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侯选抑瘤基因BRD7及家族蛋白的功能研究进展 被引量:5
1
作者 刘华英 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第9期811-816,共6页
溴区结构(bromodomain)是近年来发现的广泛分布于多种生物中的一种高度保守的结构域,溴区结构蛋白通过参与信号依赖性的基因转录调控而广泛参与细胞内重要的生命活动.BRD7基因是1999年克隆的一个新的bromodomain基因,GenBank登录号为AF1... 溴区结构(bromodomain)是近年来发现的广泛分布于多种生物中的一种高度保守的结构域,溴区结构蛋白通过参与信号依赖性的基因转录调控而广泛参与细胞内重要的生命活动.BRD7基因是1999年克隆的一个新的bromodomain基因,GenBank登录号为AF152604或AF152605.eMotif分析表明,BRD7蛋白包含多个磷酸化位点和一个保守bromodomain功能域,Blast显示BRD7蛋白与人的Celtix-1及鼠的bromodomain蛋白BP75具有高度的同源性.利用转基因技术已证实,在鼻咽癌细胞系HNE1中过表达BRD7基因可以抑制其细胞生长和细胞周期G1-S的进程,并部分逆转鼻咽癌细胞HNE1的恶性表型.为了全面地揭示BRD7基因的细胞内生物学功能,深入了解BRD7基因的细胞内整体信息流向,中南大学肿瘤研究所细胞遗传室已从上、中、下游三个不同层面对BRD7基因的功能研究展开了初步的探索. 展开更多
关键词 brd7基因 溴区结构功能域 brd7基凼功能
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BRD7基因转染对鼻咽癌细胞生长的抑制作用 被引量:17
2
作者 余鹰 朱诗国 +5 位作者 张必成 李忠花 向娟娟 周鸣 李小玲 李桂源 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第6期569-574,共6页
目的:探讨鼻咽癌负相关基因BRD7对鼻咽癌细胞系HNEI生长的影响。方法:构建BRD7基因真核表达载体pcDNA3.1(+)/BRD7重组体,采用脂质体介导转染技术,将BRD7真核表达重组质粒和空载体质粒分别导入鼻咽... 目的:探讨鼻咽癌负相关基因BRD7对鼻咽癌细胞系HNEI生长的影响。方法:构建BRD7基因真核表达载体pcDNA3.1(+)/BRD7重组体,采用脂质体介导转染技术,将BRD7真核表达重组质粒和空载体质粒分别导入鼻咽癌细胞系HNE1,Southern杂交和RT-PCR分别检测外源性DNA的整合和BRD7基因的表达,并借助细胞生长曲线、软琼脂集落形成试验、流式细胞计数和裸鼠接种方法对转染细胞的生物学行为进行了检测。结果:转染BRD7基因的 HNE1生长倍增时间为53 h,较HNE1(23.9h)和空载体转染 HNE1(24.1h)明显延长,流式细胞仪表明,BRD7表达升高延缓细胞由G0-G1期进人S期,BRD7转染HNE1在软琼脂中集落形成率较对照组显著下降(P<0.01),裸鼠接种试验显示BRD7基因转染细胞HNE1生长速度受到抑制。结论:BRD7基因重表达有助于HNE1的恶性表型的逆转;BRD7是一个鼻咽癌相关的抑瘤基因良好的候选者。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 brd7 抑瘤基因 基因转染 基因表达 HNE1 NPC
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BRD7单核苷酸多态性及鼻咽癌易感性分析 被引量:10
3
作者 余鹰 朱诗国 +4 位作者 向娟娟 李忠花 张必成 曹利 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第4期568-572,共5页
为了探讨BRD7基因的遗传变异在鼻咽癌发生的作用 ,采用PCR SSCP和直接测序方法对BRD7基因的编码区进行单核苷酸多态性 (coding regionsinglenucleotidepolymorphism ,cSNP)分析 ,并对两个鼻咽癌家系的高危成员、 5 7个散发性鼻咽癌病人... 为了探讨BRD7基因的遗传变异在鼻咽癌发生的作用 ,采用PCR SSCP和直接测序方法对BRD7基因的编码区进行单核苷酸多态性 (coding regionsinglenucleotidepolymorphism ,cSNP)分析 ,并对两个鼻咽癌家系的高危成员、 5 7个散发性鼻咽癌病人和 5 0个正常人进行了BRD7等位基因分型 .在BRD7基因的编码区发现了 3个cSNP (C45 0T、A5 38C和A737G) ,其中A5 38C颠换导致其编码蛋白的第 16 2个氨基酸由Asp变为Ala ;C45 0T改变与同义的A737C多态性偶联发生在 87 7%的鼻咽癌活检组织和配对的外周血、所有的鼻咽癌家系的患者及8个易感成员 ,但是仅存在于 2 2 %的正常人血标本中 .C45 0T多态性变化可以导致其编码蛋白在第 133位氨基酸的翻译终止 (G133Ter) .以上结果说明 ,C45 0T和A737C偶联的多态性改变是鼻咽癌发生和发展的重要遗传易感风险因子之一 (P <0 0 1) ;BRD7基因有两种翻译方式 ,G133Ter可以导致另一种截断的翻译本 (truncatedisoform) . 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 brd7基因 易感基因 单核苷酸多态性
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鼻咽癌侯选抑瘤基因BRD7原核表达载体的构建及其表达( 英文) 被引量:6
4
作者 聂新民 张必成 +6 位作者 向娟娟 朱诗国 周鸣 董利 余鹰 李小玲 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第4期631-634,共4页
BRD7基因是一个鼻咽癌侯选抑瘤基因 ,为了构建BRD7基因的原核表达载体并使其在大肠杆菌得到表达 ,设计了带有SalⅠ ,NotⅠ酶切位点的引物 ,以已构建好的质粒 pGEM TEasy/BRD7为模板 ,用PCR扩增出BRD7基因的完整阅读框架 ,并用SalⅠ ,No... BRD7基因是一个鼻咽癌侯选抑瘤基因 ,为了构建BRD7基因的原核表达载体并使其在大肠杆菌得到表达 ,设计了带有SalⅠ ,NotⅠ酶切位点的引物 ,以已构建好的质粒 pGEM TEasy/BRD7为模板 ,用PCR扩增出BRD7基因的完整阅读框架 ,并用SalⅠ ,NotⅠ酶切PCR产物和原核表达载体PGEX 4T 2 ,然后用T4DNA连接酶将其连接 ,得到重组表达质粒PGEX 4T 2 /BRD7,经双酶切鉴定和测序验证 ,表达载体构建正确 .重组表达质粒转化感受态大肠杆菌Jm10 5后用IPTG诱导 ,成功表达了一分子质量约为 90ku的融合蛋白 ;37℃诱导 4h后 ,SDS 聚丙烯酰胺凝胶 (PAGE)电泳后 ,经扫描分析该融合蛋白产量占菌体蛋白总量 2 8 4 8% ,蛋白质印迹 (Western blot)证实了该融合蛋白的表达获得成功 .这为BRD7基因的蛋白纯化及抗体制备 ,进一步开展其功能研究奠定了基础 . 展开更多
关键词 鼻咽癌 侯选抑瘤基因 brd7 构建 表达 原核表达载体
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新基因BRD7对鼻咽癌蛋白质表达谱影响的初步研究 被引量:6
5
作者 彭聪 谭琛 +5 位作者 张秋红 王晓艳 周鸣 黄河 王蓉 李小玲 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第5期721-725,共5页
BRD7基因是与鼻咽癌相关的候选抑瘤基因 .为了进一步研究该基因的作用机制 ,将pcDNA3 1(+) /BRD7的表达质粒经脂质体导入HNE1细胞 ,RNA斑点杂交筛选出阳性克隆 ,通过双向电泳分离过表达BRD7的HNE1细胞内蛋白质 ,筛选出差异表达的蛋白质... BRD7基因是与鼻咽癌相关的候选抑瘤基因 .为了进一步研究该基因的作用机制 ,将pcDNA3 1(+) /BRD7的表达质粒经脂质体导入HNE1细胞 ,RNA斑点杂交筛选出阳性克隆 ,通过双向电泳分离过表达BRD7的HNE1细胞内蛋白质 ,筛选出差异表达的蛋白质点 ,并进行质谱分析鉴定 .鉴定出 10种表达上调的蛋白质点 ,包括精氨 (基 )琥珀酸裂解酶 ,TSA (thio specificantioxdant) ,Proteaseomeactivator2 8betasubunit (PA2 8) ,金属蛋白酶抑制因子 2前体等 ,这些蛋白质涉及细胞生长 ,细胞代谢等很多相关事件 . 展开更多
关键词 鼻咽癌 蛋白质表达谱 brd7基因 抑瘤基因
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BRD7调控Rb/E2F通路的分子机制研究 被引量:4
6
作者 李淑芳 周鸣 +6 位作者 刘华英 徐晓杰 彭聪 彭淑平 武明花 李小玲 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第8期881-888,共8页
BRD7是采用cDNA代表性差异分析法克隆的一个新的Bromodomain基因,过表达BRD7可抑制鼻咽癌细胞的生长和细胞周期进程,同时发现BRD7基因可以调控Rb/E2F通路的活性.该研究旨在进一步探讨BRD7调控Rb/E2F通路的分子机制.通过蛋白质印迹和RT-... BRD7是采用cDNA代表性差异分析法克隆的一个新的Bromodomain基因,过表达BRD7可抑制鼻咽癌细胞的生长和细胞周期进程,同时发现BRD7基因可以调控Rb/E2F通路的活性.该研究旨在进一步探讨BRD7调控Rb/E2F通路的分子机制.通过蛋白质印迹和RT-PCR实验方法发现,BRD7能够降低Rb的磷酸化水平,抑制cyclinD1、cyclinE的蛋白质表达,上调CDK4抑制子P19的mRNA表达,但对CDK4和CDK2的蛋白质表达没有明显影响;通过荧光素酶实验从转录调控水平进一步证实了BRD7能够明显抑制cyclinD1启动子活性;采用反义核酸技术抑制COS7细胞内源性BRD7的表达后,发现cyclinD1、cyclinE、磷酸化Rb的蛋白质表达水平上调,并且可以促进细胞生长.这些结果表明:BRD7参与调控Rb/E2F信号通路中重要靶分子的表达,抑制Rb/E2F通路的活性,从而阻止细胞周期G1-S期进程,抑制鼻咽癌细胞生长. 展开更多
关键词 brd7基因 Rb/E2F信号通路 细胞周期调控 CYCLIND1 反义核酸技术
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BRD7基因调控区的克隆与功能研究 被引量:3
7
作者 刘华英 罗晓敏 +7 位作者 牛朝霞 周艳宏 周鸣 彭聪 向波 李伟松 李小玲 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第6期531-539,共9页
BRD7基因是采用cDNA代表性差异分析法克隆得到的一个新的Bromodomain基因(GenBank登录号AF152604).它在鼻咽癌细胞和组织中表达明显下调,过表达BRD7基因能部分逆转鼻咽癌细胞的恶性表型.为了揭示BRD7基因在鼻咽癌细胞和组织中表达下调... BRD7基因是采用cDNA代表性差异分析法克隆得到的一个新的Bromodomain基因(GenBank登录号AF152604).它在鼻咽癌细胞和组织中表达明显下调,过表达BRD7基因能部分逆转鼻咽癌细胞的恶性表型.为了揭示BRD7基因在鼻咽癌细胞和组织中表达下调的分子机制,利用生物信息学技术已预测出其启动子区.荧光素酶活性检测结果表明该区域具有强启动子活性;转录因子Sp1特异性地结合于BRD7该启动子区;Sp1特异性阻断剂mithramycinA能明显地抑制BRD7启动子的活性和BRD7基因的表达. 展开更多
关键词 brd7基因 启动子 启动子活性 sp1转录因子 mithramycinA
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鼻咽癌相关基因BRD7对鼻咽癌细胞CNE1的影响 被引量:3
8
作者 彭聪 李小玲 +8 位作者 周鸣 刘华英 王莉莉 张秋红 杨一新 吴尚辉 黄柏英 熊炜 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第9期842-849,共8页
为了研究BRD7基因对鼻咽癌细胞CNE1的影响,通过脂质体转染方法,将BRD7基因导入NPC细胞株CNE1细胞中.通过细胞生长曲线发现该基因能够抑制CNE1细胞的生长.为了探讨可能的作用机制,进而采用蛋白质组技术研究该基因对鼻咽癌蛋白质表达谱的... 为了研究BRD7基因对鼻咽癌细胞CNE1的影响,通过脂质体转染方法,将BRD7基因导入NPC细胞株CNE1细胞中.通过细胞生长曲线发现该基因能够抑制CNE1细胞的生长.为了探讨可能的作用机制,进而采用蛋白质组技术研究该基因对鼻咽癌蛋白质表达谱的影响,从而研究该基因在CNE1中的地位和作用.通过对过表达BRD7基因后鼻咽癌细胞系CNE1的蛋白质表达谱改变的研究,鉴定出19个差异表达蛋白,这些蛋白质包括:BCCIP(BRCA2andCDKN1A(p21(Waf1/Cip1)),FHL2(fourandahalfLIMdomains2),Chloridechannelregulatoryprotein;Hin-1(high-in-normal-1),WISP-1(connectivetissuegrowthfactorrelatedprotein),SREC-4(scav-engerreceptorexpressedbyendothelialcells-2),folatereceptor.这些差异蛋白涉及到基因表达调控、细胞黏附等众多的事件.从另一个侧面研究了BRD7基因与鼻咽癌的关系,扩展了BRD7基因的研究范围,并进一步充实了该基因做为鼻咽癌候选抑瘤基因的证据. 展开更多
关键词 brd7基因 CNE1细胞 生长曲线 双向电泳 MAJDL-TOF-MS
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BRD7的亚细胞定位及其假定核输出信号序列的分离与鉴定 被引量:3
9
作者 周鸣 徐晓杰 +5 位作者 彭聪 何佳瑾 彭淑平 李小玲 卢建红 李桂源 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期373-378,共6页
BRD7被鉴定为一个鼻咽癌密切相关新基因和潜在的核转录调节因子.通过绿色荧光蛋白(GFP)介导的亚细胞定位方法,系统研究BRD7在非洲绿猴肾COS7细胞、人宫颈癌HeLa细胞以及人鼻咽癌HNE1细胞中的亚细胞定位,发现BRD7主要定位在细胞核,呈细... BRD7被鉴定为一个鼻咽癌密切相关新基因和潜在的核转录调节因子.通过绿色荧光蛋白(GFP)介导的亚细胞定位方法,系统研究BRD7在非洲绿猴肾COS7细胞、人宫颈癌HeLa细胞以及人鼻咽癌HNE1细胞中的亚细胞定位,发现BRD7主要定位在细胞核,呈细点状或条梭状分布,3株细胞中没有明显的细胞类型差异.通过对BRD7编码蛋白氨基酸序列进行比对分析,发现了1个具有亮氨酸富集特征的假定核输出信号序列pNES,该区域具有类似核输出信号特征序列“Lx(2,3)[LIVFM]x(2,3)Lx[LI]”(X代表任意氨基酸)的结构;通过功能分析,发现它不具有介导异源蛋白GFP胞浆定位的功能,且其亚细胞定位或胞浆胞核分布比例不受细霉素B(leptomycinB)干预的影响,说明这个pNES不具核输出信号结构域的功能,不是BRD7的核输出信号. 展开更多
关键词 brd7 转录因子 亚细胞定位 核输出信号
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BRD7基因在急性白血病细胞中的表达及SNP分析 被引量:2
10
作者 唐雪元 刘芬 +4 位作者 彭娅 向波 王成红 姚晨姣 沈守荣 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期645-650,共6页
目的:探讨BRD7基因在急性白血病(AL)患者骨髓单个核细胞(BMNCs)中的表达水平及单核苷酸多态性(SNP)分布。方法:采用半定量RT-PCR方法检测52例AL患者及30例非恶性血液病对照的BMNCs BRD7基因的表达水平,并应用单链构象多态性加... 目的:探讨BRD7基因在急性白血病(AL)患者骨髓单个核细胞(BMNCs)中的表达水平及单核苷酸多态性(SNP)分布。方法:采用半定量RT-PCR方法检测52例AL患者及30例非恶性血液病对照的BMNCs BRD7基因的表达水平,并应用单链构象多态性加直接测序法检测BRD7基因点突变或SNP,分析BRD7基因与AL的相关性。结果:在52例AL患者和30例对照组患者中均存在BRD7基因表达。急性淋巴细胞白血病(ALL)患者和急性非淋巴细胞白血病(ANLL)患者BRD7 mRNA的相对表达量均高于对照组(P=0.001;P=0.037)。BRD7基因编码区(447~844bp)存在3个cSNPs,即C657A,C495T和A737G,其中C495T和A737G偶联发生。C657A多态性的基因频率在AL组和对照中差异无统计学意义。两个偶联的SNPs等位基因频率及基因型频率在AL组和对照中差异存在统计学意义(P〈0.01);但在AL组中3种基因型之间BRD7 mRNA的表达差异无统计学意义(P〉0.05)。结论:BRD7基因在急性白血病患者细胞中表达上调。BRD7基因编码区(447~844 bp)2个偶联SNPs(C495T和A737G)与AL存在相关性,可能是AL的遗传易感因子之一。 展开更多
关键词 白血病 基因 brd7 单核苷酸多态性
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BRD7、NGX6基因在急性白血病中的表达 被引量:1
11
作者 唐雪元 龙潺 +3 位作者 刘芬 吕宏伟 胡进 沈守荣 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期635-638,共4页
目的探讨急性白血病患者骨髓单个核细胞BRD7、NGX6基因的表达水平。方法采用RT-PCR对52例急性白血病(acute leukemia,AL)患者及30例正常骨髓对照进行NGX6、BRD7基因mR-NA水平的检测,对其中7例AL患者用免疫组化法检测BRD7蛋白表达水平。... 目的探讨急性白血病患者骨髓单个核细胞BRD7、NGX6基因的表达水平。方法采用RT-PCR对52例急性白血病(acute leukemia,AL)患者及30例正常骨髓对照进行NGX6、BRD7基因mR-NA水平的检测,对其中7例AL患者用免疫组化法检测BRD7蛋白表达水平。结果在AL患者和正常骨髓对照的骨髓单个核细胞中BRD7、NGX6基因均存在明确表达。NGX6 mRNA的相对表达量在AL组与正常对照中差异无统计学意义(t=-1.014,P=0.982)。而BRD7 mRNA的表达水平AL组高于正常对照组,差异有统计学意义(t=3.672,P=0.001),但在AL各亚型之间BRD7 mRNA的表达差异无统计学意义(t=1.076,P=0.287),且BRD7 mRNA的表达水平与患者初诊时骨髓原始细胞数、外周血白细胞数及血小板数无关。其中,对部分样品检测了BRD7蛋白的表达,结果发现AL患者BRD7阳性表达细胞百分率均值高于正常骨髓对照。结论AL患者和正常骨髓对照的骨髓单个核细胞均表达BRD7和NGX6,且BRD7基因在急性白血病细胞中表达上调,但BRD7 mRNA表达水平与AL患者某些临床特征无相关性。 展开更多
关键词 白血病 brd7 NGX6 基因表达
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过表达E2F6基因抑制BRD7基因启动子活性 被引量:1
12
作者 刘华英 罗晓敏 +10 位作者 李夏雨 牛朝霞 张荔茗 周鸣 彭聪 向波 李征 彭淑平 李丹 李小玲 李桂源 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期886-893,共8页
BRD7基因是采用cDNA代表性差异分析法克隆的一个新bromodomain基因(GenBank登录号AF152604).它在鼻咽癌细胞和组织中表达明显下调,过表达BRD7基因可抑制鼻咽癌细胞的生长和细胞周期的进程.前期工作已克隆了BRD7基因启动子区,并将其启动... BRD7基因是采用cDNA代表性差异分析法克隆的一个新bromodomain基因(GenBank登录号AF152604).它在鼻咽癌细胞和组织中表达明显下调,过表达BRD7基因可抑制鼻咽癌细胞的生长和细胞周期的进程.前期工作已克隆了BRD7基因启动子区,并将其启动子定位于450bp(-404~+46bp)的区域.为了进一步揭示BRD7基因在鼻咽癌细胞和组织中表达下调的分子机制,生物信息学分析表明,BRD7基因启动子-229至-243bp为一个E2F6转录因子结合位点共有序列,电泳迁移率实验结果表明转录因子E2F6特异性地结合于BRD7启动子区.荧光素酶检测和绿色荧光蛋白表达检测都证实,过表达E2F6基因能抑制BRD7基因启动子活性. 展开更多
关键词 brd7基因 E2F6转录因子 启动子活性 荧光素酶检测技术 绿色荧光蛋白
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BRD7核输出信号序列的定位与功能鉴定 被引量:1
13
作者 周鸣 郭驰 +7 位作者 李夏雨 何佳瑾 徐晓杰 王贺冉 唐珂 曹利 李小玲 李桂源 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期634-639,共6页
目的:定位和鉴定BRD7核输出信号序列所在区域,探讨其在介导异源蛋白核输出功能中的作用。方法:以绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)做为研究模型,通过步移法对BRD7进行区段分析,探讨BRD7的不同区段对GFP核输出功能的影响,... 目的:定位和鉴定BRD7核输出信号序列所在区域,探讨其在介导异源蛋白核输出功能中的作用。方法:以绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)做为研究模型,通过步移法对BRD7进行区段分析,探讨BRD7的不同区段对GFP核输出功能的影响,初步确定BRD7核输出信号序列所在的区域;进一步通过氨基酸序列的比对分析,确定该序列中氨基酸的含量特征及核输出信号潜在的位置。结果:BRD7的B7C1(219-450)具有介导异源蛋白GFP胞浆定位的功能,且其核输出功能在核输出信号阻滞剂Leptomycin B(LMB)的诱导下受到阻滞。该区段疏水氨基酸残基含量比较丰富,但没有发现具有典型亮氨酸聚集特征的核输出信号。结论:初步确定了BRD7核输出信号序列所在的区域为aa219-450。 展开更多
关键词 brd7 核输出信号 亚细胞定位
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接头相关蛋白复合物3δ亚单位与BRD7的相互作用及其功能 被引量:1
14
作者 徐晓杰 周鸣 李桂源 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2013年第3期318-323,共6页
目的:观察鼻咽癌密切相关基因BRD7与接头相关蛋白复合物3(AP3)δ亚单位的相互作用及功能。方法:首先构建AP3δ基因真核表达载体pCMV-HA-AP3δ和pEGFP-C2-AP3δ,然后采用GFP介导的细胞荧光实验考察非洲绿猴肾COS7细胞中AP3δ的亚细胞定位... 目的:观察鼻咽癌密切相关基因BRD7与接头相关蛋白复合物3(AP3)δ亚单位的相互作用及功能。方法:首先构建AP3δ基因真核表达载体pCMV-HA-AP3δ和pEGFP-C2-AP3δ,然后采用GFP介导的细胞荧光实验考察非洲绿猴肾COS7细胞中AP3δ的亚细胞定位;通过细胞荧光共定位和免疫共沉淀实验分析BRD7蛋白与AP3δ蛋白的相互作用;最后采用荧光素酶实验观察BRD7与AP3δ对COS7细胞E2F3和CyclinD1活性的影响,半定量逆转录PCR观察转染pcDNA3.1-BRD7的HNE1细胞AP3δmRNA的表达,以转染空白载体的HNE1细胞为对照。结果:成功构建了pCMV-HA-AP3δ和pEGFP-C2-AP3δ;AP3δ蛋白主要定位于胞质;AP3δ蛋白与BRD7蛋白存在相互作用。AP3δ基因可协同BRD7下调细胞E2F3和CyclinD1启动子活性。在BRD7稳定转染的HNE1细胞中,AP3δmRNA的表达较转染空白载体组明显上调。结论:AP3δ蛋白与BRD7蛋白存在相互作用,在功能上相互促进。 展开更多
关键词 brd7 接头相关蛋白复合物3δ 免疫共定位 免疫共沉淀
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BRD7结构功能域Bromodomain的研究以及一个新的BRD7交互作用蛋白的鉴定
15
作者 彭聪 李小玲 +6 位作者 李夏雨 刘华英 周鸣 张黎明 罗小敏 沈守荣 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第10期948-956,共9页
溴区包含蛋白7(BRD7)是采用cDNA代表性差异分析方法克隆的一个新基因.研究证实了BRD7能够与乙酰化的组蛋白3结合,其识别位点在组蛋白3的14位氨基酸;并且证实了溴区结构域(Bromodomain)缺失型的BRD7突变体失去了与乙酰化组蛋白3的结合能... 溴区包含蛋白7(BRD7)是采用cDNA代表性差异分析方法克隆的一个新基因.研究证实了BRD7能够与乙酰化的组蛋白3结合,其识别位点在组蛋白3的14位氨基酸;并且证实了溴区结构域(Bromodomain)缺失型的BRD7突变体失去了与乙酰化组蛋白3的结合能力.Bromodomain是在进化上高度保守的功能结构域,该结构域在空间构象上具有鲜明的特征:包括4个左手、呈反向平行排列的“螺旋(αz,αA,αB,αC)”以及2个“连结环”(ZAloop,BCloop).通过生物信息学等综合分析,预测BRD7可能具有上述特征.依据上述分析结果,构建了BRD7的Bromodomain相关缺失突变体,通过肽段结合实验分析上述突变体与乙酰化组蛋白3结合的能力.结果表明,ZAloop与BCloop的完整性对于BRD7结合乙酰化的组蛋白3有着重要的意义.同时通过免疫荧光分析,证实了ZAloop与BCloop的完整性能够影响BRD7的亚细胞定位.最后,证实了BRD7与CBP可能存在交互作用.CBP不仅具有乙酰化转移酶活性(HATs),能够对组蛋白末端进行乙酰化修饰,并且作为一种重要的细胞转录因子广泛参与细胞的各种生物学活动. 展开更多
关键词 溴区包含蛋白7(brd7) 溴区结构域(Bmmodomain) 乙酰化组蛋白3 CBP(CREB-binding protein)
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全反式维甲酸诱导白血病细胞分化对brd7基因表达的影响
16
作者 唐雪元 王成红 肖广芬 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第3期593-596,共4页
为了探讨brd7基因与白血病细胞分化的关系及其在白血病细胞分化中的作用,本研究采用全反式维甲酸(ATRA)诱导HL-60和K562细胞系分化,通过Wright-Giema染色在显微镜下观察细胞形态学变化,应用流式细胞术分析细胞分化抗原CD11b的表达,以鉴... 为了探讨brd7基因与白血病细胞分化的关系及其在白血病细胞分化中的作用,本研究采用全反式维甲酸(ATRA)诱导HL-60和K562细胞系分化,通过Wright-Giema染色在显微镜下观察细胞形态学变化,应用流式细胞术分析细胞分化抗原CD11b的表达,以鉴定细胞分化程度,并在此基础上通过Western blot检测brd7基因在诱导分化前和细胞分化过程中蛋白表达水平的变化。结果发现,ATRA具有抑制HL-60细胞生长的作用,并可诱导HL-60细胞向粒系分化,在ATRA诱导细胞分化过程中HL-60细胞表面CD11b的表达水平逐渐上调,BRD7蛋白表达随着HL-60细胞的分化而增加;ATRA对K562细胞无诱导分化作用,brd7的表达也无明显变化。结论:随着HL-60细胞的分化,brd7基因表达上调,其机制有待进一步阐明。 展开更多
关键词 全反式维甲酸 白血病 brd7基因 细胞分化
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BRD7核定位信号的结构分析和功能鉴定
17
作者 周鸣 李小玲 +9 位作者 徐晓杰 周后德 刘华英 何佳瑾 彭聪 沈守荣 范松青 张荔茗 向波 李桂源 《生物技术通讯》 CAS 2006年第6期843-847,共5页
目的:对BRD7的核定位信号进行预测、结构分析和功能鉴定,并考察其对BRD7亚细胞定位的影响。方法:通过生物信息学对BRD7的核定位信号进行预测和结构分析,然后利用绿色荧光蛋白(GFP)介导的直接荧光和间接免疫荧光定位方法分别对核定位信... 目的:对BRD7的核定位信号进行预测、结构分析和功能鉴定,并考察其对BRD7亚细胞定位的影响。方法:通过生物信息学对BRD7的核定位信号进行预测和结构分析,然后利用绿色荧光蛋白(GFP)介导的直接荧光和间接免疫荧光定位方法分别对核定位信号的功能进行鉴定,并考察其对BRD7亚细胞定位的影响。结果:BRD7的65~96位氨基酸残基具有潜在核定位信号(NLS)的结构特征,该核定位信号包含3簇碱性氨基酸残基,可视为由2个紧密相邻、部分重叠的双向核靶序列NLS1和NLS2组成;并发现NLS及其构成上的NLS1和NLS2均具有介导异源蛋白GFP胞核定位的功能,从而证实BRD7的65~96位残基为BRD7功能性核定位信号所在区域,且单簇碱性氨基酸残基的缺失不足以破坏其核定位信号的功能;同时发现野生型BRD7呈胞核分布,而核定位信号缺失型BRD7主要呈胞浆分布。结论:BRD7的65~96位氨基酸残基为BRD7功能性核定位信号所在区域,在BRD7胞核分布模式中发挥了十分重要的作用。 展开更多
关键词 brd7 转录因子 亚细胞定位 核定位信号
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BRD7逆转录病毒稳定系的构建及其功能评价
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作者 张如华 胡开顺 +1 位作者 武远众 康铁邦 《分子诊断与治疗杂志》 2013年第4期240-244,共5页
目的探索BRD7(bromodomain-containing protein7)是否具有抑癌基因的功能。方法根据NCBI提供的BRD7基因序列设计特异性引物扩增其编码区序列,经酶切、连接转化后进一步挑取单克隆菌落进行菌液PCR筛选及测序鉴定得到阳性重组质粒。共转2... 目的探索BRD7(bromodomain-containing protein7)是否具有抑癌基因的功能。方法根据NCBI提供的BRD7基因序列设计特异性引物扩增其编码区序列,经酶切、连接转化后进一步挑取单克隆菌落进行菌液PCR筛选及测序鉴定得到阳性重组质粒。共转293T细胞后收集浓缩病毒上清并感染U2OS细胞,24h后用嘌呤霉素(puromycin)筛选稳定表达BRD7的细胞株。结果菌落PCR扩增及DNA测序分析证明重组pMSCV-BRD7-GFP质粒克隆成功。GFP绿色荧光结果显示,绝大部分细胞成功整合了pMSCV-GFP或pMSCV-BRD7-GFP外源质粒;Western blotting检测发现感染重组质粒pMSCV-BRD7-GFP的细胞株中BRD7蛋白的表达水平显著高于对照组。功能结果显示,过表达BRD7显著抑制U2OS细胞的增殖,促进下游靶基因p21与MDM2的表达。结论本研究成功构建了针对BRD7基因的逆转录病毒稳定系,且初步证明了BRD7发挥抑癌基因的功能,为下一步深入研究其被调控的机制与功能奠定了基础。 展开更多
关键词 brd7 病毒载体 稳定株 抑癌基因
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Expression of tumor related genes NGX6,NAG-7,BRD7 in gastric and colorectal cancer 被引量:10
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作者 Xiao-MeiZhang Shou-RongSheng +2 位作者 Xiao-YanWang Jie-RuWang JiangLi 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2003年第8期1729-1733,共5页
AIM: NGX6, NAG-7 and BRD7 genes are tumor related genes, which have been newly cloned by positional candidate cloning strategy. This study was designed to investigate the expression levels of NGX6, NAG-7 and BRD7 gene... AIM: NGX6, NAG-7 and BRD7 genes are tumor related genes, which have been newly cloned by positional candidate cloning strategy. This study was designed to investigate the expression levels of NGX6, NAG-7 and BRD7 genes in human gastric and colorectal cancer tissues, and their corresponding normal tissues, and to investigate whether these genes play a role in the pathogenesis of gastric and colorectal cancers.METHODS: Reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR), dot hybridization and Northern blot analysis were used to compare the expression levels of NGX6, NAG-7 and BRD7 genes in 34 gastric cancer tissues and 34 colorectal cancer tissues with their corresponding normal tissues of the same patients, respectively.RESULTS: Among the 34 colorectal cancer specimens and the 34 gastric cancer specimens, the expression of NGX6 in 25 colorectal cancer tissues was absent or very weak (73.5 %) by RT-PCR analysis. The down-regulation rate of NGX6 in colorectal cancer tissues was significantly higher than that in corresponding normal tissues (26.5 %,9/34)(P<0.005). Moreover, the down-regulation of NGX6 was significantly correlated with lymph node and/or distance metastases. Patients with lymph node and/or distance metastasis had much higher down-regulation rate of NGX6 than patients without metastases (93.8 % vs 55.6 %, P<0.05).However no correlation was found between the expression of NGX6 and pathologic type of colorectal cancer in this study, and also the expression of NGX6 did not display any difference between gastric cancer and corresponding normal tissues (58.8 % vs 70.6 %, P>0.25). Dot hybridization and Northern blot analysis confirmed the results of RT-PCR.Furthermore, NAG-7 and BRD7 mRNA was not up- or downregulated in gastric and colorectal cancers compared with their corresponding normal tissues in our study.CONCLUSION: The down-regulation of NGX6 may be closely associated with tumorigenesis and metastasis of colorectal carcinoma. However, it may not contribute to the development and progression of gastric carcinoma. In addition, the expression levels of NAG-7, and BRD7 did not alter in gastric and colorectal cancers. This seems to suggest that NAG-7and BRD7 genes may not play a role in gastric and colorectal carcinogenesis. 展开更多
关键词 肿瘤相关基因 NGX6 NAG-7 brd7 胃癌 结肠直肠癌
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BRD7/9 bromodomains蛋白化学探针研究进展
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作者 张德伟 陈亚东 《广东化工》 CAS 2018年第11期133-135,共3页
Bromodomains(BRDs)结构域可以特异性识别乙酰化的组蛋白赖氨酸,这是表观遗传调控过程中的关键步骤。目前对BRDs家族的研究主要集中在BET家族,对其他家族少有涉及。最近,靶向于BRD7/9的化学小分子探针陆续被发现。本文通过对BRD7/9 brom... Bromodomains(BRDs)结构域可以特异性识别乙酰化的组蛋白赖氨酸,这是表观遗传调控过程中的关键步骤。目前对BRDs家族的研究主要集中在BET家族,对其他家族少有涉及。最近,靶向于BRD7/9的化学小分子探针陆续被发现。本文通过对BRD7/9 bromodomains结构、BRD7/9小分子探针的研究历程及其构效关系等多方面进行总结,以期进一步探索BRD7/9的生物学功能和疾病治疗中的潜在用途,为设计和开发高活性的BRD7/9 bromodomains小分子抑制剂提供参考依据。 展开更多
关键词 brd7/9 化学探针 生物学功能 进展
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