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XBRL应用对审计的影响及应用前景分析 被引量:1
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作者 于书翠 《绿色财会》 2013年第2期15-18,共4页
阐述了XBRL在我国的应用现状及其体系结构,介绍了XBRL对审计工作影响,介绍了XBRL在我国的应用前景及改进思路。
关键词 Xbrl Xbrl鉴证 XML 应用前景 brl ORG
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Transcriptome and Metabolome Revealed the Mechanism of NtBRL3 Overexpression Tobacco(Nicotiana tabacum L.K326)in Response to Drought Stress
2
作者 Jing Yang Tianxiunan Pu +6 位作者 Ke Wan Linqi Wang Yuanshuai Shi Xu Luo Jie Tan Dongmei Wang Yang Liu 《Phyton-International Journal of Experimental Botany》 SCIE 2023年第9期2555-2576,共22页
Drought has severely affected the yield and quality of commercial crops.The BRI1 family plays an important role in plant response to drought stress,and BRL3 gene plays an important role in the study of drought in Arab... Drought has severely affected the yield and quality of commercial crops.The BRI1 family plays an important role in plant response to drought stress,and BRL3 gene plays an important role in the study of drought in Arabidopsis thaliana.In this study,NtBRL3 was constructed as a vector and genetically transformed to obtain‘N.Tobacco K326’overexpression of NtBRL3.The enzyme activities of transgenic tobacco and wild-type tobacco were measured and transcriptome and metabolome analyses were performed.The results showed that the antioxidant enzymes of transgenic tobacco were more active under drought conditions,and 85 significantly differentially metabolites and 106 significantly differentially expressed genes were identified in the metabolome and transcriptome analyses,respectively.Transgenic tobacco NtBRL3ox demonstrated an excessive accumulation of droughtrelated metabolites,sugars such as sucrose and maltotetraose,and amino acids such as proline,compared with WT.We discovered drought-related differential genes in the root transcriptome,among which LOX6,RD22,WSD1,CCD8,and UGT were key genes which play an important role in plant response to drought stress.Our results demonstrate that NtBRL3 overexpression in K326 enhances drought resistance in transgenic tobacco. 展开更多
关键词 Nicotiana tabacum L.K326 TRANSCRIPTOME METABOLOME brl3 gene drought stress
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基于内质网应激PERK/eIF2α/ATF4/CHOP通路探讨枳葛口服液含药血清对乙醇诱导BRL-3A损伤的保护作用及机制研究
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作者 黄晓平 苟沙沙 +4 位作者 李波 王晓栋 刘友平 李志 魏嵋 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2023年第11期3715-3723,共9页
目的基于内质网应激(Endoplasmic reticulum stress,ERS)信号通路PERK/eIF2α/ATF4/CHOP探讨枳葛口服液含药血清对BRL-3A大鼠肝细胞损伤的保护作用及机制。方法(1)制备含药血清:SD雄性大鼠随机分为3组:枳葛口服液组、美他多辛组、正常组... 目的基于内质网应激(Endoplasmic reticulum stress,ERS)信号通路PERK/eIF2α/ATF4/CHOP探讨枳葛口服液含药血清对BRL-3A大鼠肝细胞损伤的保护作用及机制。方法(1)制备含药血清:SD雄性大鼠随机分为3组:枳葛口服液组、美他多辛组、正常组,分别予以枳葛口服液、美他多辛及生理盐水灌胃,连续干预5天,腹主动脉取血制备含药血清。(2)培养正常BRL-3A大鼠肝细胞,用不同浓度乙醇(1.0%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0%、5.0%、7.0%、10.0%)干预细胞24 h后用CCK-8法测定各组细胞存活率。(3)BRL-3A大鼠肝细胞分为正常组,模型组,美他多辛组,枳葛口服液低、中、高剂量组(后简称为低剂量组、中剂量组、高剂量组)。24 h后测定各组细胞上清液中γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、乳酸脱氢酶(LDH)水平,CCK-8检测BRL-3A细胞存活率,Real-time PCR及Western blot检测各组细胞内PERK/eIF2α/ATF4/CHOP通路相关mRNA及蛋白表达水平。结果(1)不同浓度乙醇(1.0%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0%、5.0%、7.0%、10.0%)干预细胞24 h后,细胞存活率随着乙醇浓度的升高呈逐渐下降趋势,当乙醇浓度为5%时,细胞存活率明显下降(P<0.05),故选择乙醇浓度为1.0%、1.5%、2.0%、2.5.0%、3.0%、5.0%进行后续实验。(2)与正常组相比,模型组上清液中GGT、LDH含量显著升高(P<0.05),PERK/eIF2α/ATF4/CHOP通路相关因子mRNA和蛋白的表达显著升高(P<0.05),呈现明显肝损伤状态。(3)与模型组相比,枳葛口服液组及美他多辛组以上指标均呈现不同程度的降低,其中枳葛口服高剂量组效果最显著(P<0.05)。结论枳葛口服液含药血清能够改善乙醇诱导的BRL-3A大鼠肝细胞损伤,其机制可能与抑制内质网应激PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路有关。 展开更多
关键词 枳葛口服液 brl-3A细胞 PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路 内质网应激 酒精性肝损伤
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温度及BRL饲细胞对体外小鼠精原干细胞的影响 被引量:7
4
作者 李莲军 苗永旺 +2 位作者 程美玲 李卫真 卢克焕 《云南农业大学学报》 CAS CSCD 2004年第5期580-583,共4页
将6日龄小鼠生精上皮单细胞分别接种于BRL和STO饲养层上,于32℃或37℃培养,研究其对精原干细胞的影响。结果:在培养的第1周内,2个及4个相连的精原细胞合胞体明显增多。培养1周后,多数精原细胞经短暂的存活及分裂活动后退化消失,培养体... 将6日龄小鼠生精上皮单细胞分别接种于BRL和STO饲养层上,于32℃或37℃培养,研究其对精原干细胞的影响。结果:在培养的第1周内,2个及4个相连的精原细胞合胞体明显增多。培养1周后,多数精原细胞经短暂的存活及分裂活动后退化消失,培养体系中仅保留下少量单个及由细胞间桥相连的双个及4个成串或成团的A型精原细胞。这些细胞在随后的培养过程中,不表现明显的分裂活动,呈碱性磷酸酶阳性反应。根据精原干细胞生物学特性,它们极有可能就是精原干细胞及其子代细胞。不同条件培养体系中的精原干细胞的生物学行为无明显不同,培养60d时均仅有少量精原干细胞存活。结论:BRL细胞能用作饲养层促进精原干细胞存活,但对其更新性增殖没有明显作用;32~37℃对精原干细胞的生物学行为无明显影响,均可用于培养精原干细胞。 展开更多
关键词 精原干细胞 brl饲养层 温度 体外培养 小鼠
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棕榈酸通过上调ACC/FAS/DGAT2通路表达诱导BRL 3A细胞脂肪变性 被引量:5
5
作者 杨玲 杨汶菱 +6 位作者 张绘艳 卞建春 刘宗平 袁燕 邹辉 顾建红 刘学忠 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期2537-2544,共8页
为探究棕榈酸诱导BRL 3A细胞脂肪变性的机制,以不同浓度的PA(0、0.2、0.4、0.6 mmol·L^-1)处理BRL 3A细胞24 h,用CCK-8法、RTCA技术检测细胞增殖情况;油红O染色,观察细胞脂滴生成情况;DAPI/F-actin双染,观察细胞核及骨架形态;采用... 为探究棕榈酸诱导BRL 3A细胞脂肪变性的机制,以不同浓度的PA(0、0.2、0.4、0.6 mmol·L^-1)处理BRL 3A细胞24 h,用CCK-8法、RTCA技术检测细胞增殖情况;油红O染色,观察细胞脂滴生成情况;DAPI/F-actin双染,观察细胞核及骨架形态;采用比色法测定TG含量;采用RT-PCR检测脂肪合成相关基因Acaca、Fasn、Dgat 2转录水平;采用Western blot检测脂肪合成关键蛋白ACC、FAS、SCD1、GPAM、DGAT 2表达量。结果显示:与对照组相比,0.2、0.4 mmol·L^-1 PA对细胞增殖无影响,0.6 mmol·L^-1 PA抑制细胞增殖;油红O染色结果显示0.4 mmol·L^-1 PA处理细胞24 h,脂滴大量蓄积,发生明显脂肪变性;随PA浓度升高,细胞核发生皱缩、变形、碎裂,细胞骨架被破坏,微丝断裂;TG含量极显著增加(P<0.01);不同浓度PA(0.2、0.4、0.6 mmol·L^-1)处理组脂肪合成关键基因Acaca、Fasn、Dgat 2 mRNA转录水平均显著升高(P<0.05),ACC、FAS、SCD1、GPAM、DGAT2蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);0.6 mmol·L^-1 PA组与0.4 mmol·L^-1 PA组相比,SCD1蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。高浓度棕榈酸抑制BRL 3A细胞增殖,对细胞核及骨架产生损伤;棕榈酸诱导细胞发生脂滴蓄积,TG增加,通过上调脂肪合成关键基因Acaca、Fasn、Dgat 2 mRNA转录水平及ACC/FAS/DGAT2通路蛋白表达水平诱导细胞发生脂肪变性。 展开更多
关键词 棕榈酸 脂肪变性 乙酰辅酶A羧化酶 二酰基甘油酰基转移酶2 brl 3A
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分泌型rIL-10基因在正常大鼠肝细胞系BRL中的稳定表达 被引量:2
6
作者 黄月红 陈运新 +3 位作者 张莉娟 郑伟达 陈治新 王小众 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期118-121,共4页
目的:建立稳定表达分泌型大鼠白细胞介素10(rIL-10)基因的正常大鼠肝细胞系(BRL细胞),为研究IL-10抗纤维化的基因治疗打下基础。方法:通过RT-巢式PCR技术从大鼠外周血单核细胞(PBMC)中扩增出rIL-10全长基因,克隆入pcDNA3真核表达载体构... 目的:建立稳定表达分泌型大鼠白细胞介素10(rIL-10)基因的正常大鼠肝细胞系(BRL细胞),为研究IL-10抗纤维化的基因治疗打下基础。方法:通过RT-巢式PCR技术从大鼠外周血单核细胞(PBMC)中扩增出rIL-10全长基因,克隆入pcDNA3真核表达载体构建重组表达载体pcDNA3-rIL-10。鉴定正确后,用受体介导的脂质体转染试剂将pcDNA3-rIL-10转染BRL细胞,高浓度G418筛选,RT-PCR及ELISA法证实rIL-10在BRL细胞中的稳定表达。结果:构建的真核表达载体pcDNA3-rIL-10经质粒双酶切及测序鉴定证实载体构建的正确性。RT-PCR及ELISA法检测出经G418筛选的BRL细胞稳定表达IL-10。结论:成功构建分泌型pcDNA3-rIL-10真核表达质粒及筛选出稳定表达分泌型rIL-10的BRL细胞株,为进一步研究IL-10抗纤维化的基因治疗打下基础。 展开更多
关键词 白细胞介素10 基因构建 基因表达 brl细胞
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加味小柴胡汤对顺铂诱导的BRL细胞相关凋亡蛋白表达的影响 被引量:4
7
作者 刘应柯 李合国 宫璀璀 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期665-667,共3页
目的:探讨加味小柴胡汤对顺铂诱导的大鼠肝BRL细胞凋亡蛋白表达的调控作用。方法:将培养的BRL细胞分为空白组、顺铂组、实验1组(加味小柴胡汤大剂量)、实验2组(小剂量)4组。采用MTT、TUNEL、DNA琼脂糖凝胶电泳、免疫组化、完整细胞蛋白... 目的:探讨加味小柴胡汤对顺铂诱导的大鼠肝BRL细胞凋亡蛋白表达的调控作用。方法:将培养的BRL细胞分为空白组、顺铂组、实验1组(加味小柴胡汤大剂量)、实验2组(小剂量)4组。采用MTT、TUNEL、DNA琼脂糖凝胶电泳、免疫组化、完整细胞蛋白质斑点印迹等方法,检测各组细胞存活率、凋亡率及细胞相关凋亡蛋白的变化。结果:顺铂组细胞凋亡率比空白组明显升高,Rb、p21、Caspase-3、Bax、wp53蛋白表达上调;存活率显著降低,Bcl-2、mp53表达下调;实验1组、2组凋亡率明显较顺铂组降低,存活率升高,其他各指标皆与顺铂组有明显差异,1组作用更明显。结论:加味小柴胡汤可使顺铂诱导的BRL细胞存活率升高,凋亡率降低,对顺铂诱导BRL细胞凋亡蛋白的异常表达有调控作用。 展开更多
关键词 顺铂 加味小柴胡汤 brl细胞 存活率 凋亡率 凋亡蛋白
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雷公藤甲素对BRL大鼠肝细胞增殖和凋亡的影响 被引量:3
8
作者 黄敏聪 潘伟 +3 位作者 卢觅佳 张马娟 夏丽娟 宣尧仙 《上海中医药杂志》 2015年第4期87-90,共4页
目的研究雷公藤甲素(TP)对BRL大鼠肝细胞增殖和凋亡的影响。方法体外培养BRL大鼠肝细胞,经不同浓度TP处理细胞后,采用CCK-8法检测BRL大鼠肝细胞增殖能力;生化仪测定细胞上清液中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)活性;AV/PI双染... 目的研究雷公藤甲素(TP)对BRL大鼠肝细胞增殖和凋亡的影响。方法体外培养BRL大鼠肝细胞,经不同浓度TP处理细胞后,采用CCK-8法检测BRL大鼠肝细胞增殖能力;生化仪测定细胞上清液中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)活性;AV/PI双染后流式细胞仪检测细胞的凋亡率;酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定细胞上清液中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素10(IL-10)、干扰素-γ(IFN-γ)等细胞因子含量。结果与正常对照组比较,雷公藤甲素能明显抑制BRL大鼠肝细胞增殖,诱导细胞凋亡;雷公藤甲素1、10、100μmol/L能明显升高BRL大鼠肝细胞上清液中AST活性,100μmol/L能明显升高ALT活性并降低IL-10含量(P<0.05,P<0.01)。与雷公藤甲素100μmol/L组比较,雷公藤甲素1、10μmol/L组细胞上清液中ALT含量明显降低,雷公藤甲素10μmol/L组细胞上清液中IL-10含量明显升高,雷公藤甲素1μmol/L组细胞凋亡率明显降低且细胞上清液中TNF-α含量明显升高(P<0.05,P<0.01)。与雷公藤甲素10μmol/L组比较,雷公藤甲素1μmol/L组细胞凋亡率明显降低,细胞上清液中TNF-α含量明显升高(P<0.01)。结论雷公藤甲素对BRL大鼠肝细胞增殖具有明显的抑制作用,且呈浓度依赖性,该抑制作用可能与诱导BRL大鼠肝细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 雷公藤甲素 brl大鼠 肝细胞 增殖 凋亡
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BRL-37344对心力衰竭大鼠β肾上腺素受体表达水平的影响(英文) 被引量:3
9
作者 孔一慧 李为民 +2 位作者 田颖 甘润韬 孙桂芳 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期81-86,共6页
目的 探讨 β3 肾上腺素受体 (β3 AR)及其激动剂BRL 37344 (BRL)在心力衰竭中的作用。方法大鼠分为对照组、异丙肾上腺素 (Iso)组和Iso +BRL组。Iso组和Iso +BRL组大鼠间隔 2 4h ,scIso 340mg·kg- 12次制作心力衰竭模型。 8周后 ... 目的 探讨 β3 肾上腺素受体 (β3 AR)及其激动剂BRL 37344 (BRL)在心力衰竭中的作用。方法大鼠分为对照组、异丙肾上腺素 (Iso)组和Iso +BRL组。Iso组和Iso +BRL组大鼠间隔 2 4h ,scIso 340mg·kg- 12次制作心力衰竭模型。 8周后 ,Iso +BRL组大鼠从尾静脉给予BRL 0 .4nmol·kg- 1·min- 1,10min ,每周 2次 ,给药 2或 6周。分别于给Iso后 10或 14周测定死亡率、血流动力学、左室重 /体重、心肌组织 β1 ,β2 和 β3 ARmRNA水平。结果  14周时对照组、Iso组和Iso +BRL组分别死亡 0 / 2 0 ,3/ 18和 5 / 2 2 (P >0 .0 5 )。Iso使左室收缩末压、±dp/dtmax明显降低 ,左室等容舒张时间常数、左室舒张末压明显增高 ,左室重 /体重明显增加 ;与Iso组比 ,Iso +BRL组的心脏舒缩功能进一步下降 ,左室重 /体重进一步增加。Iso组 β1 ARmRNA水平降低 ,β3 ARmRNA水平升高 ,与Iso组比较 ,Iso +BRL组 β1 ARmRNA水平更低 ,β3 ARmRNA水平更高。β2 ARmRNA 3组均有下降趋势 ,但无统计学差异。结论衰竭心脏β1 AR水平下降及 β3 AR水平增高可导致心功能降低。β3 ARmRNA水平在衰竭心脏比非衰竭心脏明显增高 ,应用 β3 AR激动剂可明显加重心力衰竭。 展开更多
关键词 受体 肾上腺素 β RNA 信使 心力衰竭 异丙肾上腺素 brl-37344
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因宁片减轻T_3诱导BRL肝细胞损害的体外实验研究 被引量:2
10
作者 周静 王成蹊 +3 位作者 周涛 潘弟仪 侯连兵 王伯阳 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期119-122,共4页
目的:观察因宁片对T3诱导的BRL肝细胞的增殖、肝功能和氧化应激的影响,为进一步阐明药物作用机制提供实验依据。方法:25只雌性SD大鼠,随机分为5组:空白血清对照组,因宁片低、中、高剂量组及甲亢灵组。大鼠灌服相应剂量的药物后,腹腔静... 目的:观察因宁片对T3诱导的BRL肝细胞的增殖、肝功能和氧化应激的影响,为进一步阐明药物作用机制提供实验依据。方法:25只雌性SD大鼠,随机分为5组:空白血清对照组,因宁片低、中、高剂量组及甲亢灵组。大鼠灌服相应剂量的药物后,腹腔静脉采血,分离含药血清。建立肝细胞T3损害模型,在不同浓度因宁片药物血清作用下,应用MTT法测定药物作用后细胞存活率的变化,全自动生化分析仪测定培养上清液中AST、ALT的含量,分光光度法测定细胞内MDA、SOD。结果:随着因宁片血药浓度升高,T3损害后的BRL肝细胞存活率逐渐增加;因宁片能显著减少模型细胞ALT、AST的释放;模型组BRL的细胞混悬液中的MDA含量显著升高,SOD活性显著降低,因宁片能明显降低MDA含量,提高SOD活性。结论:因宁片的药物血清对T3诱导BRL肝细胞损害有保护作用,提高BRL肝细胞存活率,降低细胞培养上清液中转氨酶含量,减轻肝细胞氧化应激损害。 展开更多
关键词 因宁片 药物血清 T3 肝损害 brl MTT 肝功能 氧化应激
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BRL 37344急性用药对心力衰竭大鼠血流动力学和β肾上腺素受体表达的影响(英文) 被引量:1
11
作者 孔一慧 杨宝峰 +4 位作者 李为民 杨树森 田颖 薛竞宜 李宝馨 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期33-38,共6页
目的观察心力衰竭大鼠急性给予β3肾上腺素受体(β3-AR)激动剂BRL37344是否与慢性给药一样,使β3-AR表达进一步增加,心脏功能进一步恶化。方法大鼠SC异丙肾上腺素(Iso,340mg·kg^-1,2次,间隔24h)制备心衰模型。8周后静脉给... 目的观察心力衰竭大鼠急性给予β3肾上腺素受体(β3-AR)激动剂BRL37344是否与慢性给药一样,使β3-AR表达进一步增加,心脏功能进一步恶化。方法大鼠SC异丙肾上腺素(Iso,340mg·kg^-1,2次,间隔24h)制备心衰模型。8周后静脉给予BRL373440.4nmol·kg^-1·min^-1,10min,测定给药后0,10,30min,1,2,3h,1,2和7d的血流动力学变化;逆转录聚合酶链反应方法测定0,1,2和7d的心肌组织β—AR mRNA水平。结果与Iso模型组相比,Iso+BRL组注射BRL 37344后1~3h心率、+dp/dtmax和左室收缩末压明显增加,左室舒张末压明显降低,之后恢复至注射BRL 37344前水平。与正常对照组相比,BRL组注射BRL37344后β1-β2-和β3-AR水平变化不明显,Iso组β1-ARmRNA水平明显降低,β3-ARmRNA水平明显上升。Iso+BRL组注射BRL37344后d2起,β1-AR mRNA水平较Iso组进一步降低,β3-AR mRNA进一步上升,d7时变化更明显。结论BRL37344急性用药对衰竭心脏血流动力学有短暂的改善作用,但与慢性给药同样使衰竭心脏β1-AR mRNA水平下降和β3-AR mRNA水平上升,这有可能导致心脏功能的恶化。 展开更多
关键词 受体 肾上腺素 B 基因表达 心力衰竭 brl 37344
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芒果苷对H_2O_2诱导的BRL细胞氧化损伤的保护作用 被引量:3
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作者 史才兴 李晓琎 +2 位作者 袁丽丽 程葆华 徐旭东 《解剖学研究》 CAS 2017年第2期110-114,共5页
目的探讨芒果苷对过氧化氢诱导的正常大鼠肝BRL细胞氧化损伤的保护作用。方法选取正常大鼠肝细胞株BRL,通过过氧化氢诱导法制备细胞氧化损伤模型,实验设对照组、H_2O_2组、芒果苷组。HE染色、台盼蓝染色观察细胞形态变化和存活率变化;... 目的探讨芒果苷对过氧化氢诱导的正常大鼠肝BRL细胞氧化损伤的保护作用。方法选取正常大鼠肝细胞株BRL,通过过氧化氢诱导法制备细胞氧化损伤模型,实验设对照组、H_2O_2组、芒果苷组。HE染色、台盼蓝染色观察细胞形态变化和存活率变化;比色法检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量;Western blot检测细胞中Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达变化。结果对照组BRL细胞贴壁生长良好,排列紧密。H_2O_2诱导后细胞形态不规则,胞膜皱缩,贴壁能力下降;细胞存活率降低;抗氧化酶SOD、GSH-Px活性降低,MDA含量升高(P<0.05);Bax和Caspase-3蛋白表达升高(P<0.05)、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05)。与H_2O_2组相比,芒果苷可显著改善H_2O_2引起的细胞形态变化,提高细胞存活率;提高SOD、GSH-Px活性,降低MDA含量(P<0.05);抑制Bax和Caspase-3蛋白表达(P<0.05),上调Bcl-2蛋白表达(P<0.05)。结论芒果苷对BRL细胞氧化损伤具有保护作用,其作用机制可能与其提高细胞清除氧自由基能力和抑制细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 芒果苷 H2O2 肝细胞株brl 氧化应激 细胞凋亡
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BRL饲细胞及血清浓度对体外小鼠精原干细胞的影响 被引量:1
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作者 李莲军 卢晟盛 +3 位作者 黎宗强 杨小淦 韦英明 卢克焕 《广西农业生物科学》 CAS CSCD 2004年第3期238-242,共5页
分别以大鼠肝细胞(BRL)或小鼠胚胎成纤维细胞(STO)为饲养层,采用含5%、10%及20%胎牛血清的培养液,培养6日龄小鼠生精上皮细胞,研究饲养层和血清浓度对精原干细胞生物学行为的影响。结果表明:在培养的第1周内,2个及4个连成串的精原细胞... 分别以大鼠肝细胞(BRL)或小鼠胚胎成纤维细胞(STO)为饲养层,采用含5%、10%及20%胎牛血清的培养液,培养6日龄小鼠生精上皮细胞,研究饲养层和血清浓度对精原干细胞生物学行为的影响。结果表明:在培养的第1周内,2个及4个连成串的精原细胞合胞体数量明显增加,同时大多数精原细胞逐渐退化。培养1周后,大多数精原细胞经短暂的存活及分裂活动后退化消失,培养体系中仅保留下少量单个及由细胞间桥相连的双个及4个成串或成团的A型精原细胞。这些细胞在随后的培养过程中,不表现明显的分裂活动,呈圆球形,表达碱性磷酸酶。不同条件培养体系中的精原细胞及精原干细胞的生物学行为无明显不同,培养20~30d时均有少量精原干细胞存活。这说明BRL细胞能用作饲养层促进精原干细胞存活,但对其更新性增殖没有明显作用;培养液中高浓度胎牛血清对精原干细胞存活和增殖无明显影响,但能促进睾丸体细胞增殖。 展开更多
关键词 精原干细胞 brl饲养层 胎牛血清 体外培养 小鼠
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BRL条件培养基在ES细胞培养中的应用方法探讨 被引量:1
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作者 曾秋棠 祝武强 +3 位作者 曹林生 秦孺子 张桂清 蒋桔泉 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期398-401,共4页
目的 :探讨布法罗大鼠肝细胞条件培养基 (Buffaloratlivercellconditionedmedium ,BRL)在ES细胞培养中的应用方法。方法 :ES细胞复苏后分别培养在BRL条件培养基、小鼠胚胎成纤维细胞饲养层 (mouseembryonicfibroblast,MEF)及合并应用BR... 目的 :探讨布法罗大鼠肝细胞条件培养基 (Buffaloratlivercellconditionedmedium ,BRL)在ES细胞培养中的应用方法。方法 :ES细胞复苏后分别培养在BRL条件培养基、小鼠胚胎成纤维细胞饲养层 (mouseembryonicfibroblast,MEF)及合并应用BRL条件培养基和MEF饲养层的环境中 ,通过细胞计数、拟胚体计数和ES细胞集落边缘细胞分化状态比较ES细胞在三种培养基中生长和分化差异。结果 :与BRL组比较 ,MEF组和BRL +MEF组细胞生长较快(P <0 .0 1) ,ES细胞集落边缘分化细胞较少 ;MEF组和BRL +MEF组无明显差异。结论 :在复苏后早期阶段ES细胞培养中 ,不宜单独应用BRL条件培养基 。 展开更多
关键词 ES细胞培养 brl条件培养基 应用
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N-acetylserotonin对H_2O_2诱导大鼠肝BRL细胞氧化损伤的保护作用 被引量:1
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作者 史才兴 姜政辰 +5 位作者 李晓琎 王海亮 李进 于树娜 王守训 蒋吉英 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第21期3486-3488,共3页
目的:探讨N-acetylserotonin(NAS)对H2O2诱导正常大鼠肝BRL细胞氧化损伤的保护作用。方法:选择正常大鼠肝细胞株BRL,采用H2O2诱导法制备BRL细胞氧化应激损伤模型,HE染色和台盼蓝染色观察细胞形态及细胞存活率的变化;比色法检测细胞中超... 目的:探讨N-acetylserotonin(NAS)对H2O2诱导正常大鼠肝BRL细胞氧化损伤的保护作用。方法:选择正常大鼠肝细胞株BRL,采用H2O2诱导法制备BRL细胞氧化应激损伤模型,HE染色和台盼蓝染色观察细胞形态及细胞存活率的变化;比色法检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的变化。结果:对照组BRL细胞贴壁生长良好,排列紧密,胞膜完整,细胞界限清晰。H2O2诱导后细胞膜皱缩,形态不规则,细胞界限模糊,贴壁能力下降,出现大片细胞缺失;细胞存活率下降;SOD活性降低,而MDA含量升高。NAS可明显改善H2O2引起的细胞形态变化,使细胞存活率升高,增加SOD活性并降低MDA含量。结论:NAS可通过增强抗氧化系统的激活、减轻抗氧化系统受抑制的程度,发挥对H2O2诱导的BRL细胞氧化损伤的保护作用。 展开更多
关键词 氧化性应激 N-ACETYLSEROTONIN brl细胞 H2O2 细胞凋亡
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加味小柴胡汤对顺铂诱导BRL细胞核转录因子和热休克蛋白70表达的影响 被引量:2
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作者 刘应柯 张玉峰 +1 位作者 宫璀璀 刘尚岭 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2009年第6期31-32,共2页
目的观察加味小柴胡汤对顺铂诱导的大鼠肝BRL细胞核转录因子-kB(NF-kB)、热休克蛋白70(HSP70)表达的影响。方法将BRL细胞分为4组:空白组、顺铂组及加味小柴胡汤大、小剂量组。采用完整细胞蛋白质斑点印迹、免疫组织化学等方法,检测各组... 目的观察加味小柴胡汤对顺铂诱导的大鼠肝BRL细胞核转录因子-kB(NF-kB)、热休克蛋白70(HSP70)表达的影响。方法将BRL细胞分为4组:空白组、顺铂组及加味小柴胡汤大、小剂量组。采用完整细胞蛋白质斑点印迹、免疫组织化学等方法,检测各组细胞NF-kB、HSP70变化。结果顺铂组NF-kB表达明显较空白组升高,HSP70表达降低,组间比较差异有统计学意义;加味小柴胡汤大、小剂量组NF-kB明显较顺铂组低,差异有统计学意义;加味小柴胡汤大、小剂量组HSP70表达均升高,但仅加味小柴胡汤大剂量组差异明显。结论加味小柴胡汤可下调顺铂诱导的BRL细胞NF-kB表达,上调HSP70表达,此作用可能是该方减轻细胞氧化损伤、抑制细胞凋亡重要机理之一。 展开更多
关键词 brl细胞 顺铂 加味小柴胡汤 细胞核转录因子-kB 热休克蛋白70
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TGF-β1对大鼠肝细胞系BRL-3A凋亡和细胞周期的影响 被引量:2
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作者 王世美 郑素军 +5 位作者 邢欣悦 邓志华 刘梅 俞豪 李长勇 段钟平 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2011年第16期1659-1665,共7页
目的:研究转化生长因子β1(TGF-β1)对大鼠肝细胞系BRL-3A凋亡和细胞周期的影响.方法:MTT法检测TGF-β1对细胞增殖的影响:将BRL-3A细胞分为6组,分别给予不同浓度的TGF-β1(0、2、4、6、8、10μg/L),检测各组细胞24、36、48h时的增殖活性... 目的:研究转化生长因子β1(TGF-β1)对大鼠肝细胞系BRL-3A凋亡和细胞周期的影响.方法:MTT法检测TGF-β1对细胞增殖的影响:将BRL-3A细胞分为6组,分别给予不同浓度的TGF-β1(0、2、4、6、8、10μg/L),检测各组细胞24、36、48h时的增殖活性;进一步将BRL-3A细胞分为TGF-β1处理组和对照组,分别给予和不予TGF-β1(8μg/L),进行如下检测:流式细胞仪检测两组细胞24、36、48h时的凋亡情况和细胞周期分布;实时定量RT-PCR检测两组细胞24、36、48h时CyclinE、Cdk-2、EGF、HGF、Bcl-2、c-Myc、MMP9、NF-κB基因的表达变化.结果:MTT结果显示,各浓度TGF-β1组在24、36、48h时的细胞增殖活性差异无统计学意义;流式细胞仪分析结果显示,TGF-β1处理组24、36、48h时的细胞凋亡率和细胞周期分布与对照组间的差异均无统计学意义;实时定量RT-PCR发现,TGF-β1处理组相对于对照组,CyclinEmRNA、Cdk2mRNA、EGFmRNA在24h时分别下调至0.194±0.103、0.181±0.064、0.634±0.116倍,36h时分别下调至0.379±0.173、0.457±0.123、0.619±0.112倍,48h时分别上调至1.956±0.215、2.17±0.471、7.66±0.437倍;HGFmRNA在24、36、48h时均明显下调,分别至0.152±0.068、0.146±0.053、0.158±0.061倍;Bcl-2mRNA在24、36h时无统计学差异,48h时上调至1.567±0.115倍;c-MycmRNA、MMP9mRNA、NF-κBmRNA在3个时刻均上调,24h时分别至1.742±0.389、3.484±0.411、1.625±0.369倍,36h时分别至2.292±0.361、1.563±0.323、1.486±0.494倍,48h时分别至2.499±0.475、2.233±0.493、3.612±0.364倍.以上基因表达差异均有统计学意义(P<0.05).结论:大鼠肝细胞系BRL-3A对TGF-β1促凋亡和细胞周期阻滞作用的敏感性低下,可能与非Smads途径的激活,NF-κB、Bcl-2、c-Myc、MMP9表达的上调有关. 展开更多
关键词 转化生长因子Β1 brl-3A细胞 细胞凋亡 细胞周期 肝再生
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新蛋白C7orf42促进大鼠肝细胞BRL-3A增殖 被引量:1
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作者 张春艳 常翠芳 +3 位作者 张世馥 马纪 张富春 徐存拴 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期150-155,共6页
目的探讨未知功能蛋白C7orf42对体外培养的大鼠肝细胞BRL-3A增殖的影响。方法基因干涉下调C7orf42表达后,用MTT、Ed U掺入法检测C7orf42对BRL-3A细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞周期进程以及Reat-time PCR和Western blotting检测细... 目的探讨未知功能蛋白C7orf42对体外培养的大鼠肝细胞BRL-3A增殖的影响。方法基因干涉下调C7orf42表达后,用MTT、Ed U掺入法检测C7orf42对BRL-3A细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞周期进程以及Reat-time PCR和Western blotting检测细胞增殖相关基因表达。结果 MTT法检测表明,转染C7orf42干涉片段后48h,干涉组比阴性对照组细胞活力降低11%(P<0.05);Ed U掺入法检测表明,实验组的Ed U阳性细胞比率比对照组降低了13%(P<0.05);流式细胞术检测表明,干涉组比阴性对照组S+G2/M期的细胞数降低12%(P<0.05);Reat-time PCR检测表明,干涉C7orf42表达后细胞增殖相关基因JUN、CCND1、MYC和CCNA2的表达分别下调26%、31%、37%和14%(P<0.05);Western blotting检测表明,干涉C7orf42表达后细胞增殖相关蛋白JUN、CCND1、MYC和CCNA2的表达分别下调59%、54%、18%和27%(P<0.05)。结论 C7orf42可能通过上调细胞增殖相关蛋白JUN、CCND1、MYC和CCNA2的表达,促进体外培养的大鼠肝细胞BRL-3A增殖。 展开更多
关键词 新蛋白 C7orf42 肝细胞系brl-3A SIRNA 细胞增殖 免疫印迹法 大鼠
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人胰岛素抑制大鼠肝细胞系BRL-3A凋亡且促增殖 被引量:1
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作者 王改平 陈莎莎 +4 位作者 李晓芳 杨婧 赵卫明 常翠芳 徐存拴 《基础医学与临床》 CSCD 2015年第10期1320-1324,共5页
目的探讨人胰岛素对体外培养的大鼠肝细胞BRL-3A增殖和凋亡的影响。方法人胰岛素作用于BRL-3A后,用MTT法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期,qRT-PCR检测相关基因的表达。结果人胰岛素呈剂量依赖性地促进BRL-3A增殖(P<0... 目的探讨人胰岛素对体外培养的大鼠肝细胞BRL-3A增殖和凋亡的影响。方法人胰岛素作用于BRL-3A后,用MTT法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期,qRT-PCR检测相关基因的表达。结果人胰岛素呈剂量依赖性地促进BRL-3A增殖(P<0.05或P<0.01);500 nmol/L人胰岛素处理3 d后,处于G0/G1期的细胞比例显著下降(P<0.05);促凋亡基因BAX表达下调(P<0.05),而促细胞增殖基因CCNA2表达上调(P<0.05)。结论人胰岛素可通过下调BAX表达和上调CCNA2表达,从而抑制大鼠肝细胞BRL-3A凋亡,促进细胞增殖。 展开更多
关键词 人胰岛素 brl-3A细胞 细胞凋亡 细胞周期
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脂多糖对BRL大鼠肝细胞的损伤研究 被引量:1
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作者 黄敏聪 潘伟 +3 位作者 卢觅佳 张马娟 夏丽娟 宣尧仙 《浙江实用医学》 2015年第2期90-92,共3页
目的研究脂多糖(LPS)对BRL大鼠肝细胞的损伤作用。方法体外培养BRL大鼠肝细胞,经不同浓度LPS处理细胞后,检测BRL大鼠肝细胞的增殖能力和凋亡率,以及谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)活性,肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素10(IL-10)细胞因... 目的研究脂多糖(LPS)对BRL大鼠肝细胞的损伤作用。方法体外培养BRL大鼠肝细胞,经不同浓度LPS处理细胞后,检测BRL大鼠肝细胞的增殖能力和凋亡率,以及谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)活性,肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素10(IL-10)细胞因子含量。结果脂多糖在一定程度上能抑制BRL大鼠肝细胞增殖,并且呈浓度依赖性,高浓度脂多糖(200mg/L)能够升高细胞培养上清液中AST、ALT活性,提高TNF-α含量及降低IL-10含量。结论高浓度脂多糖(200mg/L)能造成BRL大鼠肝细胞的损伤,损伤作用可能与打破促坏死因子与保肝因子之间的平衡有关。 展开更多
关键词 脂多糖 brl大鼠肝细胞 增殖 凋亡 细胞因子
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