恶性胸膜间皮瘤细胞培养条件及CDKN2B对癌细胞的作用

目的探讨不同培养条件(RPMI-1640、DMEM和DMEM/F12培养液)对人恶性胸膜间皮瘤(malignant pleural mesothelioma,MPM)组织中分离的MPM细胞传代的影响以及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2B(cyclin dependent kinase inhibitor 2B,CDKN2B)对MPM细胞增殖、侵袭和凋亡的作用。方法从MPM组织中分离细胞分别用RPMI-1640、DMEM和DMEM/F12培养液培养。CCK-8检测细胞增殖,细胞核及染色体利用瑞氏-吉姆萨染色观察,免疫荧光实验检测MPM标志物Calretinin、CD141、CK5、EMA和WT-1荧光强度。RT-qPCR和Western blot分别检测CDKN2B的mRNA和蛋白表达能力。Transwell检测细胞侵袭能力,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果建立的MPM细胞在RPMI-1640、DMEM和DMEM/F12培养液中传至第10代仍具有较好的活力,且MPM标志物Calretinin、CD141、CK5、EMA和WT-1在细胞中均表达,MPM细胞在RPMI-1640培养液中活力较为稳定。CDKN2B在MPM细胞中低表达(P<0.05),过表达CDKN2B显著抑制MPM细胞的增殖(P<0.05)、侵袭(P<0.05)和上皮间质转化(P<0.01),促进细胞凋亡(P<0.01)。结论建立的MPM细胞可在RPMI-1640培养液中稳定传代,CDKN2B可作为MPM诊断和治疗的潜在靶标。

RPMI1640培养液在阴道滴虫培养中的应用

目的：评价ＲＰＭＩ１６４０培养液在阴道滴虫体外培养中的应用效果。方法：在ＲＰＭＩ１６４０培养液中加入其它成份，配制成新的阴道滴虫培养基。观察其对阴道滴虫的培养效果。并与ＣＰＬＭ培养基作比较。结果：滴虫在两种培养基中的增殖倍数有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。在临床标本分离方面与ＣＰＬＭ培养基无明显差异，但在保种时间上比ＣＰＬＭ培养基较长。

大鼠胸导管内皮细胞的体外培养和观察

目的 体外培养大鼠胸导管内皮细胞 ,为研究淋巴管内皮细胞的生理功能、病理改变以及分子水平调节等提供手段。方法 术前用脂肪喂食大鼠 ,标记胸导管 ,将胸导管两端结扎 ,取下胸导管后充分分离和剪碎 ,在RP MI16 4 0培养液中直接培养 ,观察胸导管内皮细胞的生长。结果 胸导管内皮细胞呈铺路石样生长 ,Ⅷ因子相关抗原呈阳性反应。结论 此法简便易行 。

RPMI-1640培养液加入VitC、庆大霉素体外培养恶性疟原虫效果观察

体外连续培养恶性疟原虫，观察培养液中加入VitC、庆大霉素对恶性疟原虫生长的影响。结果显示VitC、庆大霉素对恶性疟原虫的发育与繁殖影响不明显。