谷氨酰胺酶1抑制剂对四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化的影响

目的 探讨谷氨酰胺酶1(glutaminase 1,GLS1)特异性抑制剂BPTES[bis-2-(5-phenylacetamido-1,3,4-thiadiazol-2-yl)ethyl sulfide]对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)诱导的小鼠肝纤维化模型肝纤维化的影响。方法 经雄性C57BL/6J小鼠腹腔注射橄榄油(对照组)、10%CCl4(10μL/g,模型组)或10%CCl4(10μL/g)+BPTES(10 mg/kg,处理组),每组10只,每周注射2次,共4周,构建肝纤维化模型。采用天狼猩红染色法观察小鼠肝脏组织中胶原沉积情况;qRT-PCR和免疫组织化学染色法检测小鼠肝脏组织中肌动蛋白2(actin alpha 2,Acta2)、Ⅰ型胶原a1(collagen typeⅠalpha1,Col1a1)、GLS1基因及GLS1蛋白表达水平。结果 与对照组小鼠相比,模型组小鼠肝脏组织整体增大,表面不光滑,呈颗粒状,同时肝脏质量与胫骨长度比显著增加(t=2.979,P <0.05);与对照组相比,模型组小鼠肝脏组织中天狼猩红染色阳性的胶原沉积面积显著增加(t=7.661,P <0.01),Acta2和Col1a1基因相对表达量均显著增加(t分别为4.335和5.319,P均<0.01),GLS1 mRNA和蛋白表达水平均显著增加(t分别为5.319和9.725,P <0.01);与模型组小鼠相比,BPTES处理组小鼠肝脏质量减轻,肝脏组织中天狼猩红染色阳性的胶原沉积面积显著减少(t=7.427,P <0.01),Atca2和Col1a1基因相对表达量均显著降低(t分别为3.713和2.628,P均<0.05)。结论 抑制GLS1活性可显著改善CCl4诱导的肝纤维化程度,为肝纤维化治疗提供了新思路。