大剂量BOP(N-亚硝基双(2-氧丙基)胺)诱导了金黄地鼠肝内胆管癌而非胰腺癌

目的:用较大剂量的BOP(N-亚硝基双(2-氧丙基)胺)创建金黄地鼠胰腺癌模型。方法:参考文献(Cancer Res,2006,66,4503-11)所用剂量(每周1次共5次,第1次70 mg/kg体重,以后20 mg/kg),给48只雌性金黄地鼠(体重91克-109克)皮下注射BOP,8周后处死有明显腹水的动物(10只),12周后处死余下存活动物(7只),取肝脏和胰腺,作石蜡包埋切片观察组织病理学,并用体视学点计数法估计肝内胆管所占体积比例。结果:所有动物均未发生胰腺癌,所有动物(第12周取材组有1只除外)肝内胆管异常增生,增生的胆管占肝脏体积的14%–62%,所有动物(第12周取材组有2只除外)肝内部分胆管癌变。结论:大剂量BOP更容易损害肝脏,不适于建胰腺癌模型,可能适于建肝内胆管癌模型。

不同剂量N-亚硝基双-2-氧丙基诱导仓鼠胰腺癌的成模效果及对相关基因表达的影响

目的 探讨不同时间、不同剂量N-亚硝基双-2-氧丙基（N-nitrosobis-2-oxopropylamin,BOP）诱导仓鼠胰腺癌的成模效果及仓鼠胰腺癌组织COX-2、5-LOX、GAL-1、GAL-3、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ等基因表达的变化.方法 72只仓鼠按完全随机法分为3组,每组24只.A组采用小剂量BOP长周期皮下注射诱导造模（10 mg/kg体质量,每周1次,连续8周）;B组采用大剂量BOP短周期皮下注射诱导造模（首次剂量70 mg/kg体质量,后3周每周20 mg/kg体质量）;C组为未注射BOP的对照组.成模后取胰腺组织及肝脏组织行病理组织学检查.采用实时PCR法及蛋白质印迹法检测仓鼠胰腺癌组织COX-2、5-LOX、GAL-1、GAL-3、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ等基因的表达.结果 A组仓鼠中19只成功诱导胰腺癌模型;B组均未见胰腺肿瘤形成,而18只仓鼠成功诱导肝内胆管细胞癌;C组胰腺及肝脏均未见异常.仓鼠胰腺癌组织COX-2、5-LOX、GAL-1、GAL-3、MHC-Ⅰ mRNA的表达量分别为对照组的1.93、2.03、1.57、5.55和3.54倍,差异有统计学意义（P值均＜0.05）;COX-2、5-LOX、GAL-1、GAL-3、MHC-Ⅰ蛋白的表达量分别为2.47 ±0.22、0.56 ±0.05、1.23 ±0.05、1.55 ±0.13、2.02 ±0.01,而对照组仓鼠正常胰腺组织的蛋白表达量分别为0.80±0.08、0.39 ±0.01、0.60 ±0.01、0.53 ±0.03、0.40 ±0.02,两组差异均有统计学意义（P值均＜0.05）.两组MHC-ⅡmRNA及蛋白表达的差异无统计学意义.结论 小剂量BOP长周期皮下注射能成功诱导仓鼠胰腺癌模型,胰腺癌组织的COX-2、5-LOX、GAL-1、GAL-3、MHC-Ⅰ基因表达上调,可能参与仓鼠胰腺癌的发生和发展.

金黄地鼠诱发性肝内胆管癌中Wisp-1、β-catenin、TGF-β1及Smad4的表达及意义

目的 利用BOP[N-亚硝基双（2-氧丙基）胺]创建金黄地鼠肝内胆管癌（intrahepatic cholangiocarcinoma,ICC）模型并探讨Wisp-1、β-catenin、TGF-β1及Smad4蛋白在金黄地鼠ICC中的表达及与肿瘤发生的关系。方法 （1）采用57只8～9周龄雌性金黄地鼠（实验组39只,对照组18只）,实验组动物皮下注射BOP,对照组注射等剂量生理盐水,取肝脏组织制作石蜡切片。（2）采用免疫组化法检测肝脏组织中Wisp-1、β-catenin、TGF-β1及Smad4蛋白的表达。结果 （1）实验组39只大鼠中29例发生了ICC,8例发生了胆管不典型增生,1例发生了灶性胆管增生,1例无胆管增生。（2）4种标志物在金黄地鼠ICC组织、胆管不典型增生及正常组织中的阳性率分别为：Wisp-1,79.3%、87.5%和5.0%;β-catenin,96.6%、100.0%和15.0%;Smad4,96.6%、100.0%和25.0%;TGF-β1,62.1%、12.5%和5.0%。Wisp-1、β-catenin及Smad4在金黄地鼠ICC组织及胆管不典型增生组织的表达均高于正常组织（P〈0.001）,TGF-β1蛋白在金黄地鼠ICC组织的表达高于正常组织及胆管不典型增生组织（P〈0.001）。结论 BOP可以诱导金黄地鼠发生ICC,为研究ICC提供可靠的动物模型。β-catenin、Wisp-1、TGF-β1、Smad4蛋白在金黄地鼠ICC组织中表达增加,可能与ICC的发生、发展、侵袭相关。