焦炉工人血浆BPDE-白蛋白加合物与外周血淋巴细胞DNA损伤水平的相关关系

目的探讨焦炉工人早期生物效应标志物DNA损伤与生物有效剂量标志物苯并(a)芘二氢二醇环氧化物(BPDE)-白蛋白加合物之间的关系。方法选取某焦化厂207名焦炉工人作为接触组,102名非焦炉作业人员为对照组,采用反相高效液相色谱法测定血浆中BPDE-白蛋白加合物浓度,采用彗星实验测定外周血淋巴细胞DNA损伤水平。结果焦炉工人的血浆BPDE-白蛋白加合物浓度和外周血DNA损伤水平明显高于对照组(P<0.01)。使用多元logistic回归分析校正了个体的工龄、吸烟和饮酒状况后,焦炉工人BPDE-白蛋白加合物浓度增高的危险度是对照组的1.72倍(P<0.05),焦炉工人DNA损伤水平增高的危险度是对照组的1.96倍(P<0.05)。BPDE-白蛋白加合物与DNA损伤水平在焦炉工人中存在明显的正相关关系(Spearman偏相关系数=0.235,P<0.01),但在对照组中不存在相关关系(Spearman偏相关系数=0.093,P>0.05)。结论焦炉工人生物有效剂量标志物BPDE-白蛋白加合物和早期生物效应标志物DNA损伤之间存在明显相关。

焦炉工人血浆BPDE-白蛋白加合物与尿中1-羟基芘浓度的关系

[目的]探讨血浆中苯并(a)芘二氢二醇环氧化物(BPDE)-白蛋白加合物作为焦炉工人多环芳烃长期暴露的生物标志物的可行性及其与尿中1-羟基芘(1-OHP)浓度之间的关系。[方法]采用反相高效液相色谱方法,对焦化厂37名焦炉作业工人(接触组)和47名非焦炉作业人员(对照组)血浆中BPDE-白蛋白加合物和尿中1-羟基芘浓度分别进行测定。[结果]接触组血浆中BPDE-白蛋白加合物和尿中1-羟基芘浓度的中位数分别为42．10fmol/mg白蛋白和5．46μmol/mol肌酐,均显著高于对照组(14．16μmol/mg白蛋白,2．96μmol/mol肌酐,P<0．01)。校正了个体的年龄、吸烟和饮酒状况后,接触组BPDE-白蛋白加合物浓度增高的危险度是对照组的1．79倍(P<0．05)。接触组1-羟基芘浓度增高的危险度是对照组的2．45倍(P<0．05)。并且在所有研究对象中,BPDE-白蛋白加合物与尿中1-羟基芘浓度存在显著的正相关关系(rs=0．349,P<0．01)。[结论]血浆中BPDE-白蛋白加合物与尿中1-羟基芘水平显著相关,BPDE-白蛋白加合物可作为反映多环芳烃较长时期暴露的接触生物标志物。

人体血清中黄曲霉毒素-白蛋白加合物的测定及应用

黄曲霉毒素B1 (AFB1 )是人类原发性肝癌 (HCC)的主要病因之一 ,发展和应用AFB1 及其体内分子生物标记物敏感、特异的检测方法对肝癌高危人群的筛检具有重要意义。人体血清中黄曲霉毒素 白蛋白加合物 (AFB ALB)的测定已应用于人体黄曲霉毒素暴露水平与肝癌的研究 ,本研究旨在建立敏感特异的AFB ALB的测定方法。该方法选择使用Microcon 5 0微型浓缩器使白蛋白快速分离 ,改变了用沉淀和其他分离白蛋白的方法 ,同时由于在同一装置内加入蛋白分解酶消化 ,从而减少了转移操作步骤 ,增加了白蛋白的回收率 ,对消化样品采用竞争性放射免疫测定 (RIA)法进行AFB ALB的测定 ,提高了测定的敏感性及特异性。应用改进的方法对我国江苏启东和广西扶绥两肝癌高发区居民的血样进行了测定 ,表明该地区人群黄曲霉毒素暴露较普遍 ,血清AFB ALB阳性率高。

高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱检测芥子气染毒动物血浆中烷基化白蛋白加合物

建立高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(HPLC/Q-TOFMS)分析动物血液样品中芥子气(HD)染毒烷基化白蛋白加合物(半胱氨酸-34加合物)的方法。在采用不同样品处理和仪器条件优化的基础上,确定最佳实验条件。HD染毒全血首先离心分离成血细胞和血浆,然后取50μL血浆加入50μL的10mg/mL链霉蛋白酶NH_4HCO_3(50mmol/L)水溶液,于37℃孵化酶解2.5h,酶解后的样品用0.5mL10KD超滤管超滤,在滤液中成功检测到S-[2-[(巯乙基)硫]乙基]半胱氨酸-脯氨酸[(S-HETE)Cys-Pro]二肽加合物。结果表明该方法简单、快速、准确、灵敏。

加速器质谱法研究尼古丁与小鼠血液蛋白的加合作用

采用加速器质谱法（AMS）研究了小鼠血液中的血红蛋白（Hb）、白蛋白（SA）和尼古丁的加合作用．在尼古丁剂量从相应于人吸烟的环境剂量水平0．1μg／kg体重到 100 μg／kg体重范围内，测量了尼古丁－血红蛋白加合物和尼古丁－白蛋白加合物的剂量效应曲线．两种蛋白的尼古丁加合物水平都随着尼古丁剂量的升高而线性增加．在实验剂量范围内，两种蛋白质加合物的水平与小鼠肝DNA加合物水平也呈现良好的线性关系．这说明两种蛋白质加合物均可以替代DNA加合物作为尼古丁的生物标记物．在本工作中，蛋白质加合物的测量灵敏度为 0．03 pmol／g 蛋白（即 3．2个加合物/ 1012氨基酸残基），达到了文献报道的测量蛋白质生物标记物最高的灵敏度．

药物与人血清白蛋白共价加合物的鉴定研究进展

药物及其代谢物与蛋白质的共价结合形成药物-蛋白质加合物,可能导致机体的不良反应。加合物组学技术的进展,有助于系统研究药物与人血浆蛋白的共价加合。对于许多药物而言,如β-内酰胺抗生素、酰基葡萄糖苷酸、共价酪氨酸激酶抑制剂及反应性代谢物,人血清白蛋白是形成药物-蛋白质加合物的潜在靶标和生物标志物。本综述将叙述相关的技术进展,阐述药物与人血清白蛋白共价加合物的鉴定方法,定义形成加合物的化学反应,并初步探讨药物与人血清白蛋白共价加合在药物不良反应中的作用以及对药动学的潜在影响。

萘代谢产物白蛋白加合物作为焦炉工接触生物标志物的初步探索

目的探讨萘代谢产物的白蛋白加合物作为焦炉工接触生物标志物的可行性。方法随机选取某焦化厂28名焦炉作业工人(接触组)和22名对照个体(对照组),工人在连续工作4d的班后采集静脉血和尿样,并使用调查表收集个人信息。采用气相色谱质谱联机方法测定血浆中白蛋白加合物。结果在接触组及对照组中均检测出1,2萘醌及1,4萘醌与白蛋白的加合物(1,2NPQAlb和1,4NPQAlb)。接触组1,2NPQAlb水平(766pmol/g)高于对照组(449pmol/g),差异有统计学意义;1,4NPQAlb水平在接触组(486pmol/g)和对照组(442pmol/g)间差异无统计学意义。接触组1,2NPQAlb水平(766pmol/g)高于1,4NPQAlb(486pmol/g),差异有显著性。尿中萘、1萘酚、2萘酚及1羟基芘浓度与1,2NPQAlb水平间呈显著相关性,而与1,4NPQAlb之间未见明显的相关关系。结论1,2NPQAlb可有效地反映个体中长期暴露于气态多环芳烃的内剂量水平,有可能作为生物标志物用于焦炉工的生物监测。

重量法测定血苯-白蛋白加合物的初步研究

苯进入人体内形成有很高活性的环氧化物，可与多种蛋白形成加合物。有研究用同位素标记的苯（Ｃ６２Ｈ６）白蛋白为内标衍生后，用气质联仪（ＧＣＭＳ）测定血液中的苯白蛋白加合物［１］。由于采用昂贵的仪器和同位素内标物，在一般实验室难以进行。本研究采用重...

人群血液中黄曲霉毒素白蛋白加合物检测方法综述

黄曲霉毒素（aflatoxins，AFT）是由黄曲霉（aspergillus）、寄生曲霉（A．parasiticus）和特曲霉（A．nornius）的某些产毒菌株产生的次级代谢产物。AFT是一类化学结构类似的二呋哺香豆素衍生物，目前已分离鉴定出20多种，包括B1、

UPLC-MS/MS方法评估人对食物中杂环胺的摄入

采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)技术,建立了人体摄入吸收后的食物致癌物杂环胺(HAAs)与血清白蛋白(HSA)形成的亚磺酰胺加合物的准确、高灵敏度检测方法,用于评估HAAs的摄取,研究HAAs与相关癌症风险的关系。选取2-氨基-1-甲基-6-苯基咪唑并[4,5-b]吡啶(PhIP)为研究对象,依据PhIP在人体内的代谢途径,体外合成PhIP-HSA亚磺酰胺加合物。使用UPLC-MS/MS检测PhIP-HSA亚磺酰胺加合物的酸水解产物PhIP,对PhIP-HSA亚磺酰胺加合物进行定量。结果表明,HiTrap Blue亲和柱对HSA的回收率高于90%;优化的条件下,PhIP-HSA亚磺酰胺加合物的水解效率高达96%;PhIP-HSA亚磺酰胺加合物的含量与PhIP的信号强度呈良好线性关系;线性回归方程是y=1.0117x+3.2563,R^(2)=0.9987。该方法的检测限和定量限分别低至5×10^(-3) fmol/mg HAS和1.50×10^(-3) fmol/mg HSA。该方法对人血浆中PhIP-HSA亚磺酰胺加合物的测定具有较高的灵敏度,在HAAs摄入与相关癌症风险关系的研究中,是用于评估常食用熟肉个体的HAAs摄入的可行方法。

肝癌高发地区人群黄曲霉毒素暴露水平的评估

目的 :通过对我国原发性肝癌高发区居民进行较为全面的黄曲霉毒素 (AFT)暴露水平的评估 ,为进一步研究AFT与肝癌的关系提供依据。方法 :选择甲地 (广西扶绥县竹琴村 )、乙地 (江苏启东通兴乡 )和丙地 (启东天汾镇 )作为调查地区 ,应用AFT生物标记物的检测 ,对人群AFT暴露水平进行评估。结果 :食物结构调查表明 ,甲地居民以玉米为主食 ,乙地和丙地居民则以大米为主食 ,粮食中黄曲霉毒素B1(AFB1)的污染水平以甲地最为严重 ;居民膳食中AFB1的摄取量即AFT外暴露水平、血清中AFB1 白蛋白 (AFB1 ALB)加合物水平、肝癌发病率均以甲地最高 ,丙地最低 ,且有显著性差异。结论 :AFT外接触水平高的居民 ,AFB1 ALB加合物水平、尿中AFM1水平亦高 ,说明两者是反映AFB1外接触剂量的良好指标。在现有膳食结构条件下 ,AFT暴露仍是肝癌危险因素之一。

高发区肝癌生物分子标志物研究现状

分子流行病学是将传统流行病学的原理和方法与现代分子生物学技术相结合的一门科学。开展分子流行病学必须应用各种生物标志物(biomarker)。生物标志物是环境病因与生物机体相互作用的产物。分子生物标志物大致可分为三类:暴露、效应和遗传易感性生物标志物。

诊断

CYP2D6 C188T单核苷酸多态与肺癌易感性；云锡矿工肺癌组织DAPK基因表达及其甲基化异常；双向电泳-质谱技术筛选矽肺血清差异蛋白的研究；焦炉工人血浆BPDE-白蛋白加合物与尿中1-羟基芘浓度的关系；

重庆地区黄曲霉毒素暴露与原发性肝癌关联的病例-对照研究

目的 分析黄曲霉毒素（AFB1）暴露与原发性肝癌（PHC）发生的关联性.方法 于2013年12月至2016年5月,收集来自重庆市3所医院的214例新确诊PHC患者.病例组纳入符合PHC的诊断标准,排除药物性肝损伤、酒精性肝损伤、脂肪肝、胆结石等病因明确引起的肝癌病例;对照组来自同医院内同时期非肿瘤、无消化系统疾病患者,以性别、年龄（±3岁）与病例组进行1：1匹配.收集患者外周血和尿,通过生化仪检测血中乙型肝炎表面抗原,采用ELISA检测血清AFB1-ALB加合物和尿AFB1-N7-GUA加合物.通过问卷调查患者基本信息、生活习惯和疾病史.采用Wilcoxon秩和检验比较病例组与对照组血清AFB1-ALB加合物和尿AFB1-N7-GUA加合物含量差异.采用二元logistic回归模型分析PHC危险因素,并利用Andersson方法计算AFB1与其他因素的交互作用强度指数（S）.结果 病例组年龄为（50.74±9.67）岁,对照组为（51.15±9.90）岁,差异无统计学意义（P〉0.05）.二元logistic回归模型分析显示,HBV在PHC发生过程中OR值为46.3（95%CI：23.3~88.0）.病例组血清AFB1-ALB加合物的中位数（146.23 ng/g白蛋白）高于对照组（74.42 ng/g白蛋白）（P〈0.001）,但病例组与对照组尿AFB1-N7-GUA加合物的中位数（0.17比0.14 ng/mg肌酐）差异无统计学意义（P=0.210）,两种加合物高暴露组PHC发生的调整OR值分别为1.9（95%CI：1.1~3.4）、2.1（95%CI：1.0~4.2）.AFB1和HBV、饮酒、糖尿病存在正交互作用,AFB1-ALB加合物与这3个因素的S值分别为4.7（95%CI：2.8~7.9）、3.5（95%CI：1.0~12.0）、12.4（95%CI：1.8~84.2）,AFB1-N7-GUA加合物与这3个因素的S值分别为1.9（95%CI：1.1~3.1）、2.0（95%CI：1.1~3.6）、2.0（95%CI：1.1~3.6）.结论 HBV依然是重庆地区PHC最主的危险因素,而AFB1暴露也是该地区PHC发生的独立危险因素,且与HBV、饮酒、糖尿病存在正交互作用.

中国启东肝癌预防:黄曲霉毒素生物标志物研究的经验(英文)

原发性肝癌一直是中国启东癌症死亡的首要原因,这一地区的110万居民中大约每年有800人死于原发性肝癌。流行病学研究已经强调了乙肝病毒感染和肝致癌物黄曲霉素的饮食暴露在启东和其他流行地区作为关键相互作用的风险决定因素的重要性。由于生物标志物的发展,使得在病例对照研究和其他群体研究中可以检测这些风险因素的流行程度。20世纪80年代曾经在启东进行了乙肝病毒疫苗接种试点,但直到本世纪初才在新生儿上普遍接种。尽管目前疫苗接种对癌症死亡率的影响微乎其微,但该项目旨在减缓这一地区未来几代人肝脏疾病包括肝癌的发展。减少对黄曲霉毒素暴露的策略也是必需的,尤其是对于那些已经感染乙肝病毒的人群。我们已经进行了一系列原理验证性的临床试验,包括使用药物、膳食补充剂和食物来改变不可避免的暴露后黄曲霉素的代谢及排出。使用黄曲霉素生物标志物作为中间指标,奥替普拉、叶绿素和西兰花豆芽饮料已被证明有效,突出了低成本化学预防途径在预防环境致癌中的作用。值得注意的是,最近对存档的血清样本的回顾性分析表明,启东的黄曲霉素暴露在过去的25年里下降了40倍,这可能是由从玉米到大米的主食变化带来的。因此,一级预防,伴随着20世纪80年代经济和农业政策改变的作用,带来了出乎意料的在短时间内消除这个地区肝癌地方性流行的希望。

代谢组学鉴定十字花科蔬菜摄入后人体尿液中的生物标志物

流行病学研究显示人类的许多疾病如癌症(乳腺癌、肺癌和膀胱癌)的发病率和人体十字花科蔬菜(CV)摄入量成负相关。十字花科蔬菜对糖尿病、心血管疾病和神经系统疾病等具有明显的保护作用。十字花科蔬菜对肿瘤性疾病的抑制作用有赖于其含有丰富的芥子油苷。芥子油苷的酶解产物主要异硫氰酸酯(ITC),其在体内组成谷胱甘肽共轭物与白蛋白加合物。