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Transcriptome and Metabolome Revealed the Mechanism of NtBRL3 Overexpression Tobacco(Nicotiana tabacum L.K326)in Response to Drought Stress
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作者 Jing Yang Tianxiunan Pu +6 位作者 Ke Wan Linqi Wang Yuanshuai Shi Xu Luo Jie Tan Dongmei Wang Yang Liu 《Phyton-International Journal of Experimental Botany》 SCIE 2023年第9期2555-2576,共22页
Drought has severely affected the yield and quality of commercial crops.The BRI1 family plays an important role in plant response to drought stress,and BRL3 gene plays an important role in the study of drought in Arab... Drought has severely affected the yield and quality of commercial crops.The BRI1 family plays an important role in plant response to drought stress,and BRL3 gene plays an important role in the study of drought in Arabidopsis thaliana.In this study,NtBRL3 was constructed as a vector and genetically transformed to obtain‘N.Tobacco K326’overexpression of NtBRL3.The enzyme activities of transgenic tobacco and wild-type tobacco were measured and transcriptome and metabolome analyses were performed.The results showed that the antioxidant enzymes of transgenic tobacco were more active under drought conditions,and 85 significantly differentially metabolites and 106 significantly differentially expressed genes were identified in the metabolome and transcriptome analyses,respectively.Transgenic tobacco NtBRL3ox demonstrated an excessive accumulation of droughtrelated metabolites,sugars such as sucrose and maltotetraose,and amino acids such as proline,compared with WT.We discovered drought-related differential genes in the root transcriptome,among which LOX6,RD22,WSD1,CCD8,and UGT were key genes which play an important role in plant response to drought stress.Our results demonstrate that NtBRL3 overexpression in K326 enhances drought resistance in transgenic tobacco. 展开更多
关键词 Nicotiana tabacum L.K326 TRANSCRIPTOME METABOLOME brl3 gene drought stress
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镉致大鼠BRL 3A细胞DNA及线粒体损伤 被引量:4
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作者 张义冉 胡迪 +6 位作者 王家晶 王玲玲 姚路连 袁燕 顾建红 刘学忠 刘宗平 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期759-763,共5页
为了研究镉对大鼠肝细胞系(BRL 3A细胞)DNA及线粒体损伤的作用,本研究选用0、10、20、40μmol/L的醋酸镉分别作用于BRL 3A细胞12h,利用四氮唑蓝比色分析法(MTT法)测定细胞存活率,显微镜观察各组细胞形态,通过彗星试验法检测细胞DNA的损... 为了研究镉对大鼠肝细胞系(BRL 3A细胞)DNA及线粒体损伤的作用,本研究选用0、10、20、40μmol/L的醋酸镉分别作用于BRL 3A细胞12h,利用四氮唑蓝比色分析法(MTT法)测定细胞存活率,显微镜观察各组细胞形态,通过彗星试验法检测细胞DNA的损伤,用透射电镜观察细胞线粒体超微结构,并检测细胞Caspase 3,9的活力。结果显示,随镉浓度的增大(10~40μmol/L),BRL 3A细胞存活率降低,拖尾率、尾长、尾部DNA含量、细胞Caspase 3,9的活力和线粒体变形肿胀以及空泡现象均呈增加趋势;表明镉可致BRL 3A细胞DNA及线粒体损伤,并呈剂量依赖关系。 展开更多
关键词 醋酸镉 brl3A细胞 DNA损伤 线粒体损伤 彗星试验
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自噬在镉致BRL 3A细胞损伤中的保护作用 被引量:3
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作者 谢俊泽 杨小康 +5 位作者 严磊 顾建红 袁燕 卞建春 刘宗平 刘学忠 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1899-1902,1915,共5页
以大鼠肝细胞系(BRL 3A)为模型,不同浓度的镉处理细胞,用免疫印迹法和免疫荧光法检测自噬标记分子LC3表达;通过添加雷帕霉素(自噬促进剂)和氯喹(自噬抑制剂)来升高和降低自噬水平,MTT法检测自噬水平的变化对细胞活性的影响。结果显示:... 以大鼠肝细胞系(BRL 3A)为模型,不同浓度的镉处理细胞,用免疫印迹法和免疫荧光法检测自噬标记分子LC3表达;通过添加雷帕霉素(自噬促进剂)和氯喹(自噬抑制剂)来升高和降低自噬水平,MTT法检测自噬水平的变化对细胞活性的影响。结果显示:与对照组相比,随着镉浓度的升高,细胞LC3-Ⅱ含量先上升后下降,8μmol/L时,LC3-Ⅱ含量最高,差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01)。与镉处理组相比,自噬水平的上升可以显著提高细胞活性(P<0.05),自噬水平的下降显著降低细胞活性(P<0.05)。结果表明:镉可以引起BRL 3A细胞自噬水平的上升,激活的自噬对镉致细胞损伤具有一定的保护作用。 展开更多
关键词 自噬 brl3A细胞 细胞活性
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棕榈酸致BRL 3A细胞脂肪变性过程中对自噬和凋亡的影响 被引量:3
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作者 王玲 赵健亚 +2 位作者 宋瑞龙 邹辉 刘宗平 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1058-1065,共8页
为了探讨自噬和凋亡在棕榈酸(PA)诱导BRL 3A细胞脂肪变性中的作用机制,以不同浓度(0、0.2、0.4、0.6 mmol/L)PA处理BRL 3A细胞24 h,用油红O染色观察其对脂滴生成的影响,试剂盒测定TG含量的变化,Western-blotting检测LC3Ⅱ、P62、Bax和B... 为了探讨自噬和凋亡在棕榈酸(PA)诱导BRL 3A细胞脂肪变性中的作用机制,以不同浓度(0、0.2、0.4、0.6 mmol/L)PA处理BRL 3A细胞24 h,用油红O染色观察其对脂滴生成的影响,试剂盒测定TG含量的变化,Western-blotting检测LC3Ⅱ、P62、Bax和Bcl2蛋白的表达情况,流式细胞术检测细胞凋亡率。Western-blotting检测0.4 mmol/L PA处理细胞不同时间(0、6、12、24 h)以及0.4 mmol/L PA与5 nmol/L Baf A1共处理时LC3Ⅱ和P62蛋白的表达情况,观察PA处理对BRL 3A细胞自噬流的影响。结果显示,0.4mmol/L PA作用BRL 3A细胞24 h对细胞增殖无显著影响,但细胞内产生脂滴较多;TG含量随PA浓度增加而显著增加(P<0.05或P<0.01);LC3Ⅱ和P62的蛋白表达水平随PA浓度增加而上升;与对照组相比,0.4 mmol/L PA处理BRL 3A细胞12 h时,LC3Ⅱ的表达水平上升(P<0.05),P62的表达水平下降(P<0.05),而处理24 h时LC3Ⅱ和P62的表达水平均上升;与对照组相比,0.4 mmol/L PA与5 nmol/L Baf A1单独处理组LC3Ⅱ、P62相对表达量均升高(P<0.01);与Baf A1单独处理组相比,PA与Baf A1共处理组LC3Ⅱ、P62相对表达量进一步升高(P<0.01);随着PA浓度增加,细胞凋亡率增加,Bax/Bcl2值逐渐增加。结果表明,0.4 mmol/L PA处理BRL 3A细胞24 h可成功诱导脂肪变性,处理12 h内可使自噬水平升高,而处理24 h可使细胞发生自噬流阻滞和凋亡增加。 展开更多
关键词 BRL 3A 棕榈酸 脂肪变性 自噬 凋亡
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TLR4/MyD88通路在油酸促进BRL 3A细胞脂肪变性中的作用
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作者 王玲 赵健亚 刘宗平 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期112-117,共6页
为研究TLR4通路在油酸(oleic acid,OA)致BRL 3A细胞脂肪变性中的作用,用不同浓度的OA(0、1.2、1.8、2.4 mmol/L)处理BRL 3A细胞24 h,再用显微镜观察细胞损伤状况,DAPI染色观察细胞核形态,油红O染色观察脂滴生成量,甘油三脂(TG)试剂盒测... 为研究TLR4通路在油酸(oleic acid,OA)致BRL 3A细胞脂肪变性中的作用,用不同浓度的OA(0、1.2、1.8、2.4 mmol/L)处理BRL 3A细胞24 h,再用显微镜观察细胞损伤状况,DAPI染色观察细胞核形态,油红O染色观察脂滴生成量,甘油三脂(TG)试剂盒测定TG含量,Western-blot检测TLR4通路蛋白TLR4、My D88、TBK1的表达量。结果显示:与对照组相比,随着OA浓度增加,细胞损伤增加,细胞核变形、破碎、皱缩,呈一定的浓度梯度依赖性;细胞内脂滴生成量增加,TG含量显著增加(P<0.05);与对照组相比,TLR4、My D88及TBK1的表达量随着OA浓度增加呈显著或极显著增加(P<0.05或P<0.01)。这表明油酸可能通过TLR4/My D88途径促进BRL 3A细胞发生脂肪变性。 展开更多
关键词 油酸 BRL 3A细胞 脂肪变性 TLR4
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HNF4α在油酸致BRL 3A细胞极低密度脂蛋白合成紊乱中的作用
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作者 王绮绮 康国静 +5 位作者 陈嘉伟 邹辉 顾建红 袁燕 卞建春 刘学忠 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期797-804,共8页
为探究HNF4α在油酸致BRL 3A细胞极低密度脂蛋白(VLDL)合成紊乱中的作用,笔者以不同浓度油酸(0、0.6、1.2、2.4 mmol/L)处理BRL 3A细胞24 h,检测细胞增殖;油红O染色法观察细胞内脂滴;测定细胞内及培养液中甘油三酯(TG)含量;检测培养液中... 为探究HNF4α在油酸致BRL 3A细胞极低密度脂蛋白(VLDL)合成紊乱中的作用,笔者以不同浓度油酸(0、0.6、1.2、2.4 mmol/L)处理BRL 3A细胞24 h,检测细胞增殖;油红O染色法观察细胞内脂滴;测定细胞内及培养液中甘油三酯(TG)含量;检测培养液中VLDL含量;RT-PCR检测相关基因Hnf4α、Apob、Mtp、Vldlr m RNA转录水平;Western-blot检测HNF4α、ApoB、MTP和核内HNF4α蛋白表达量。结果显示,低浓度油酸(0.6 mmol/L)处理组中HNF4α的转录水平极显著增加(P<0.01),MTP的蛋白表达水平极显著增高(P<0.01),促进细胞内VLDL的合成;高浓度油酸(2.4 mmol/L)致HNF4α出现胞质滞留,核内HNF4α蛋白表达极显著降低(P<0.01),并极显著抑制MTP和ApoB蛋白的表达(P<0.01),从而抑制VLDL的第一步合成,诱导细胞发生脂肪变性。 展开更多
关键词 HNF4α 油酸 BRL 3A细胞 极低密度脂蛋白 脂肪变性
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Preventive effects of the polysaccharide of Larimichthys crocea swim bladder on carbon tetrachloride(CCl_4)-induced hepatic damage 被引量:6
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作者 ZHAO Xin QIAN Yu +1 位作者 LI Gui-Jie TAN Jun 《Chinese Journal of Natural Medicines》 SCIE CAS CSCD 2015年第7期521-528,共8页
The aim of the present study was to determine the preventive effects of the polysaccharide of Larimichthys crocea swim bladder(PLCSB) on CCl4-induced hepatic damage in ICR mice.The in vitro preventive effects of PLCSB... The aim of the present study was to determine the preventive effects of the polysaccharide of Larimichthys crocea swim bladder(PLCSB) on CCl4-induced hepatic damage in ICR mice.The in vitro preventive effects of PLCSB on CCl4-induced liver cytotoxic effect were evaluated in BRL 3A rat liver cells using the MTT assay.The serum levels of AST,ALT,and LDH in mice were determined using commercially available kits.The levels of IL-6,IL-12,TNF-α,and IFN-γ were determined using ELISA kits.The pathological analysis of hepatic tissues was performed with H and E staining,and the gene and protein expressions were determined by RT-PCR and Western blotting,respectively.PLCSB(20 μg·m L-1) could increase the growth of BRL 3A rat liver cells treated with CCl4.The serum levels of AST,ALT,and LDH were significantly decreased when the mice were treated with two doses of PLCSB,compared with the control mice(P < 0.05).PLCSB-treated groups also showed reduced levels of the serum pro-inflammatory cytokines IL-6,IL-12,TNF-α,and IFN-γ.PLCSB could decrease the liver weight,compared to the CCl4-treated control mice.The histopathology sections of liver tissues in the 100 mg·kg-1 PLCSB group indicated that the animals were recovered well from CCl4 damage,but the 50 mg·kg-1 PLCSB group showed necrosis to a more serious extent.The 100 mg·kg-1 PLCSB group showed significantly decreased mR NA and protein expression levels of NF-κB,i NOS,and COX-2,and increased expression of IκB-α compared with the CCl4-treated control group.In conclusion,PLCSB prevented from CCl4-induced hepatic damage in vivo. 展开更多
关键词 POLYSACCHARIDE Larimichthys crocea swim bladder BRL 3A cells LIVER Cytokine expression levels
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双酚类化合物对BRL 3A肝细胞增殖、氧化应激和致突变作用研究 被引量:1
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作者 张真 洪颖 +3 位作者 盖雅婷 林丽花 翁鹭娜 李玲玲 《预防医学》 2022年第3期302-306,共5页
目的比较双酚A (BPA)、双酚S (BPS)、双酚F (BPF)和双酚AF (BPAF)对大鼠BRL 3A肝细胞增殖及氧化应激的影响,并研究其致基因突变作用。方法体外培养的BRL 3A肝细胞分别暴露于0、5、10、25、50、100、150和200μmol/L的BPA、BPS、BPF和BPA... 目的比较双酚A (BPA)、双酚S (BPS)、双酚F (BPF)和双酚AF (BPAF)对大鼠BRL 3A肝细胞增殖及氧化应激的影响,并研究其致基因突变作用。方法体外培养的BRL 3A肝细胞分别暴露于0、5、10、25、50、100、150和200μmol/L的BPA、BPS、BPF和BPAF,48 h后采用CCK-8法测定细胞存活率,计算半数抑制浓度(IC;);选择对细胞增殖有抑制作用的最低浓度,采用DCFH-DA荧光探针法检测BRL 3A肝细胞内活性氧(ROS)水平,反映细胞氧化应激程度;采用Ames试验研究1 000、200、40、8和1.6μg/皿的4种双酚类化合物对组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门菌(TA1535、TA97a、TA98、TA100和TA102)回变菌落的影响。结果 BPA和BPF在100~200μmol/L,BPAF在25~200μmol/L,肝细胞存活率随浓度增加而明显下降,BPS在5~200μmol/L,肝细胞存活率无明显变化;BPA、BPS、BPF和BPAF对BRL 3A肝细胞的IC;分别为131.7、>200、187.5和21.6μmol/L。BPS(100μmol/L)和BPAF(25μmol/L)未引起ROS水平明显变化;BPA (100μmol/L)和BPF (100μmol/L)显著升高ROS水平。Ames试验结果显示,4种双酚类化合物对TA1535、TA97a、TA98、TA100和TA102均未呈现致基因突变作用。结论 BPAF对BRL 3A肝细胞的毒性最大,BPS低剂量暴露的影响较小;双酚类化合物对肝细胞的毒性效应可能与诱导氧化应激有关。在本试验条件下,4种双酚类化合物均未呈现致基因突变性。 展开更多
关键词 双酚类化合物 BRL 3A肝细胞 氧化应激 AMES试验 致突变性
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