和PCA过敏试验:BN大鼠随机分成5组,即阴性对照组、卵白蛋白(阳性药,2%)组和YQFM低、中、高剂量(230.30、460.60、921.20 mg/kg,460.60 mg/kg为临床等效剂量)组,每组9只,ip给药,隔日注射1次,共致敏5次。致敏结束后随机每组取3只用于取血得血清混匀后用于PCA试验;另外6只用于ASA试验的激发,激发30 min内,观察BN大鼠的全身过敏反应症状,评分并记录;观察结束后取血得血清用于IgE、组胺及β-氨基己糖苷酶水平检测。比格犬类过敏试验:比格犬随机分为阴性对照组、吐温-80(阳性药,2%)组、YQFM(460.60 mg/kg,临床等效剂量)组,每组4只。iv给药1次,分别于给药前、给药后30 min取血,检测血中组胺、IgE、β-氨基己糖苷酶的含量变化;观察给药后比格犬的行为学变化。结果 ASA试验结果显示,除阳性药组外,其他组别BN大鼠未出现阳性过敏反应症状;PCA试验结果显示,除阳性药组外,其他各组大鼠均未出现阳性蓝斑;与阴性对照组比较,阳性药组中的BN大鼠致敏血清IgE、β-氨基己糖苷酶、组胺水平均显著升高(P<0.05、0.01),YQFM各组无显著性变化。比格犬类过敏试验结果显示,与阴性对照组比较,给药后吐温-80组的组胺、β-氨基己糖苷酶显著升高(P<0.05),IgE未见明显升高,个别犬出现流涎、嗜睡等现象;YQFM组别均无明显变化。结论 YQFM在ASA、PCA试验中过敏反应为阴性,对犬类过敏反应也为阴性。