肉灵芝提取物调控长链非编码RNA BRCA1相邻基因2/双特异性磷酸酶4/细胞外信号调节激酶通路对肝癌细胞Hep3B增殖及凋亡的影响

目的探讨肉灵芝提取物是否可通过长链非编码RNA BRCA1相邻基因2(LncRNA NBR2)/双特异性磷酸酶4/细胞外信号调节激酶(DUSP4/ERK)通路而影响肝癌HepB细胞增殖及凋亡。方法体外培养肝癌HepB细胞,分为1 mg/L肉灵芝提取物组、2 mg/L肉灵芝提取物组、4 mg/L肉灵芝提取物组、si-NC组、si-LncRNA NBR2组、pcDNA-NC组、pcDNA-LncRNA NBR2组、肉灵芝提取物+si-NC组、肉灵芝提取物+si-LncRNA NBR2组;采用MTT检测肝癌HepB细胞增殖;流式细胞术检测肝癌HepB细胞凋亡;RT-qPCR检测LncRNA NBR2的表达量;蛋白质印迹法(Western blotting)检测增殖细胞核抗原(PCNA)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved-caspase-3)、DUSP4、p-ERK蛋白表达量。结果肉灵芝提取物可明显降低肝癌HepB细胞增殖率与PCNA、DUSP4、p-ERK蛋白水平(P<0.05),提高肝癌HepB细胞凋亡率、Cleaved-caspase-3蛋白水平及LncRNA NBR2的表达水平(P<0.05);转染si-LncRNA NBR2后可明显提高肝癌HepB细胞增殖率及PCNA、DUSP4、p-ERK蛋白水平(P<0.05),降低凋亡率及Cleaved-caspase-3蛋白水平(P<0.05),而转染pcDNA-NBR2可明显减弱转染si-LncRNA NBR2对肝癌HepB细胞增殖及凋亡的作用;与肉灵芝提取物+si-NC组比较,肉灵芝提取物+si-LncRNA NBR2组肝癌HepB细胞增殖率及PCNA、DUSP4、p-ERK蛋白水平升高(P<0.05),凋亡率及Cleaved-caspase-3蛋白水平降低(P<0.05)。结论肉灵芝提取物可通过上调LncRNA NBR2的表达而抑制DUSP4/ERK信号通路的活化从而抑制肝癌HepB细胞增殖及诱导细胞凋亡。

北海地区遗传性乳腺癌和健康遗传高危人群BRCA1和BRCA2基因突变研究

目的:探讨北海地区遗传性乳腺癌和健康遗传高危人群乳腺癌易感基因(BRCA)1和BRCA2基因突变特征。方法:选取北海市人民医院普通外科收治的50例遗传性乳腺癌患者及150例健康遗传性高危人群,PCR-DNA直接测序法检测BRCA1、BRCA2的全编码外显子基因序列。结果:50例遗传性乳腺癌患者中共有8例BRCA1/2基因突变,总突变率为16%;其中BRCA1突变占12.0%,BRCA2突变占4.0%。三阴性乳腺癌患者BRCA1/2基因突变率为57.1%(4/7),高于非三阴性乳腺癌患者的9.3%(4/43),差异有统计学意义(P<0.05)。150例健康遗传性高危人群存在2例致病性突变,均位于BRCA1的11外显子,突变率为1.3%(2/150)。结论:北海地区女性遗传性乳腺癌存在BRCA1和BRCA2基因突变,与三阴乳腺癌有关,突变类型以碱基置换突变为主;健康遗传高危人群也存在BRCA1突变。

前列腺导管内癌临床、病理特征及BRCA1/2基因突变状态分析(附15例报告)

目的探讨前列腺导管内癌(IDC-P)的临床特点及病理特征,分析BRCA1/2基因在IDC-P中的突变状态。方法回顾性分析2017年1月至2022年3月华中科技大学附属同济医学院附属武汉市中心医院泌尿外科137例确诊为前列腺癌患者的临床资料,按照是否合并IDC-P分为IDC-P组和非IDC-P组,记录两组患者术前总前列腺特异性抗原(tPSA)水平、有无精囊侵犯、骨转移和淋巴结转移以及多参数磁共振成像分析前列腺成像报告和数据系统结节评分情况、临床T分期、Gleason评分并进行比较,同时统计BRCA1/2基因在IDC-P组中具有临床意义的突变情况。结果合并IDC-P患者15例,IDC-P在前列腺癌中的构成比为10.95%。IDC-P组具有更高的年龄(χ^(2)=29.57,P<0.05)、Gleason评分(χ^(2)=10.17,P<0.05)以及临床T分期(χ^(2)=15.20,P<0.05),更易发生骨转移(χ^(2)=4.20,P<0.05)和精囊侵犯(χ^(2)=12.83,P<0.05)。9例行前列腺根治性切除术的IDC-P患者术后BRCA1/2基因检测显示具有临床意义的突变均为阴性。1例根治术后的IDC-P患者出现了生化复发,并在治疗24个月后出现膀胱、直肠的侵犯;2例初诊时骨转移的患者治疗6个月内进展为转移性去势抵抗性前列腺癌。结论IDC-P通常具有更强的侵袭性以及更差的预后,局限性IDC-P患者积极行根治手术辅以新型内分泌治疗可使患者有更好的临床获益。

51例卵巢癌患者BRCA1/2基因突变的分析

目的:评估BRCA1/2基因突变状态与卵巢癌患者临床特征的相关性及对预后的影响。方法:选取2017年11月—2022年6月在兰州大学第一医院进行治疗的51例接受BRCA1/2基因检测的卵巢癌患者作为研究对象,根据检测结果分为BRCA1/2突变组(30例)和BRCA1/2正常组(21例)。比较2组患者的临床基线资料、临床病理特征和预后,分析影响BRCA1/2基因突变的卵巢癌患者预后的相关因素。结果:BRCA1/2突变组与BRCA1/2正常组相比,发病年龄、体质量指数(body mass index,BMI)、恶性肿瘤家族史、治疗前糖类抗原125(carbohydrate antigen 125,CA125)及人附睾蛋白4(human epididymis protein 4,HE4)差异均无统计学意义(均P>0.05)。BRCA1/2突变组与BRCA1/2正常组肿瘤分期及淋巴结转移情况比较,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示BRCA1/2基因突变不是卵巢癌生存率及无进展生存期的独立预后因素(HR=0.752,95%CI:0.394~1.435,P=0.329)。结论:BRCA1/2基因突变是决定卵巢癌患者临床治疗的重要因素,与肿瘤分期及淋巴结转移情况显著相关,但仍不能确定BRCA1/2基因突变是卵巢癌的独立危险因素。

乳腺癌高危人群BRCA1/2基因突变检测的临床应用价值

【目的】探讨乳腺癌高危人群乳腺癌易感基因(BRCA1/2)基因突变检测的临床应用价值。【方法】采用高通量基因测序法对200例乳腺癌高危女性进行BRCA1/2易感基因检测,分析受检者BRCA1/2基因突变情况。根据乳腺癌发病风险分为低危组、普通组和高危组,对高危组进一步进行乳腺癌B超以及钼靶筛查,比较检测结果与乳腺癌筛查结果的一致性。对筛查发现的可疑者及高危人群进行穿刺活检,对乳腺癌确诊患者进行治疗。随访2年,比较三组人群乳腺癌发病情况和确诊患者的治疗效果。【结果】本次基因检测共获得32个突变位点,去重后为19个突变位点,BRCA1突变7个(36.84%),BRCA2突变12个(63.16%),其中6个(31.58%)位点未在本研究所使用的数据库中检出。200例中共发现21例(10.50%)突变携带者,其中15例(7.50%)携带有致病性突变,设为高危组;6例(3.00%)为非致病性突变,设为低危组;其余179例(89.50%)未携带突变,设为普通组。高危组乳腺癌筛查结果BI-RADS分级4~5级共12例,两种检查方法乳腺癌高危人群诊断符合率为80.00%;随访2年内,BRCA1/2突变携带组21例受检者乳腺癌发病率显著高于179例普通组(P<0.05),平均发病年龄显著低于普通组(P<0.05)。BRCA1与BRCA2突变携带乳腺癌患者的病理完全缓解率与未携带乳腺癌患者比较,差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】对乳腺癌高危人群进行BRCA1/2基因突变检测,其乳腺癌风险预测准确性与乳腺癌常规筛查有很高的一致性,且携带有致病性突变的患者乳腺癌发病率更高、发病年龄更小,预后也更差。

乳腺癌易感基因联合癌抗原125动态监测在预测晚期上皮性卵巢癌病人铂敏感性及预后中的价值

目的评估胚系乳腺癌易感基因(BRCA)联合动态监测血清癌抗原125(CA125)在晚期上皮性卵巢癌(EOC)病人初治铂敏感性预测及判断预后中的价值。方法收集并回顾性分析2017年1月至2020年1月在蚌埠医学院第一附属医院行满意减瘤术且术后采用TC(紫杉醇+卡铂)/TP(紫杉醇+顺铂)方案静脉化疗的EOC病人151例的临床病理资料。分析胚系BRCA与EOC病人临床病理特征之间的关系;计算曲线下面积(AUC)值等评估胚系BRCA、治疗早期血清CA125水平及两者联合预测晚期EOC病人初治铂敏感性的效能;分析胚系BRCA、治疗早期血清CA125与晚期EOC病人无进展生存期(PFS)的关系;并对所有EOC病人的PFS进行多因素生存分析。结果胚系BRCA致病突变率为28.5%(43/151)。胚系BRCA与确诊年龄、治疗前血清CA125、遗传性乳腺癌和卵巢癌(HBOC)家族史等具有相关性(P<0.05);胚系BRCA、第一周期化疗后血清CA125单独预测晚期EOC病人初治铂敏感性的AUC为0.63、0.76;胚系BRCA与第一周期化疗后血清CA125串联预测晚期EOC病人初治铂敏感性的效能最高,AUC为0.79,95%CI:(0.69,0.90),灵敏度为69.7%,特异度为89.2%;在晚期EOC病人中,BRCA野生型+第一周期化疗后CA125>35 U/mL组病人的PFS生存曲线显著低于BRCA突变型+第一周期化疗后CA125≤35 U/mL组、BRCA突变型+第一周期化疗后CA125>35 U/mL组、BRCA野生型+第一周期化疗后CA125≤35 U/mL组(P=0.013、0.007、0.003)。多因素Cox回归分析显示第一周期化疗后血清CA125水平是EOC病人肿瘤无进展生存时间(PFS)的独立预后因素。结论胚系BRCA联合血清CA125动态监测对晚期EOC病人铂敏感性及预后有一定的预测价值。胚系BRCA野生型且第一周期化疗后血清CA125水平未正常提示EOC病人铂耐药及易复发的风险高。

云南地区卵巢癌患者的基因同源重组缺陷状态和BRCA1/2基因突变频率及其临床意义

目的:采用基于中国人群单核苷酸多态性位点开发的同源重组缺陷(HRD)检测工具评估云南地区卵巢癌患者的HRD状态和BRCA1/2基因突变频率并探讨其临床意义。方法:共纳入2021年1月至2023年5月间在云南省肿瘤医院收治的卵巢癌患者248例,HRD状态采用基因组瘢痕评分法(GSS)(主要依据拷贝数的长度、类型、位置及基因组断片)或HRD评分法(杂合性缺失、端粒等位基因失衡及大片段移位等基因组不稳定事件的总和)进行评估,当组织样本的GSS≥50分或HRD评分≥42分者或检测到有害的BRCA1/2基因突变时HRD被定义为阳性。分析患者HRD状态与临床病理特征的关系。结果:248名卵巢癌患者中70.97%的患者HRD呈阳性,其中BRCA1/2基因突变率为30.65%。Ⅲ~Ⅵ期、高级别浆液腺癌的卵巢癌患者具有更高的HRD阳性率(均P<0.01),HRD评分更高的患者其合并其他基因突变的频率也越高(P<0.05)。HRD状态与卵巢癌的病理类型、临床分期和其他基因突变均有关联(均P<0.01)。结论:云南地区卵巢癌患者HRD阳性率较高,HRD阳性的卵巢癌患者可以从聚ADP核糖聚合酶(PARP)抑制剂治疗中获得更大的收益。

中国湖南家族性和早发性乳腺癌BRCA1和BRCA2基因突变分析

背景与目的:BRCA1和BRCA2基因是已经证实的乳腺癌遗传易感基因,与家族性及早发性乳腺癌密切相关。本研究旨在分析中国湖南省家族性和早发性乳腺癌中BRCA1和BRCA2基因的突变位点及携带情况。方法:以来自湖南地区的50例家族性和早发性乳腺癌(发病年龄≤35岁)为研究对象,其中26例(52%)有乳腺癌家族史。由静脉血提取基因组DNA,对BRCA1和BRCA2基因的全部编码序列进行扩增。突变分析由变性高效液相色谱分析(DHPLC)进行预筛,之后进行DNA测序证实。结果:在50例乳腺癌患者中发现有5种致病性突变,其中2种为新发现突变——BRCA2基因无义突变2372C>G和移码突变2808delACAA。BRCA1基因中发现一种已报道的无义突变220C>T;其他两种为已报道的BRCA2移码突变位点1796delTTTAT和6275delTT。我们还发现4个未知功能的突变位点(UV)及11个基因多态性位点。湖南家族性乳腺癌中BRCA1突变率4%低于BRCA2突变率16%。结论:在中国湖南人群中,BRCA2基因的突变对于遗传性乳腺癌的发生可能具有较重要意义;新发现的2个突变位点可能是中国人群中的特有突变;湖南地区BRCA1在家族性乳腺癌中突变率明显低于国内外报道,而BRCA2突变发生率与西方国家相近,但明显高于国内其他地区,这可能是中国湖南人群中的特有特征。

宁夏地区回族女性散发性乳腺癌易感基因BRCA1/BRCA2突变的研究

目的研究宁夏地区回族女性散发性乳腺癌中BRCA1/BRCA2基因(breast cancer susceptibility gene 1/2)的突变位点及携带情况。方法收集60例回族居民乳腺癌石蜡包埋组织标本及15例乳腺小叶增生或纤维腺瘤标本。PCR和DNA直接测序法检测BRCA1基因第2、11和20号外显子和BRCA2基因第11号部分外显子突变情况。结果 60例乳腺癌BRCA1基因有10例突变,突变率为16.7%,突变位点均位于BRCA1基因。15例对照均未检出突变且淋巴结转移与未转移组间BRCA1基因突变率差异(30.8%与5.9%)有统计学意义(P<0.05)。结论 BRCA1基因突变可能与宁夏回族女性乳腺癌发生相关。

家族性乳腺癌和健康遗传高危人群BRCA1/2基因突变研究

目的：研究中国汉族女性家族性乳腺癌患者和健康遗传性高危人群的BRCA1/2基因突变特征。方法：研究对象为2013年12月~2014年10月于解放军307医院乳腺外科确诊的54例汉族家族性乳腺癌患者及24例健康遗传性高危人群,应用PCR-DNA直接测序法检测乳腺癌易感基因BRCA1和BRCA2的全编码外显子基因序列。结果：54例家族性乳腺癌患者中共发现8例致病性突变,突变类型均为单个碱基置换,BRCA1和BRCA2的总突变率为14.8%,BRCA1突变率为11.1%,BRCA2突变率为3.7%;其中,三阴性乳腺癌患者BRCA总突变率高于非三阴性乳腺癌患者的总突变率（28.6%vs 12.8%）,差异具有统计学意义（P〈0.05）。24例遗传性高危人群中共发现2例致病性突变,均为BRCA1基因突变,突变率为8.3%。结论：用BRCA1/2突变检测＂金标准＂的一代测序法再次发现在中国汉族女性家族性乳腺癌中存在的BRCA1/2突变,与三阴性乳腺癌有关,并发现碱基置换突变也是重要的突变类型;在健康遗传性高危人群中存在一定比例的BRCA1突变,值得关注。

新疆地区不同肿瘤家族史的乳腺癌患者BRCA1/2基因突变的分析及临床意义

目的:分析有不同家族史的乳腺癌患者BRCA1/2基因突变的临床意义。方法:对98例有家族史的乳腺癌患者,取外周静脉血进行BRCA1/2基因检测,采用高效液相色谱分析(DHPLC)预筛,结果经DNA测序验证。结果:98例患者的BRCA1/2突变率为20.41%;同时有乳腺癌及卵巢癌家族史的突变率明显高于仅有一种家族史的患者;随着家族中患癌人数增加(2、3、4人),BRCA1/2突变率也明显增高(16.25%、33.3%、66.67%)。结论 :在乳腺癌患者中,同时有乳腺癌和卵巢癌家族史,BRCA1/2突变率明显增高,且随着家族中患癌人数的增加,BRCA1/2突变检出率呈增高趋势。

中国中部地区乳腺癌遗传易感基因BRCA1/2高通量测序情况分析

目的:分析中国中部女性遗传性乳腺癌患者BRCA1/2基因遗传变异情况,探究中国人群乳腺癌易感基因BRCA1/2的遗传变异热点,为临床乳腺癌风险评估提出可靠依据。方法:对乳甲外科收治的具有乳腺癌家族史的女性患者62例,无家族史正常女性志愿者60例,利用Life Tech Ion Proton高通量测序技术对BRCA1/2基因进行测序分析,并用sanger测序法验证。结果:在62例有家族史乳腺癌患者中,BRCA1基因突变率为25.8%(16/62),BRCA2基因突变率为33.9%(21/62),BRCA1/2有害变异率为11.3%(7/62)。乳腺癌家族史患者组与正常组对比分析,家族史乳腺癌患者组BRCA1/2基因变异率(45.2%)显著高于正常对照组(31.7%)。通过家系分析和数据比对发现BRCA1c.4986+1G>T和BRCA2 5773C>T为中国人群遗传性乳腺癌有害变异。结论:家族遗传性乳腺癌患者BRCA1/2基因变异率显著高于正常人群。通过家系遗传分析并利用高通量测序技术可以有效地筛选出乳腺癌BRCA1/2基因的有害变异,为乳腺癌的风险评估提供可靠的临床依据。

乳腺癌组织BRCA1、BRCA2基因区域杂合性缺失的研究

目的 研究乳腺癌组织BRCA1、BRCA2基因区域的杂合性缺失 (LOH)情况。方法 采用聚合酶链式反应(PCR)和聚丙烯酰胺凝胶电泳 ,对 30例散发性乳腺癌和 2例姐妹乳腺癌进行LOH的检测 ,同时还采用G显带法对姐妹乳腺癌患者的外周血淋巴细胞染色体畸变情况进行分析。结果 在散发性乳腺癌中 ,BRCA1、BRCA2基因区域的杂合性缺失率分别为 6 12 %和 5 77% ;姐妹二人乳腺癌组织在BRCA2基因区域的D13S173位点处存在LOH ,且她们的外周血淋巴细胞发生了大量的稳定性和非稳定性畸变 ,畸变率远远高于自发畸变率。结论 乳腺癌易感机理在东西方种族有可能存在差异 。

乳腺癌BRCA1和BRCA2基因的研究进展

乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一．全世界每年约411,000位女性死于该病。在许多大中城市乳腺癌已占妇女恶性肿瘤死因的首位．其发病年龄年轻化、发病率呈上升趋势。大量研究表明。乳腺癌的发生发展是多基因共同作用的结果．探讨它们的作用机制有助于乳腺癌预防、早期诊断及为临床治疗提供新的靶点。5～10％的乳腺癌和遗传易感性相关．这其中最常见的乳腺癌易感基因是BRCA1和BRCA2．但仍有部分乳腺癌并未发生这2个基因的突变．所以目前对易感基因的数量和分布并不十分清楚。本文就这两个易感基因与乳腺癌关系作一综述．

维吾尔族和汉族散发性乳腺癌患者BRCA1/2基因突变的检测

目的探讨新疆维吾尔族和汉族散发性乳腺癌患者乳腺癌易感基因1/2(BRCA1/2)突变情况及与临床病理参数的关系。方法采用PCR和DNA直接测序法,对新疆地区230例散发性乳腺癌患者(维吾尔族、汉族各115例)石蜡组织进行BRCA1基因第2、11(11A和11B)、20号外显子和BRCA2基因第11号部分外显子,共5对引物进行突变检测。结果 230例乳腺癌患者中,BRCA基因突变率为6.96%(16/230),其中1例BRCA1基因-5 382位点的突变及7例新发突变位点;维吾尔族和汉族患者中BRCA基因突变检出率分别为7.83%(9/115)和6.09%(7/115);BRCA基因突变组发病年龄均≤50岁;突变组16例患者中绝经前患者(13例)的突变率明显高于绝经后患者(3例)(P<0.05)。结论 BRCA1基因突变可能与新疆地区散发性乳腺癌发生相关。

乳腺癌与卵巢癌易感基因BRCA1和BRCA2

BRCA1和BRCA2是近年来发现的遗传性乳腺癌和卵巢癌易感基因,分别位于第17号和第13号染色体上。目前所知,两者与细胞周期调控、胚胎生 长发育、DNA损伤修复和转录调控等生命活动有关。随着BRCA1和BRCA2研究的不断深入和其确切生物学功能的阐明,将在临床上帮助早期诊断和有效治疗乳腺癌和卵巢癌患者。

BRCA1/2基因突变乳腺癌患者心理体验的质性研究

目的通过质性访谈了解BRCA1/2基因突变乳腺癌患者的身心需求,探讨其心理体验。方法采用半结构式访谈基因突变乳腺癌患者13例,采用Colaizzi现象学研究法分析资料。结果 BRCA1/2基因突变乳腺癌患者的心理体验可归纳为4个主题:(1)为罹患乳腺癌找到理由;(2)负性情绪;(3)行为改变;(4)信息缺失和对专业知识的渴求。结论医护人员应在基因遗传方面提供完整和持续的信息和建议,并舒缓患者的情绪,以期提高患者的生活质量。

维吾尔族和汉族女性散发性乳腺癌BRCA1及BRCA2基因单核苷酸多态性研究

目的研究新疆汉族及维吾尔族女性散发性乳腺癌患者BRCA1及BRCA2基因单核苷酸多态性（Single Nucleotide Polymorphisms,SNP）的差异。方法收集新疆医科大学第一附属医院手术切除并经病理确诊为乳腺癌100例患者的活检样本,维吾尔族和汉族患者各50例。BRCA1基因引物设计参考NM_007300.3和NC_000017.11,BRCA2基因引物设计参考NM_000059.3和NC_000013.11,合成引物后对BRCA1及BRCA2基因SNP位点进行测序,采用SPSS17.0统计软件对数据进行卡方检验。结果在BRCA1-Exon10上有2个单核苷酸多态性位点（rs16941及rs16942）。BRCA1-Exon2内含子上有1个突变位点（Introns1-1125）。BRCA2基因未检测到基因多态性。BRCA1基因,rs16941位点的AA、AG、GG 3个基因型在汉族和维吾尔族患者中的分布频率差异有统计学意义（P=0.009）。rs16942位点的AA、AG、GG 3个基因型在汉族和维吾尔族患者中的分布频率差异有统计学意义（P=0.017）。rs16941位点,相对于AA基因型,AG、GG基因型能增加维吾尔族乳腺癌患者的易感性[OR值（95%CI）分别为2.498（1.033～5.994）及6.519（1.606～26.464）]。rs16942位点,相对于AA基因型,AG、GG基因型能增加维吾尔族乳腺癌患者的易感性[OR值（95%CI）分别为2.368（0.995～5.637）及5.741（1.395～23.630）]。结论 BRCA1基因,rs16941及rs16942位点的AA、AG、GG 3个基因型的分布频率在汉族和维吾尔族患者中存在差异。rs16941及rs16942位点,相对于AA基因型,AG、GG基因型能增加维吾尔族乳腺癌患者的易感性。

基于中医“治未病”思想探讨BRCA1/2基因与卵巢癌的预防

基于中医“治未病”思想,探讨BRCA1/2基因与卵巢癌的预防。从中医“治未病”思想、卵巢癌:BRCA1/2基因三者之间的关系进行论述,提出的BRCA1/2基因之无瘤先防和既瘤防变对于卵巢癌防治的重要性,以期达到卵巢癌的早期发现、早期治疗和降低卵巢癌病死率的目的。