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BP180NC16a与大疱性类天疱疮病情变化的关系 被引量:8
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作者 李妍 王娣 +4 位作者 陈喜雪 钟珊 邱于芳 赵俊郁 朱学骏 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2009年第6期332-334,共3页
目的探讨大疱性类天疱疮(BP)患者外周血血清IIF滴度、BP180NC16a-ELISA指数与病情变化的相关性。方法监测12例以系统糖皮质激素治疗为主的泛发性BP患者不同时期病情变化及其相应的IIF滴度和BP180NC16a-ELISA指数,并对结果进行分析。结果... 目的探讨大疱性类天疱疮(BP)患者外周血血清IIF滴度、BP180NC16a-ELISA指数与病情变化的相关性。方法监测12例以系统糖皮质激素治疗为主的泛发性BP患者不同时期病情变化及其相应的IIF滴度和BP180NC16a-ELISA指数,并对结果进行分析。结果IIF滴度与病情变化没有平行关系,BP180NC16a-ELISA指数与病情变化较平行。结论BP180NC16a-ELISA指数可作为BP病情的监测和调整治疗方案的重要参考。 展开更多
关键词 大疱性类天疱疮(BP) 间接免疫荧光(IIF) bp180nc16a—ELISA
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BP180NC16A-IgG1Fc融合蛋白真核表达体系构建 被引量:3
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作者 王佩茹 王明悦 +1 位作者 朱学骏 陈喜雪 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2012年第9期797-800,共4页
目的构建BP180NC16A-IgG1Fc融合蛋白的真核表达体系。方法①以逆转录PCR(reverse transcrip-tion-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法从表皮组织提取总RNA中扩增编码人BP180NC16A的cDNA,与包含编码人免疫球蛋白IgG1Fc段恒定区基因... 目的构建BP180NC16A-IgG1Fc融合蛋白的真核表达体系。方法①以逆转录PCR(reverse transcrip-tion-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法从表皮组织提取总RNA中扩增编码人BP180NC16A的cDNA,与包含编码人免疫球蛋白IgG1Fc段恒定区基因的质粒pFUSE-hIgG1e4-Fc2融合,形成重组pFUSE-hIgG1e4-Fc2-BP180NC16A质粒。②重组质粒转染真核HEK293T细胞,48h后收集细胞培养上清。③通过免疫印迹的方法鉴定转染细胞上清中分泌的BP180NC16A-IgG1Fc融合蛋白。结果构建了pFUSE-hIgG1e4-Fc2-BP180NC16A真核表达质粒并在HEK293T细胞成功表达BP180NC16A-IgG1Fc融合蛋白。结论 BP180NC16A-IgG1Fc融合蛋白能够成功真核表达。 展开更多
关键词 bp180nc16a IgG1Fc 融合蛋白 真核表达
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BP180NC16a酶联免疫吸附测定在妊娠期类天疱疮的血清学诊断以及妊娠瘙痒性荨麻疹性丘疹与斑块病鉴别中的作用 被引量:3
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作者 Powell A.M Sakuma-Oyama Y +1 位作者 Oyama N 李晓莉 《世界核心医学期刊文摘(皮肤病学分册)》 2005年第10期23-23,共1页
Background: Pemphigoid gestationis (PG) is a rare pregnancyassociated subepidermal immunobullous disease that targets hemidesmosomal proteins, particularly BP180. Clinically, PG can resemble the eruption known as poly... Background: Pemphigoid gestationis (PG) is a rare pregnancyassociated subepidermal immunobullous disease that targets hemidesmosomal proteins, particularly BP180. Clinically, PG can resemble the eruption known as polymorphic urticarial papules and plaques of pregnancy (PUPPP), and accurate differentiation between these 2 pruritic pregnancy dermatoses has important implications for fetal and maternal prognoses. Results of epitope mapping studies show that IgG autoantibodies in up to 90%of PG serum samples target the well-defined membrane-proximal NC16a domain of BP180. Objective: To examine the usefulness of a commercially available NC16a domain enzyme-linked immunosorbent assay in the serodiagnosis of PG and in the differentiation of PG from PUPPP. Participants: A total of 412 women consisting of pretreatment patients with PG (n=82), patients with PUPPP (n=164), and age-and sex-matched controls (n=166). Methods: All serum samples were assayed in duplicate. Receiver operating characteristic analyses were performed to determine a cutoff value for the diagnosis of PG and for differentiation from PUPPP and controls. Results: A cutoff value of 10 enzyme-linked immunosorbent assay units was associated with specificity and sensitivity of 96%. Conclusions: The NC16a enzyme-linked immunosorbent assay is highly sensitive and highly specific in differentiating PG from PUPPP, and it is potentially a valuable tool in the serodiagnosis of PG. 展开更多
关键词 类天疱疮 bp180nc16a 血清学诊断 自身抗体 大疱 预治疗 瘙痒性皮肤病 桥粒蛋白 多形性 靶组织
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大疱性类天疱疮患者血清抗BP180NC16A IgG抗体亚型检测 被引量:2
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作者 周细平 左亚刚 +2 位作者 刘冰 何春霞 刘跃华 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第32期2529-2533,共5页
目的建立并优化大疱性类天疱疮(BP)抗BP180NC16A IgG抗体亚型的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法,评估其敏感性和特异性。方法通过在大肠杆菌中表达并纯化GSTBP180NC16A重组蛋白,建立抗BP180NC16A IgG亚型的ELISA检测方法,检测2... 目的建立并优化大疱性类天疱疮(BP)抗BP180NC16A IgG抗体亚型的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法,评估其敏感性和特异性。方法通过在大肠杆菌中表达并纯化GSTBP180NC16A重组蛋白,建立抗BP180NC16A IgG亚型的ELISA检测方法,检测2009至2012年北京协和医院136例BP患者血清中抗体水平,以20名健康体检者血清作为对照;阳性界值为健康对照血清测得的均值加3倍标准差,高于该界值的判断为阳性。并利用Western印迹法检测其中4种抗体均阳性的患者血清,和ELISA方法进行比较。结果ELISA法检测的特异性IgGl、IgG2、IgG3和IsG4的阳性界值分别为0.113、0.196、0.154和0.120,20名健康对照4种IgG亚型检测值均低于阳性界值水平,使本检测方法特异性较好。136例患者抗BP180NC16AIgG1、IgG2、IgG3及IgG4抗体亚型阳性率分别为67.6%(92/136)、45.6%(62/136)、50.7%(69/136)和54.4%(74/136);其中4种IgG亚型均阳性者29例,占21.3%;至少一种IgG亚型为阳性者112例,占82.4%,即4种亚型综合敏感度为82.4%。而Western印迹检测20例经ELISA证实4种IgG亚型抗体均阳性的患者血清显示IgG1和IgG4阳性人数分别为15、14例。结论本研究建立的ELISA方法的特异性较好,敏感性尚需进一步提高。 展开更多
关键词 类天疱疮 大疱性 酶联免疫吸附测定 免疫球蛋白G 亚型 bp180nc16a
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抗BPl80NCl6AIgEELISA检测方法的建立 被引量:1
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作者 刘冰 左亚刚 +5 位作者 周细平 何春霞 李军 铁·杜尔娜 李丽 孙秋宁 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第28期2244-2247,共4页
目的建立抗BPl80NCl6AIgE抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法,评价其在大疱性类天疱疮(BP)诊断中的意义。方法采用pGEX一2T原核表达GST—BPl80NCl6A融合蛋白,并用谷胱甘肽亲和层析法进行纯化。采用棋盘滴定法确定抗原包被浓度... 目的建立抗BPl80NCl6AIgE抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法,评价其在大疱性类天疱疮(BP)诊断中的意义。方法采用pGEX一2T原核表达GST—BPl80NCl6A融合蛋白,并用谷胱甘肽亲和层析法进行纯化。采用棋盘滴定法确定抗原包被浓度,明确二抗及待测标本最佳稀释度,确定最佳实验条件。对2011年2月至2012年10月就诊于北京协和医院的56例BP患者、24名健康对照以及18例天疱疮、1例Stevens—Johnson综合征(SJS)患者血清进行检测,根据受试者工作特征(ROC)曲线确定最优阳性界值并评价其敏感度和特异度。结果确定抗原包被浓度为500μg/ml、酶标二抗最佳稀释倍数为1:1000,血清标本采用原液及1:10为最佳实验条件。根据ROC曲线判断最优阳性界值为0.549,实验的敏感度为71.4%、特异度为100%。天疱疮和SJS患者血清中此抗体均为阴性。结论抗BPl80NCl6AIgE抗体检测方法具有较高的特异度以及相对较高的敏感度,在BP的诊断及发病机制的研究中具有重要意义。 展开更多
关键词 类天疱疮 大疱性 免疫球蛋白E 酶联免疫吸附测定 bp180nc16a
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抗BP180N C16A IgG亚型检测方法的建立以及在大疱性类天疱疮中的意义 被引量:3
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作者 左亚刚 LIU Zhi 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期384-387,共4页
目的建立抗BP180NC16A IgG亚型的检测方法,并探讨其在大疱性类天疱疮(BP)中的意义。方法原核表达GST—NC16A融合蛋白,并采用亲和层析法纯化。优化ELISA关键环节,建立抗BP180NC16AIgG各亚型的ELISA检测方法,并对10例未经治疗的BP、... 目的建立抗BP180NC16A IgG亚型的检测方法,并探讨其在大疱性类天疱疮(BP)中的意义。方法原核表达GST—NC16A融合蛋白,并采用亲和层析法纯化。优化ELISA关键环节,建立抗BP180NC16AIgG各亚型的ELISA检测方法,并对10例未经治疗的BP、5例妊娠疱疹、1例成人线状IgA大疱性皮病、2例天疱疮患者血清分别进行检测。结果通过方阵测定法确定GST—NC16A融合蛋白的包被浓度为500μg/L,包被条件为4℃12h,血清稀释倍数为1:100,酶标二抗为1:2000,孵育条件为37℃1h,底物反应条件37℃20min。10例大疱性类天疱疮患者10例IgG1阳性,9例IgG2阳性,5例IgG3阳性,9例IgG4阳性。2例寻常型天疱疮、1例成人线状IgA大疱性皮病均阴性。5例妊娠疱疹所有亚型均阳性,以IgG1和IgG3亚型为主。结论抗BP180NC16AELISA检测法特异性强、重复性好,是检测BP和妊娠疱疹患者抗BP180NC16A抗体亚型的半定量方法。 展开更多
关键词 类天疱疮 大疱性 免疫球蛋白G 酶联免疫吸附测定 bp180nc16a
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