刚地弓形虫CST1/BSR4免疫磁珠的制备及初步应用

通过在大肠杆菌原核表达系统中表达弓形虫包囊囊壁蛋白CST1以及缓殖子期表面蛋白BSR4,获得CST1及BSR4的重组蛋白,将此两种蛋白分别免疫小鼠,制备多克隆抗体.之后将此两种多克隆抗体分别偶联磁珠,制备成免疫磁珠,此两种免疫磁珠可以识别弓形虫包囊及包囊中的缓殖子.将猪肉样品进行研磨或匀浆后与免疫磁珠进行反应,则样品液中的包囊或包囊中释放的缓殖子会特异性的与免疫磁珠结合,若加大样品量,则起到富集包囊或缓殖子的作用.将富集得到的成分进行后续的PCR检测,检测的目的基因为高拷贝的弓形虫529 bp片段,从而建立猪肉中刚地弓形虫免疫磁珠富集_PCR检测技术.通过PCR鉴定,结果表明制备的CST1、BSR4免疫磁珠能够有效的对猪肉中的弓形虫包囊以及缓殖子进行富集.