FA／BRCA通路与乳腺癌

范可尼贫血（FA）是一种罕见的遗传疾病，主要表现为再生障碍性贫血，进行性发育缺陷，易患各种肿瘤。非FA人群的乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌等肿瘤中均存在FA／BRCA通路的损伤缺失。FA／BRCA通路参与细胞染色体双链断裂的同源重组修复。在已经确定的13个FA基因中，包括人们熟知的乳腺癌／卵巢癌易感基凶FANCD1／BRCA2。对FA／BRCA通路的研究，有助于我们理解肿瘤的发生发展机制，为寻找有效的药物靶点提供依据。

UBE2T基因对卵巢癌细胞增殖的调控作用及其机制

目的 探讨泛素结合酶E2T (UBE2T)基因在卵巢癌组织中的表达水平及其对卵巢癌细胞增殖的调控作用和机制。方法 通过基因表达谱交互分析(GEPIA)网站分析UBE2T基因在卵巢癌组织与正常组织中的差异表达。收集52例卵巢癌组织和癌旁组织样本,采用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)检测UBE2T基因在卵巢癌组织和癌旁组织中的差异表达;采用MTT法检测细胞增殖的改变;采用Western blotting检测FA/BRCA通路FANCF和FANCD2蛋白的表达;采用彗星实验检测DNA损伤。结果 qRT-PCR结果显示,UBE2T基因在卵巢癌组织中的表达明显高于癌旁组织(P <0.01)。转染cDNA-UBE2T至SKOV3细胞后UBE2T蛋白高表达,与阴性转染组比较,细胞增殖水平明显增加(P <0.05)。Western blotting结果显示,UBE2T过表达后可增加SKOV3细胞中FA/BRCA通路FANCF和FANCD2蛋白的表达(P <0.05)。彗星实验发现,UBE2T过表达可以抑制顺铂引起的卵巢癌细胞DNA损伤。结论 UBE2T基因在卵巢癌组织中高表达,UBE2T通过FA/BRCA通路调控卵巢癌细胞的增殖,其有望成为卵巢癌新的治疗靶点。

FANCF基因与肿瘤发生和耐药性形成的研究进展

范可尼贫血(Fanconi anemia,FA)是一种罕见的常染色体遗传病。FA复合体可通过FA/BRCA通路参与细胞周期调控、细胞凋亡、DNA修复等生命信号转导与调控。范可尼贫血相关基因F(Fanconi anemia complementation group F,FANCF)作为关键因子,参与FA复合体稳定、FANCD2泛素化及FA/BRCA通路生物学功能调控。研究表明,FANCF在肿瘤的发生和耐药性形成发挥重要作用。本文对该方面的相关研究进行综述。

抑制肺鳞癌细胞FANCM和USP1基因对顺铂的增敏效应

目的:研究抑制FANCM和USP1基因后,人肺鳞癌SK-MES-1细胞株FA/BRCA通路激活状态以及对顺铂敏感性的变化。方法:用脂质体转染试剂将FANCM-siRNA和USP1-siRNA分别和共转染于SK-MES-1细胞株,采用蛋白质印迹法测定转染后FANCM和USP1蛋白表达,并检测转染前后经DDP处理后细胞FANCD2蛋白单泛素化水平。免疫荧光染色检测胞核内FANCD2核聚小体表达。CCK-8法测定转染前后细胞生存率的变化;Annexin V/PI流式细胞术测定转染前后细胞凋亡率。结果:转染FANCM-siRNA和USP1-siRNA后,SK-MES-1细胞中FANCM和USP1蛋白表达均较转染前明显降低。转染FANCM-siRNA后经顺铂诱导的FANCD2单泛素化水平和核聚小体表达明显下调;转染USP1-siRNA后,顺铂诱导的FANCD2单泛素化水平和核聚小体形成明显增加;转染USP1-siRNA后细胞生存率和细胞凋亡率高于转染FANCM-siRNA,同时共转染USP1-siRNA+FANCM-siRNA后细胞对顺铂的致敏效应与转染USP1-siRNA相似。结论:沉默FANCM和USP1基因后,通过阻断FA/BRCA通路,抑制其DNA修复功能,导致SKMES-1细胞对顺铂的敏感性增高,其中沉默USP1基因的增敏效应更为明显。