Borna病病毒与淋巴瘤关系的初步研究

[目的]探讨Borna病病毒(BDV)感染与人类淋巴瘤的关系。[方法]采用荧光定量套式逆转录酶聚合酶链式反应(FQ-nRT-PCR),检测了经病理学诊断的非霍奇金淋巴瘤(NHL)14例、霍奇金淋巴瘤(HD)6例及健康人20例的外周血单个核细胞(PBMC)中BDV p24基因片段。[结果]20例淋巴瘤患者与20例健康对照者的BDV p24基因片段检测均为阴性。[结论]淋巴瘤与BDV感染无明显相关性。

Borna病病毒与病毒性脑炎及精神分裂症的关系

目的探讨Borna病病毒(BDV)与精神分裂症(SCH)及病毒性脑炎(VE)发病的关系。方法对来自遵义市、毕节地区等贵州省部分地区的健康人100例、SCH患者30例、VE患者62例的外周血单核细胞(PBMC)采用巢式逆转录荧光定量PCR法检测是否存在BDVp24基因片段,并纯化、克隆阳性产物,对阳性产物测序并进行同源性分析。结果 BDVp24基因片段在VE[6.5%(4/62)]与健康人(0%)中的阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05),但健康人与SCH患者阳性率[6.7%(2/30)]比较无显著差异(P>0.05)。SCH患者与VE患者经检测之后存在完全相同的测序结果,相较于Gen Bank提供的Strain V毒株、C6BV毒株、1766毒株和He80/FR病毒株存在3%、3%、2%和3%的突变率,其中有3个、3个、2个和3个位点发生一致的基因沉寂性突变,BDV与1766毒株最相似,SCH患者的临床表现与VE患者的临床表现相似。结论遵义市、毕节地区等贵州省部分地区VE的发生率可能与BDV感染有关。BDV p24基因片段未在健康人中检出。

多发性骨髓瘤患者Borna病病毒的检测

目的探讨Borna病病毒(BDV)感染与人类多发性骨髓瘤(MM)发病的关系。方法采用荧光定量套式逆转录聚合酶链式反应(FQ-nRT-PCR)检测了15例MM患者和20例健康对照组外周血单个核细胞(PBMCs)中BDV P24基因片段。结果15例MM患者与20例健康对照组PBMC均未检测到BDV P24基因片段。结论MM与BDV感染无明显相关性。

Borna病病毒和精神分裂症

本文综合介绍了Ｂｏｒｎａ病病毒（ＢＤＶ）和精神分裂症的关系，认为ＢＤＶ可能是精神分裂症的一种环境致病因素。

Borna病病毒与脑梗死后抑郁症关系初探

目的检测人类脑梗死后抑郁症(PD)中Borna病病毒(BDV)感染率,探讨BDV感染与PD的相关性。方法采用采用巢式逆转录酶聚合酶链反应)结合荧光定量聚合酶链反应(FQ-nRT-PCR)检测35例PD患者及35例健康人外周血单个核细胞(PBMCs)中BDVP24基因片段。结果35例PD患者和35例健康对照者外周血BDVP24基因片段检测均为阴性。PD患者BDV阳性率(0)等于健康对照(0),无差异。结论本实验不支持BDV感染与PD的发生具有相关性。

病毒性脑炎患者Borna病病毒P24基因片段的检测

目的探讨Borna病病毒(BDV)感染与人类病毒性脑炎的关系。方法采用荧光定量套式逆转录酶聚合酶链反应(FQ nRT PCR)检测了59例临床诊断的原因未明的病毒性脑炎及112名健康人外周血单个核细胞(PBMC)中BDVP24基因片段。结果59例原因未明的病毒性脑炎患者中有3例PBMC中检出BDVP24基因片段,而112名健康对照均未检出。病毒性脑炎患者BDV阳性率(5.08%)高于健康对照,差异有统计学意义(P<0.05),且BDVP24基因片段检测阳性病例的脑脊液中其他常见致脑炎病毒(单纯疱疹病毒、带状疱疹病毒、腮腺炎病毒、柯萨奇病毒和巨细胞病毒)检查均为阴性。结论中国的部分病毒性脑炎患者中存在BDV感染,BDV感染与病毒性脑炎的发病可能有关。

精神病病人Borna病病毒p23基因片段的检测

为探讨Ｂｏｒｎａ病病毒与人类精神疾病的关系，采用套式逆转录酶／聚合酶链反应技术检测７２例精神病病人和４０名健康献血者周围血单核细胞的Ｂｏｒｎａ病病毒ｐ２３基因片段。结果显示，精神分裂症组的ｐ２３阳性检出率（９．４％）稍高于健康对照组（７．５％），但差异无显著性；双相情感障碍组的阳性检出率（２１．１％）明显高于健康对照组（Ｐ＜０．０５）。提示人类双相情感障碍可能与Ｂｏｒｎａ病病毒感染有关。

病毒性脑炎患者血液和脑脊液博尔纳病病毒p24核苷酸片段的检测

目的探讨博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)与病毒性脑炎(Viral encephalitis,VE)的关系,以及贵州遵义地区是否存在BDV感染。方法采用巢式逆转录荧光定量PCR(FQ-nRT-PCR)检测了32例VE患者和34例对照组(非神经系统疾病外科手术患者)外周血单核细胞(peripheral blood monouclear cells,PBMC)和脑脊液(cerebrospinal fluid,CSF)中的BDV p24基因片段。结果VE患者PBMC和CSF中BDV p24基因片段阳性率均为12.5%。明显高于对照组(0%,Fisher精确概率检验:χ2=4.524,P<0.05);PCR扩增目的基因片段阳性产物测序后,与NCBI网站GenBank提供的BDV标准病毒株V和H1766病毒核苷酸序列比较同源性为95.35%和98.84%,在4个位点出现突变(nt1649T→C,nt1656G→A,nt1670C→T,nt1676C→T),突变率为4.65%;与H1766病毒株亲缘关系最近。结论遵义及其周边地区部分VE患者中存在BDV感染,并可能与病毒性脑炎发病有关。

宁夏地区绵羊博尔纳病病毒自然感染状况研究

目的探讨中国宁夏地区绵羊博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)的自然感染状况,并分析比较中国宁夏地区绵羊自然感染BDVp24基因序列与国外人和动物来源BDV分离株及其标准株StrainV和He/80的同源性。方法采用巢式逆转录荧光定量PCR(FQ-nRT-PCR技术)检测了中国宁夏地区268例绵羊PBMCs中BDVp24基因片段,对阳性标本FQ-PCR产物进行基因序列测定,测序结果应用BLAST软件以及DNAsist5.0软件对测序结果分析,与国外人与动物来源的BDV分离株以及标准株StrainV和He/80进行序列比较。结果268例中4例绵羊外周血BDVp24基因片段阳性,阳性率为1.49%;测序分析结果表明,宁夏地区绵羊感染的BDVp24的核苷酸序列与马源性病毒株H3575同源性最近,同源性为98.84%(85/86),与标准株StrainV和He/80同源性为94.19%和100%。并且它们编码的氨基酸序列相同。结论宁夏地区绵羊中可能存在动物源性的BDV自然感染,该地区感染的BDVp24核苷酸序列与马源性病毒株H3575、标准株StrainV和He/80存在高度的同源性,其感染来源可能相同亦或存在相互之间感染的可能。

病毒性脑炎患者脑脊液博尔纳病病毒p40基因片段的检测

目的探讨贵州遵义地区病毒性脑炎中博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)的感染情况以及BDV与病毒性脑炎的关系。方法采用荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ RT-PCR)方法检测了54例病毒性脑炎患者和45例外科手术患者(除外神经系统疾病及其他常见病毒感染性疾病)脑脊液(CSF)中BDV p40基因片段,对阳性产物进行基因序列测定及分析。结果病毒性脑炎患者CSF中BDV p40基因片段阳性率为11.1%(6/54),明显高于对照组(0),Fisher精确概率检验,P<0.05;其中2例外周血单核细胞(PBMC)及CSF BDV p40基因片段均为阳性。PCR扩增的目的基因片段阳性产物测序后,与NCBI网站GenBank提供的BDV标准病毒株V核苷酸序列比较同源性为100%,未发生突变。结论遵义及周边地区部分病毒性脑炎患者中存在BDV感染;感染人体的BDV p40中段基因片段存在高度的保守性,变异小,BDV p40中段基因片段可能是证实BDV感染的敏感标记物。

病毒性脑炎患者血液和脑脊液博尔纳病病毒p24的检测

目的探讨博尔纳病病毒(BDV)与病毒性脑炎(VE)的关系。方法采用巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)结合荧光定量(FQ)PCR检测了52例VE患者和32例外科手术患者外周血液(PBMC)和脑脊液有核细胞(CSFMC)中的BDV p24基因片段,对阳性产物进行了基因序列测定、同源性和氨基酸顺序分析。结果VE患者PBMC和CSFMC中BDV p24基因片段阳性率(分别为9.6%和11.5%)明显高于对照组(0,P<0.05);PBMC和CSFMC中BDV p24基因片段拷贝数的对数值呈显著正相关(r=0.653,P<0.05);CSFMC所含目的基因片段阳性产物测序后,与BDV标准病毒株V核苷酸序列比较同源性为96.5%,在3个位点出现突变(nt1649T→C,nt1670C→T,nt1673C→T),突变率为3.5%。从系统发生树图形可以看出,该目的基因片段与澳大利亚马脑组织分离的S88和德国绵羊血液分离的H544病毒株亲缘关系最近。结论宁夏及其周边地区部分VE患者中可能存在BDV感染。

以精神行为异常起病的脑炎患者与博尔纳病病毒感染的关系

目的探讨以精神行为异常为主要起病方式的脑炎患者与博尔纳病病毒（BDV）感染的相关性，分析感染BDV的脑炎患者临床特征。方法采用荧光定量巢式逆转录聚合酶链反应方法检测36例有精神行为异常的脑炎患者（患者组）外周血和脑脊液有核细胞中BDVp24和BDVp40基因片段。以B-肌动蛋白作为内参照，同时检测34名健康体检者的外周血和30例实行腰麻患者的脑脊液（对照组）有核细胞中BDVp24和BDVp40基因片段。对BDVp24和BDVp40基因片段均为阳性的标本进行基因测序分析，外周血进行BDV抗体滴度测定，对患者的精神症状采用阳性与阴性症状量表评分，并总结阳性患者的临床特征。结果4例以精神行为异常为主要起病方式的脑炎患者外周血和脑脊液标本BDVp24、BDVp40基因片段检测均为阳性，阳性率为11．1％（4／36），有1例脑脊液BDVp24阳性而外周血单个核细胞中BDVp40基因片段检测阴性，拷贝数均〉10^2kb／山。对照组检测BDVp24、BDVp40基因片段均为阴性（0／34、0／30），两组阳性率比较差异有统计学意义（P=0．015）。对BDVp24和BDVp40基因片段均为阳性的标本进行测序后，发现与马源的BDV病毒株亲缘关系最近。阳性标本的精神症状主要以幻觉、妄想等阳性症状为主，阳性与阴性症状量表评分均在40分以上。结论以精神行为异常起病的脑炎患者与BDV感染有一定的相关性。BDV感染患者主要以阳性精神症状为主。

博尔纳病毒感染与精神分裂症的相关研究

目的 探讨博尔纳病毒（Borna disease virus,BDV）感染与精神分裂症的相关性,分析感染BDV的精神分裂症患者临床特征.方法 采用荧光定量巢式逆转录聚合酶链式反应方法检测86例精神分裂症患者（患者组）和84名健康体检者（对照组）外周血单个核细胞中BDVp24和BDVp40基因片段,以β-肌动蛋白作为内参照,将BDVp24和BDVp40基因片段均为阳性的标本基因进行测序分析,外周血进行抗BDV抗体滴度测定,对患者的精神症状采用PANSS进行量化评分,并总结阳性患者的临床特征.结果 86例精神分裂症患者中外周血标本BDV p24基因片段阳性检出率11.6％ （10/86）,BDVp40基因片段检出率13.4％ （12/86）,拷贝数均＞10^2 kb/μl.对照组检测BDVp24、BDVp40基因片段均为阴性,两组阳性率比较差异有统计学意义（x^2=9.26,P＜0.05）.对BDV p24和BDVp40基因片段均为阳性的标本测序后,与马源的BDV病毒株亲缘关系最近.阳性标本的精神分裂症患者精神症状主要以幻觉、妄想等阳性症状为主,PANSS量表评分均＞40分.结论 精神分裂症发病与BDV感染有一定的相关性,是否是唯一的相关性还有待进一步研究,BDV感染的精神分裂症患者主要以阳性精神症状为主.

宁夏地区病毒性脑炎中新发博尔纳病病毒感染的研究

目的 研究宁夏地区新发博尔纳病病毒（BDV）在病毒性脑炎患者中的感染状况,分析病毒株的核酸序列、编码的氨基酸序列和病毒株的系统发生.方法 套式反转录实时荧光定量PCR检测60例病毒性脑炎患者血液标本;并对前期课题组检测的59例病毒性脑炎患者中BDV p24阳性样本和本实验PCR检测阳性标本使用ELISA法检测其对应脑脊液中p40抗体,对阳性标本进行连接测序,应用MEGA和DnaSP4.0软件对测序结果与国外标准株He/80、H1766、strain V等的核酸和氨基酸序列对比分析,构建病毒基因的系统发生树.结果 PCR检测119份血标本,发现有12份标本BDV p24阳性,阳性检出率为10.08%,7份BDV p40检测阳性,阳性率为5.88%;ELISA检测脑脊液核蛋白抗体,有2份阳性,阳性检出率为1.68%.基因聚合分析显示,7份BDV阳性的核酸序列中有6份与德国马源性的He/80株同源性达100%,1份仅有1个碱基发生同义突变;转录后的氨基酸对比分析显示,7份与He/80株完全一致;重构的基因系统发生树中可见宁夏病毒性脑炎患者BDV核苷酸序列与国外标准株形成一个中国（宁夏）-德国-日本的混合支系.结论 宁夏地区病毒性脑炎患者中可能存在BDV感染,其发生可能与动物的密切接触相关,病毒在种系发生中与德国马源性He/80株有极高的同源性,推断病毒有可能从国外传入本土,不排除病毒株变异的可能.

博尔纳病病毒感染与神经胶质瘤相关性研究

目的探讨博尔纳病病毒(BDV)感染与神经胶质瘤发生的可能相关性。方法用Western-blot方法,对23例神经胶质瘤患者和23例脑外伤患者血清中BDV-p24/p40特异性抗体进行检测。结果 23例神经胶质瘤患者血清中BDV-p24/p40抗体阳性4例,阳性率为17.4%;脑外伤患者血清标本中无BDV-p40抗体检出,阳性率为0%。结论神经胶质瘤患者血清中存在博尔纳病病毒的感染。

病毒性脑炎患者BDVp24、p40基因片段的核酸检测

目的分别检测病毒性脑炎患者脑脊液有核细胞（CSFMCs）中博尔纳病病毒（BDV）p24、p40基因片段，探讨病毒性脑炎患者与BDV感染的关系及阳性患者的临床特征。方法用荧光定量巢式逆转录聚合酶链反应（FQ—nRT—PCR）方法检测病毒性脑炎患者及对照者CSFMCs中BDVp24、p40基因片段，将两个保守区p24和p40检测均为阳性的标本再做进一步分析，并总结阳性患者的临床特征，同时用β-肌动蛋白（B—actin）作为内参照。结果实验组102例病毒性脑炎患者CSFMCs中BDVp24基因片段检测中有11例阳性，BDVp40基因片段检测中有10例阳性，两个保守区p24和p40检测均为阳性标本10例，对照组84例中均为阴性，两者比较阳性率差异有统计学意义（P〈0．05）。阳性基因片段产物测序后与BDV标准病毒株V和马源的BDV病毒株H1766序列比较，同源性分别为96．35％和98．85％，在4个位点出现基因突变（nt1649T→C，nt1656G→A，nt1670C→T，nt1676C→T）；8例阳性患者主要以精神行为异常为起病方式，患者与动物关系密切，其他临床特征无特殊。结论病毒性脑炎的发生与BDV感染有关，主要以精神行为异常为临床特征。