抗菌肽BSN-37的生物信息学分析

为研究抗菌肽BSN-37的生物学功能,利用在线软件分析了抗菌肽BSN-37的生物信息学特性.结果表明:抗菌肽BSN-37有8个正电荷氨基酸,为阳离子型亲水性抗菌肽,等电点为12.48,富含脯氨酸和精氨酸,主要由β转角和无规则卷曲构成,没有信号肽、跨膜区和磷酸化位点,有多个蛋白酶切位点,存在抗原表位.根据分析结果推测抗菌肽BSN-37除膜作用机制外还有其他独特的抗菌机制.

抗菌肽BSN-37的抑菌活性及其稳定性分析

试验旨在研究抗菌肽BSN-37的抑菌活性和稳定性。采用微量倍比稀释法测定抗菌肽BSN-37的最小抑菌浓度(MIC),菌落计数法分析抗菌肽BSN-37对大肠杆菌CVCC1568的杀菌动力学特征,扩散法测定抗菌肽BSN-37的盐离子稳定性、酸碱稳定性、血清稳定性、胰酶稳定性、热稳定性、反复冻融稳定性、室温保持稳定性、药效保持时间稳定性。结果显示,抗菌肽BSN-37对革兰氏阴性菌(大肠杆菌和沙门氏菌)的MIC为1.5625～25μg/mL,对革兰氏阳性菌(枯草芽孢杆菌和短小芽孢杆菌)的MIC为1.5625～12.5μg/mL,对真菌(白色念珠菌)没有活性;抗菌肽BSN-37可在90min内完全杀灭大肠杆菌CVCC1568;除了Fe2+和胰酶会影响抗菌肽BSN-37的抑菌活性外,在75～100℃的高温、150～250mmol/L高浓度盐离子(Na+、K+、Ca2+和Mg2+)、20%～25%饱和浓度的Cu2+、pH 4～10、20%～25%的血清、10～12次的反复冻融、10～12d室温保存等条件下仍能保持较好的抑菌活性,药效保持时间可达7.5d。本试验结果表明,抗菌肽BSN-37具有替代抗生素成为新抗菌药物的潜力,为抗菌肽BSN-37的临床应用提供了理论依据。

牛源抗菌肽BSN-37的生物活性

BSN-37是从牛脾脏分离鉴定的含有37个氨基酸的新抗菌肽。为了阐明该抗菌肽的生物活性,本试验检测了其对大肠杆菌（ATCC25922）、鸡白痢沙门菌（BNCC124693）、金黄葡萄球菌（ATCC25923）、白色念珠菌（ATCC90029）及5株临床大肠杆菌和7株临床鼠伤寒沙门菌的最低抑菌浓度（MICs）;同时,测定其对兔血红细胞悬液的溶血性和对Vero细胞、小鼠腹腔巨噬细胞（RAW264.7）和鸡成纤维细胞（CEF）的细胞毒性。结果表明,BSN-37对大肠杆菌ATCC25922、鸡白痢沙门菌（BNCC124693）MICs值分别为33.33和25.00mg/L;对所检测的临床耐药大肠杆菌（卡那霉素MICs≥320.00mg/L）和鼠伤寒沙门菌的MICs值均低于50.00mg/L;对金黄葡萄球菌和白色念珠菌的MICs值均大于100.00mg/L。400mg/L的BSN-37与兔血红细胞体外37℃恒温孵育1h后,红细胞溶血率仅为1.34%;50mg/L的BSN-37与RAW264.7细胞作用后,细胞存活率为96.3%,当BSN-37质量浓度为100,200和400mg/L时,ERO、RAW264.7和CEF 3种细胞的存活率均大于100.00%。以上结果证实,BSN-37对革兰阴性肠道菌有较强抑菌活性,溶血性很低且无细胞毒性,具有良好的临床药物开发前景。